【doc】高效液相色谱法测定珍菊降压片氢氯噻嗪含量

【doc】高效液相色谱法测定珍菊降压片氢氯噻嗪含量 高效液相色谱法测定珍菊降压片氢氯噻嗪 含量 医药导报2O09年8月第28卷第8期?1083? 注射剂中所添加的辅料溶液多为高沸点且黏性较大的助溶剂, 故难以将银杏内酯B从这些助溶剂中分离出来,而蒸发光散射 检测器要求样品的溶剂约12O?能够成为气体蒸发掉,鉴于 上述两点,《中华人民共和国药典》2005年版收载的蒸发光散射 检测器测定法并不适合银杏内酯B注射液的含量测定,而示差 折光检测器,质谱仪,磁共振仪等仪器不如高效液相色谱仪普 及,使用简单可靠的质量控制方法对制剂的生产应用也具有积 极意义,笔者在本实验中建立的高效液相色谱法能作为银杏内 酯B注射液的质量控制方法,简便可靠,方法稳定,也可为含银 杏内酯B的其他中药制剂的质量控制提供参考. [D0I]10.3870/yydb.2009.08.043 [参考文献] [1]王兴鹏,袁耀宗,徐家裕.银杏苦内酯对急性胰腺炎大鼠的治疗作 用及机制[J].中国药理学通报,1995,l】(3):199—2O1. .___I- Cj 同 [2]李树清,叶冀明.光化学诱导的血栓形成性脑缺血及其代谢改变 [J].中国病理生理杂志,l994,lO(1):95—99. [3]邵胜荣,蒋惠娣,曾苏.高效液相色谱法测定银杏内酯B滴丸的 含量[J].药物分析与检验,20o6,23(3):2l5—217. [4]管玉民,尤慧莲.不同类型银杏叶中银杏内酯的含量测定[J].药 物分析杂志,20o1,2(2):107. [5]戴翔翎,凌娅,施炜,等.HPLc-ED法测定注射用银杏内酯 中银杏内酯A与银杏内酯B的含量[J].南京中医药大学, 2oo5,21(1):22—23. [6]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[z].北京:化学工 业出版社.2005:221. [7]崔红芳,叶正良,周大铮,等.银杏叶中4种银杏内酯的含量测定 [J].化学工业与工程,2oo7,24(6):532—535. 效液相色谱法测定珍菊降压片氢氯噻嗪含量 刘法千,王学英,金芳 (浙江得恩德制药有限公司,新昌312560) [摘要】目的建立测定珍菊降压片中氢氯噻嗪含量及均匀度的高效液相色谱法.方法采用Kromasil0Dsl c.8(250mm×4.6mm,5m),流动相为乙腈.1%磷酸溶液(11:89),检测波长为225nm,流速1.0mL?min,.结 果氢氯噻嗪在1.0—10.0?mL范围内呈良好的线性关系,回归方程为l,=1.Oll9一0.0299,r=1.0000(n=6). 平均回收率98.8%,兄为1.0%(=9).结论该方法简单,灵敏,准确,可用于珍菊降压片中氢氯噻嗪的质量控制. [关键词]珍菊降压片;氢氯噻嗪;高效液相色谱法 [中图分类号]R286;R927.1[文献标识码]A[文章编号】10o4-o781(20o9)08—10832 珍菊降压片为中西药复方制剂,主要成分为盐酸可乐定,2方法与结果 氢氯噻嗪,芦丁,珍珠层粉及野菊花膏粉.在临床上广泛用于2.1色谱条件色谱柱为Kmmasi10Ds1,c.(25Omm× 治疗高血压.尽管该药已在市场上销售多年,但其质量不4.6mm,5m);流动相:乙腈.1%磷酸溶液(11:89);流速: 尽完善,氢氯噻嗪仅有鉴别项目,虽然其含量少,每片仅为1.OmL?min..;进样量:10. 5mg,但疗效强,成分明确,含量测定更为重要,为了更好地保2.2检测波长的选择取氢氯噻嗪对照品适量,加甲醇溶解, 证该药临床疗效稳定,笔者在本实验中建立其氢氯噻嗪含量及在Tu一1901紫外分光光度计,20o,800nm波长范围内扫描,氢 均匀度含量测定方法,以期更有效地控制珍菊降压片质量.氯噻嗪波长在225和270nm波长处都有较大吸收,而在225nm 1仪器与试药波长处吸收最大.在上述色谱条件下,氢氯噻嗪与其他峰达到 1.1仪器戴安四元泵液相色谱仪(美国),配有uVDl70u紫分离,阴性样品无干扰. 外检测器;全自动进样器AS1?100AutomatedSampleinjector;柱2.3对照品溶液和供试品溶液的制备 温箱ThenT1ostattedcolumncompanmentTcC一100配有戴安数据2. 3.1对照品溶液的制备精密称取1O5?干燥至恒重的氢 工作站.氯噻嗪对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.12mg的溶液,精 1.2试药乙腈为色谱纯,水为重蒸纯化水,其他有关试剂均密量取5L,置于l00mL量瓶中,加50%甲醇至刻度(每1mL 为分析纯.对照品氢氯噻嗪对照品(批号:1oo309—200001),供含氢氯噻嗪6g),摇匀,即得. 含量测定用,购自中国药品生物制品检定所.珍菊降压片(浙2. 