BXSB小鼠胸腺内B细胞异常增生机理的初步
BXSB小鼠胸腺内B细胞异常增生机理的初
步分析
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潍坊医学院1996年第18卷第3期l91
BXSB小鼠胸腺内
B细胞异常增生机理的初步分析
丝堡’.
(免疫学教研室261042北京医科大学免疫学系)
摘要采用H—TdR掺八法检测了不同月龄与性别BXSB小鼠胸臃中B
细胞的增殖反应,初步分析B细胞异常增生的机制.结果显示发病的BXSB小
鼠胸腺B细胞具有自发增殖能力,此与正常小鼠不同,而其对LPS的应誉增殖
反应较正常小鼠高2.5倍以上.发病的BXSB小鼠胸腺基质细胞对其B细胞
的增殖无任何影响.实验结果表明发病BXSB小鼠胸腺B细胞的增加与其奉
身的异常有关,而非胸腺基质细胞的作用.
关键词BXSB小鼠1胸腺}B细胞;基质细胞j增殖反应l一一——,
BXSB小鼠能白发地出现类似于人类
系统性红斑狼疮(SLE)样临床表现和免疫
病理变化,因而是研究人类SLE发病机理
的良好动物模型雄性BXSB小鼠的
SLE发病(2月龄)较雌性的(月龄)早且
严重,这与其Y染色体连锁的自身免疫增
强基因(Y—chromsomelinkedaution
muneaccelerator,Yaa)有关.以前,在
对BXSB小鼠研究时曾报道过高月龄雄
性BXSB小鼠啕腺内含有较多的B细
咆.进一步研究发现BXSB小鼠胸腺内B
细咆和Ig分泌细咆(IgSC)的升高与其
SLE的发病程度呈正相关,且主要是IgG
类型的IgSC.实验在此基础上对BXSB
小鼠胸腺内B细胞异常增生的机制作了
初步分析.
1
与方法
1.I动物BXSB小鼠由北医大三院自
美国Jackson实验室引进.
1.2膊腺B细胞的纯化按文献方
法,首先用Thy】单抗加补体去除啕腺
细胞,然后再用包被有抗小鼠IB的平皿亲
和纯化B细胞.用直接IF法测定B细胞
的纯度.
】.3胸腺基质细胞的纯化按文献方
法”,用胶原酶等消化胸腺组织,然后重复
用小牛血清梯度分离纯化啕腺基质细咆.
用瑞氏染色法鉴定基质细胞的纯度.
1.4细胞增殖试验按常规的H—TdR
掺入法,测定cpm值.
2结果
2.j胸腺B细胞自发增殖能力的比较
本实验所用啕腺B细胞均从,6只小鼠
胸腺中纯化而来,并调整成相同的细胞浓
度(3X10’细咆/孔).不加任何刺激剂,自
发增殖24h,结果见图I.’
从图1可见1月龄雌性BXSB小鼠
(未发病)的啕腺B细胞培养24h和72h,
其cpm值无明显变化.表明无自发增生能
l|
l92雌坊医学院1996年第18卷第3期
力.8月龄雄性BXSB小鼠(已发病)的胸
腺B细咆培养24h和72h,其cpm值显着
增加.显示存在自发增生能力,类似于其脾
B细咆的自发增生特性.
2.2胸腺B细胞对脂多糖(LPS)应答增
殖能力的比较实验中B细胞的来源及
浓度同上,另外每孔中加入4Og/m】
LPS0.1mI,培养72h测定cpm值.结果
见图2.
经多克隆B细咆激活剂LPS刺激,8
月龄雄性BXSB小鼠(发病)啕腺B细胞
的cpm值与其脾B细咆的cpm值相似.
但显着高于1月龄雌性BXSB小鼠(未发
病)胸腺B细咆的cpm值,表明发病的
BXSB小鼠晦腺B细咆对LPS的增殖应
答能力高于未发病的小鼠晦腺B细胞.
2.3混合细胞培养结果1月龄雌性
BXSB小鼠(未发病)的胸腺B细咆(3×
10细咆/孔)中加或不加8月龄雄性
BXSB小鼠(发病)的晦腺基质细胞,混合
培养72h,测定cpm值.实验结果表明加
或不加发病的BXSB小鼠胸腺基质细胞
对未发病的BXSB小鼠啕腺B细胞的增
殖无显着影响,即无促进啕腺B细胞增生
的能力.
