唾液幽门螺杆菌抗原检测法-HPS

唾液幽门螺杆菌抗原检测法-HPS 唾液幽门螺杆菌抗原检测法-HPS 的临床应用评价 葉国钦 中国医疗前沿;2009,4(20);18-19 摘要 目的;评价唾液螺杆菌抗原检测法(HPS) 在口腔和胃幽门螺杆菌感染中的临床应用价值。 ;使用唾液幽门螺杆菌抗原检测法HPS，对2008年6月~11月浙江大学医学院附属第一医院等6个单位共288例进行唾液幽门螺杆菌抗原检测，第1组129例，为胃镜检查幽门螺杆菌阳性，经根除治疗后4周以上，接受13C或14CUBT复查者;第2组126例，为初诊患者，在接受胃镜检查同时，进行WS银染、RUT或14CUBT检查;第3组33例，为无消化道症状的对照组，均接受14C-UBT检查。 结果;288例中HPS阳性217例，3组的阳性率分别为75.97%、73.02%和81.82%。288例中13C和14CUBT、RUT、WS银染阳性共118例，其中93例HPS阳性，3组的阳性率分别为88.64%、70.15%和100%。 结论; 唾液中存在高幽门螺杆菌检出现象，口腔可能为幽门螺杆菌除胃以外另一个重要的定植地，口腔内幽门螺杆菌感染与胃内幽门螺杆菌炎症密切相关。口腔内幽门螺杆菌的根除治疗，值得今后进一步研究和探讨。 关键词 幽门螺杆菌 抗原 唾液 HPS 澳大利亚两位医生Warren和Masshan在1983年首次报道胃溃疡是幽门螺杆菌(H. Pylori，简称Hp)感染所致。目前己经确认幽门螺杆菌感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤、胃癌的发病密切相关。近年来，越来越多的临床资料明，幽门螺杆菌感染还参与许多胃肠外疾病的发生、发展过程，幽门螺杆菌感染与胃肠外疾病关系引起了广泛的关注[1]。幽门螺杆菌感染，胃幽门是一个非常重要的部位，但是近年来有许多事实说明，幽门螺杆菌主要源头在口腔中，而胃幽门可能是幽门螺杆菌感染的继发部位。幽门螺杆菌感染了全球半数以上人口，中国也是一个幽门螺杆菌感染率较高的国家，而且人口众多，幽门螺杆菌感染己对国民健康造成了极大的危害。正因为如此，如何快速、高效、廉价的进行幽门螺杆感染的实验室检测，尤其是找到一种敏感性、特异性高，方法简便，能诊断口腔高幽门螺杆感染的检测方法非常必要。我们的研究团队在过去的10年里，己研发 [2]出"幽门螺杆菌唾液测试板"(HPS)并己获得技术专利，及中国和欧洲食品药品监督管理局的注册证。本研究运用HPS对唾液中幽门螺杆菌抗原进行检测，以探明唾液中幽门螺杆菌的存在，及其阳性检出率与13C和14C尿素呼气试验(UBT)、快速尿素酶试验(RUT)，胃黏膜组织切片嗜银染色镜检(WS银 染)的相关性，探讨HPS检测法在口腔和胃幽门螺杆菌感染中的诊断价值。 1 资料和方法 1.1研究对象 病例来源于2008年6月至11月期间，因消化道症状就诊的患者。第1组129例，其中浙江大学医学院附属第一医院58例，浙江大学医学院附属邵逸夫院院71例，均为胃镜检查幽门螺杆菌阳性，经幽门螺杆菌根除治疗后4周以上，接受13C或14C UBT复查的患者，其中男68例，女61例，年龄43(21~76)岁。第2组126例，其中浙江省中医院39例，杭州市第一医院36例，嘉兴市圣和胃肠病诊所51例，均为初诊患者，排除了4周内服过抗生素、铋剂、质子泵抑制剂等对幽门螺杆菌检测有影响的药物，在接受胃镜检查的同时进行WS银染、RUT或14CUBT检查，其中男49例，女77例，年龄49(17~77)岁。第3组33例，为美国Ameritek公司的职员，均无消化道症状，4周内未用过抗生素，其中男8例，女25例，年龄32(23~45)岁。 1.2 研究方法 1.2.1唾液标本采集;取唾液1~2ml于试杯内送检。 1.2.2 唾液幽门螺杆抗原HPS检测法; 用吸管吸取4滴唾液，滴入取样杯中;滴加2滴缓冲液于取样杯中;更换吸管，充分混匀后，吸取3-4滴混合液，滴入唾液板的吸样窗口6,5-15分钟观察结果，如指示窗口5显示T线、C线，说明螺旋杆菌阳性;如指示窗口5只显示C线而没有T线，说明螺旋杆菌阴性。注意事项:测定前，患者一小时内不能进行饮食和饮水。 1.3; 13C和14C-UBT、RUT、W-S银染的检测; 均按常规方法进行。 