3.2供试品溶液的制备取本品20片,除去包衣,精密称 江得恩德制药有限公司生产,批号:060l1O7,06011l1,定 ,研细,取粉末约0.25g,精密称定,置于1o0L量瓶中,加水 06O1l12).2mL ,振摇使溶散,再加甲醇适量,超声处理(功率300w,频率 [收稿日期]2008-o7—1o5OkHz)15min,放冷至室温,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,精密量 [作者简介】刘法千(1971一),男,浙江新昌人,副主任药师,学取续滤液3mL,置于25mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得. 士,主要研究方向:新药开发及质量标准.电话:0575—86064866,E一分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10,注入液相色 ail:@dndpham.com.谱仪,记录色谱图,以外标法计算,即得. ? 1084?HeraldofMedicineVo1.28No.8August2009 2.4标准曲线及线性范围精密称取氢氯噻嗪对照品贮备液 适量,加50%甲醇制成每1mL约含氢氯噻嗪对照品1,2,4,6, 8,10g的溶液,按上述色谱条件分别进样,按选定的色谱条件 测定峰面积.计算回归方程为y=1.O119一0.0299,r= 1.OHD00.结果表明氢氯噻嗪在1.O,10.0g?m范围内呈 良好的线性关系. 2.5检测限与定量限取上述配制的对照品贮备液,用流动 相多级稀释后进样,信噪比(S/?)为3时,检测限为49.5ng;信 噪比(s/?)为l0时,定量限为99ng. 2.6阴性样品的测试照"2.2.2"项供试品溶液的制备方法 制备缺氢氯噻嗪的阴性样品供试品溶液,依法测定,在氢氯噻 嗪相应位置无相应峰出现. 2.7精密度与稳定性实验精密度实验:取样品(批号: 060l112)粉末0.25g,精密称定,依法测定,连续进样6次,每次 10,记录峰面积,测得样品中氢氯噻嗪峰面积值分别为6.725, 6.658,6.621,6.733,6.642,6.705,D为0.7%,表明仪器精密度 良好.稳定性实验:取样品(批号:06o1112)粉末O.25g,精密称 定,按上述方法制备供试液,在0,1,2,4,8,12,24h进样,测得样 品甲氢氯噻嗪峰面积值分别为6.666,6.581,6.745,6.666, 6.773,6.7l5,6.724,船D为1.0%.结果表明本品在24h内稳定. 2.8样品重现性实验同一批样品(批号:060j1l2),取本品 细粉6份,精密称定,按"2.2.2"项方法制备供试品溶液,分别 测定,结果平均含量为98.0%,D为O.7%,详见表1. 表1样品测定重现性实验结果 2.9加样回收率实验取本品(批号:060l112)的细粉0.098, 0.122,0.146g各3份,分别加入对照品为1.900,2.375, 2.850mg(为减少称量误差,制成甲醇溶液),照"2.2"项方法制 备,并依法分别测定,计算加样回收率,结果见表2.平均回收 率98.8%,兄SD:1.00%. 2.10样品含量测定按"2.2"项操作,依法测定3批珍菊降 压片中氢氯噻嗪的含量,结果见表3. 3讨论 笔者对样品中氢氯噻嗪还规定了含量均匀度测定,取本品 表2氢氯噻嗪加样回收实验结果 1片,置于l00mL量瓶中,加水2mL,振摇使溶散,照"2.2.2" 项下,自再加甲醇适量起,依法测定含量,结果IA+1.8OS1分别 为3.09,3.18,4.70,均<15,可见其含量均匀度好. 珍菊降压片中氢氯噻嗪测定方法也曾有报道,但比较结果 认为本方法简便,准确,稳定,而且均匀度测定结果也非常理 想一. 珍菊降压片生产的厂家较多,质量标准均不一致,我厂对 其中的成分野菊花中的绿原酸,芦丁,盐酸可乐定及氢氯噻嗪 均作了含量测定,建议制订统一的质量标准.针对化学对照品 图谱在to时出现较大的色谱峰,由于对照品溶液配制与供试品 溶液的配制所用试剂不同,特别是对照品溶液的配制中,甲醇 比例占较大造成J. 『DOI]10.3870/wdb.2009.08.O44 [参考文献] [1]中华人民共和国卫生部药品标准?中药成方制剂(第2O册) [s].232. [2]闫花丽,吉曙光,黄安军.HPLc测定珍菊降压片中氢氯噻嗪和芦 丁的含量[J].中成药,2Oo4,26(7):547—549. [3]张冬,李宏斌,刘海宏.反相高效液相色谱法测定氢氯噻嗪片含 量[J].中国药房,2o()4,l5(8):497—498. [4]朱卫翔,杨绍华.反相高效液相色谱法测定珍菊降压片中氢氯噻 嗪和芦丁的含量[J].中南药学,2oo5,3(5):279—281. [5]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[z].北京:化学工 业出版社,2oo5:附录28.