3讨论
近年来,人们认为正常小鼠晦腺中也
存在极少量的B细胞及其前体细胞,并参
与T细咆的选择发育过程.发病的
BXSB小鼠胸腺内B细胞和IgSC增多,并
且与其SLE的严重程度呈正相关.本实
验结果表明发病的BXSB小鼠胸腺B细
胞具有自发增生的能力,并且与其脾B细
胞相似;对多克隆激括剂LPS的应答增殖
能力也显着增高.正常小鼠晦腺内存在的
极少量B细胞的自发增殖能力和对LPS
应答增殖的能力显着低于其脾B细咆.
因此,发病的BXSB小鼠晌腺B细胞也具
有高活性.B细胞高活性是SLE小鼠的
显着特征之一.晦腺基质细咆以其表面分
子和分泌的细胞因子调控T细咆的发
育但是,发病的BXSB小鼠胸腺基质细
咆对正常小鼠的胸腺B细咆无促进增殖
的作用.本实验结果初步提示发病的
BXSB小鼠胸腺内异常增多的B细胞不同
于正常小鼠胸腺内的B细2乜,其异常增多
的原因可能与其本身的高活性相关,而与
晦腺基质细胞无直接关系.由于SLE小
鼠的B细胞高活性受其本身的基因异常
等多种因素的影响,因此,BXSB小鼠胸腺
内B细咆增多的机理需进一步深入研
究.
(本文经李在连教授审阅,特此致谢.)
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(收稿E:i期I995—04—29)
(奉文图l,2见第205页)
雌坊医学院1996年第18卷第3期193
THEPRELIMINARYANALYSISoFTHEABNoRMAL
PRoLIFERAT10NMECHANISMoFBXSBMOUSETHYMICBCELL
XuZhiwei,DengHongye
DezJartrneJttof,m】【0.9+261042
BXSBmoLiseisOgleofSLEmodels.AsBXSBmousegetsrfloreseriouslyill,the
amountofitsthymicBeel1andIgSCraisesabnormally.Forthisre~son,thefunctionof
thethymicBcellofthesickmaleBXSBmicewereexamined,includingthespontanOUS
proliferationandresponsiveproliferationtoLPS.Theresultsshowthattheabnormal
increaseofthethymicBcelIsofthesickBXSBmouseispossiblyduetoitsthymicBeelI,
nottotlxymicstroma~cel1.
KEYWORDSBXSBmouse;thymus;Bcell;stromalcell;proljferation
蜜蜂螫伤致过敏性休克1例
周茹卿郭清风
(文登中心匡院264400)
病人,女+l2岁,固左手食指被蜜蜂螫
伤两处+伴头晕,恶心,呕吐30min而来院
急诊+途中不省人事,口吐白沫.查体:病
人神志不清,血压8.7/7.3kPa+心率1】3
次/rain,律整呼吸25次/rain,双肺闻及
湿罗音.面色苍白+四肢发凉,口唇紫绀.
诊断:蜂螯伤并过敏性休克.处理:首先挑
出蜂刺.用2葡萄糖20m],氟美橙
LOmg静注{0.1肾上腺素0.5ml皮下
注射.10葡萄糖酸钙lOml,静脉注射,并
根据血压变化情况用升压药,维生素C等
治疗,约25min后+病人面色转豇润,血压
10.6/8kPa.30min后神志清醒,血压正
常+双肺湿罗音消失.
讨论蜂的尾部有刺囊和刺针,刺八
皮肤后放出毒液,毒液主要成分有蚁酸,神
经毒素,组织胺等.多数情况下蜂螯伤仅
有局部红肿,刺痛,数小时后可自愈,少数
人可发生局部水泡或坏死+严重螯伤后可
有全身症状.如发热,头痛,恶心,呕吐,腹
泻,烦躁等症状+继而肌痉挛昏迷,对蜂毒
过敏者即可出现过敏反应,严重者可出现
过敏陛休克危及病人生命.
抢救时应首先挑出毒刺.避免用力挤
压,局部可用肥t水或3氨水或5碳酸
氢钠溶液清洗,以中和毒素.疼痛严重+可
用止痛药对症治疗,酌情用抗组织胺类药
物.如非鄢根盐酸苯海拉明等.
关键词蜜蜂;过敏性休克;螫伤
(收稿日期1996—05—12)