几个病毒学的基本概念 MOI,TCID50,PFU

几个病毒学的基本概念 MOI,TCID50,PFU Multiplicity of infection (MOI) The multiplicity of infection (abbreviated MOI) is the average number of phage per bacterium. The MOI is determined by simply dividing the number of phage added (ml added x PFU/ml) by the number of bacteria added (ml added x cells/ml). The average number of phage per bacterium in the population could be 0.1, 1, 2, 10, etc, depending upon how you set up the experiment. Although the MOI tells you the average number of phage per bacterium, the actual number of phage that infect any given bacterial cell is a statistical function. For example, if the MOI is 1, some cells will get infected with one phage but some cells may be infected with 0 phage and other cells infected with two phage. The proportion of cells in a population infected by a specific number of phage (n) can be calculated from the Poisson distribution. PFU:plaque forming unit，空斑形成单位。感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml。由于测定pfu往往重复性 较差，因此近些年许多研究又开始采用TCID50方法来计算病毒的感染单位。因此建议也可使用TCID50 法。 MOI :multiplicity of infection，感染复数。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时 噬菌体与细菌的数量比值，也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。一般认为 MOI是一个比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfu number/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的 研究中，含义是感染时病毒与细胞数量的比值。 然而，由于病毒的数量单位有不同的表示方式，从而使MOI产生了不同的含义。能产生细胞裂解效应的病 毒例如单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu表示病毒数量，因此其MOI的含义与传统的概念相同。 传统意义上的MOI的测定，其原理是基于病毒感染细胞是一种随机事件，遵循Poisson分布规律，可计算 出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数(MOI)。其公式为: P = 1- P(0) ,P(0) = e-m 或m = -InP(0)。 其中: P 为被感染细胞的百分率 P(0)为未被感染细胞的百分率 m为MOI值 例如，如果要感染培养皿中99%的培养细胞，则: P(0) = 1% = 0.01 m = -In(0.01)= 4.6 pfu/cell。 TCID50 Protocol: 1:制备96孔板单层细胞 2:将病毒做系列稀释，横向接种单层细胞板，每稀释度重复3孔 3:每日观察细胞病变，记录高于50和低于50,病变孔的病毒稀释度， 4:计算比距，获得TCID50 计算比距: (高于50,的病变率,50,)/(高于50,病变率,小于50,病变率),比距; 比距与接近50%病变率的病毒的稀释度的指数相加，就获得了指数。 比如:比色计算或者显微镜观察病毒的TCID50在10的负7和8次方之间，那么，指数,8与比距相加，获得的新的指数，就是TCID50的指数，TCID50=10的-7.几次方 TCID50与 PFU换算: PFUs,0.7×TCID50的滴度