1.4 统计学处理; 采用X2检验，P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 第1组129例中HPS阳性98例(75.97%)，13C或14CUBT阳性共44例(34.11%);第2组126例中HPS阳性92例(73.02%)，WS银染、RUT、14CUBT阳性共67例(53.17%);第3组33例中HPS阳性27例(81.82%)，14CUBT阳性7例(21.21%)。HPS阳性率3组比较无显著性差异(X2=3.46，P>0.05)。13C和14CUBT、RUT、WS银染的阳性率3组比较有显著性差异(X2=15.61，P<0.01)其中第1组与第2组、第2组与第3组比较差异显著(X2=9.44、10.73，P均<0.01)，第1组与第3组比较无显著性差异(X2=2.03，P>0.05) 。 第1组44例13C或14CUBT阳性者中HPS阳性39例(88.64%);第2组67例WS银染、RUT、14CUBT阳性者中HPS阳性47例(70.15%);第3组7例14C-UBT阳性者HPS均阳性(100%)。 3 讨论 长期以来，多数学者和临床医生把注意力集中在胃内幽门螺杆菌感染。自从1989年krajiden等首次成功地从胃炎病人牙菌斑中分离培养出幽门螺杆菌以来，口腔作为幽门螺杆菌的另一个定植地倍受人们关注。伦敦大学医学院检查了100名儿童，用胃镜、RUT、切片组织培养的方法诊断胃幽门螺杆菌。从阳性儿童的口腔牙菌斑中用PCR检测幽门螺杆菌，发现68%胃幽门螺杆菌阳性者，其牙菌班有幽门螺杆菌存在，同时在胃幽门螺杆菌阴性儿童，也有24% [3]采用PCR法检测患者唾液中幽门螺在牙菌斑中找到幽门螺杆菌。Tiwayi等 杆菌DNA，结果显示有消化道症状患者幽门螺杆菌检出率为87.5%，无症状者 [4]为60%。Song等采用巢式PCR检测出胃黏膜幽门螺杆菌阳性患者的唾液中幽 [5]门螺杆菌DNA阳性率为64%。俞莹莹等采用唾液幽门螺杆菌抗原ELISA法检测慢性胃病患者唾液幽门螺杆菌抗原246例，慢性非活动性胃炎患者唾液中幽门螺杆菌抗原阳性检出率为46.92%，慢性活动性胃炎患者唾液中幽门螺杆菌抗原阳性检出率为74.29%。本研究采用唾液抗原HPS技术共检测288例，3组HPS阳性检出率分别为75.97%、73.02%和81.82%。288例中13C和14CUBT、R UT、WS银染阳性共118例，其中3组HPS阳性检出率分别为88.64%、70.15%和100%。结果显示，采用HPS检测唾液中幽门螺杆菌抗原阳性检出率甚高，与上述多数报道相近，支特唾液中存在高幽门螺杆菌检出现象。 口口传播或粪口传播为幽门螺杆菌可能的传播途径。胃幽门螺杆菌炎症的源头在口腔中，幽门螺杆菌随着唾液吞咽到胃内，在胃内定植引起胃幽门螺杆 [6]菌炎症，它是当今国际医学界的主流观点。幽门螺杆菌存在于牙齿与牙龈之间一种叫"生物胶片膜"(Bifilm)、又称牙菌斑的屏障中，它阻当了药物进入这个区域，这是为什么常规幽门螺杆菌根除治疗对胃幽门螺杆菌感染有效 [7]，而对口腔牙菌斑内幽门螺杆菌疗效不佳的原因。Miyabayashi等观察47例幽门螺杆菌阳性胃病患者，幽门螺杆菌根除治疗后，用巢式PCR检测唾液中幽门螺杆菌DNA，结果发现，唾液中幽门螺杆菌阳性者的根除率(52.1%)明显低于唾液中幽门螺杆菌阴性患者(91.6%)(P<0.05)。本研究结果显示，129例胃镜检查幽门螺杆菌阳性患者，经幽门螺杆菌根除治疗后4周以上接受复查，HPS阳性率为75.93%，13C或14CUBT阳性率为34.11%。口腔内幽门螺杆菌的存在，可能影响胃幽门螺杆菌根除治疗的疗效，也是胃病复发的一个重要因素。 目前，唾液幽门螺杆菌抗原检测方法有PCR法、巢式PCR法、ELISA法和我们团队研发的HPS法。我们的唾液抗原检测法是测定唾液中具有毒力标志细胞毒相关基因A (Cytotoxin-assocated geneA，CagA) 幽门螺杆菌释放的尿素酶，这种酶的结构和口腔中其它细菌产生的尿素酶没有交叉反应。HPS法真真做到快速、高效、廉价的进行幽门螺杆菌感染的临 床检测，而且敏感性、特异性高，可用于口腔幽门螺杆菌感染的诊断，胃幽门螺杆菌炎症患者更易从其唾液中发现较高的幽门螺杆菌检出率。HPS检测法，为临床提供了一种新的非入侵性的无创幽门螺杆菌诊断检测方法，同时也可以作为临床流行病学调查的手段。此外，口腔内幽门螺杆菌是否需要行相关根除治疗，如何治疗，值得今后进一步研究和探讨。根据胃幽门螺杆菌炎症的源头是口腔内幽门螺杆菌感染;唾液中幽门螺杆菌阳性胃病患者幽门螺杆菌治疗根除率明显低于唾液中幽门螺杆菌阴性患者;口腔内幽门螺杆菌的存在是胃病治疗后复发的重要因素，所以我们主张对口腔内幽门螺杆菌应进行相关根除治疗。在幽门螺杆菌病治疗方面，我们认为必须跨越依赖抗生素的方法，去探索新的理念，寻找新的方法。我们团队已发现了有些自然界存在的物质，它可以撕断幽门螺杆菌，这一新技术我们已在实验室和志愿者中取得初步成果。我们把这种"自然物质"放入漱口液、口香糖或口腔喷射剂中，可以消除牙菌斑，杀灭幽门螺杆菌。制造成胶囊或片剂口服，可以治疗胃幽门螺杆菌炎症。 作者感謝浙江大學笫一, 二醫院,邵乙夫醫院, 兒童醫院, 浙江笫一醫院, 杭州笫一醫院, 浙江中醫院, 浙江腫瘤等醫院, 嘉兴市圣和胃肠病诊所的幫助. 参考文献 1. 陈白莉，胡品津;幽门螺杆菌感染与胃肠外疾病[J].中国实用内科杂志，2008，28(9):722-723 2. 葉国钦;中國專利証書, 专利号 ZL 2009201514524 3. Tiwari SK，Khan AA，Ahmed KS，et al. Rapid diagnosis of Helicobacter pylori infection in dyspeptic patients using salivar secretion:a non - invasive approach [J].Singapore Med J，2005，46(5):224-228 4. Song Q，Lange T，Spahr A，et al. Characteristic distribution pattern of Helicobacter pylori in dental plaque and saliva detected with nested PCR[J].J Med Microbiol，2000，49(4):349-353 5. 俞莹莹，吴勤动，许凯声等;唾液幽门螺杆菌抗原检测与慢性胃炎活动性及癌前病变关系的研究[J].中国实用内科杂志，2006，26(18):1421-1423 6. Bruce A. Dye, DDS, MPH, Deanna Kruszon-Moran, MS and Geraldine McQuillan, PhD; The Relationship Between Periodontal Disease Attributes and Helicobacter pylori Infection Among Adults in the United States, The authors are with the National Center for Health Statistics, Centers for Disease Control and Prevention, Hyattsville, Md. Am J Public Health. 2002, 92(11): 1809–1815 7. Miyabayashi H，Furhata K，Shimizu T，et al. Influence of oral Helicobacter pylori; the success of eradication therapy against gastric Helicobacter pylori. J.Helicobacter.2000,5(1):30-37豆丁致力于构建全球领先的文档发布与销售平台，面向世界范围提供便捷、安全、专业、有效的文档营销服务。 包括中国、日本、韩国、北美、欧洲等在内的豆丁全球分站，将面向全球各地的文档拥有者和代理商提供服务， 帮助他们把文档发行到世界的每一个角落。豆丁正在全球各地建立便捷、安全、高效的支付与兑换渠道，为每一 位用户提供优质的文档交易和账务服务。