甘草有效成分的制备及甘草次酸类肝靶向抗癌前药的合成研究(可编辑)

甘草有效成分的制备及甘草次酸类肝靶向抗癌前药的合成研究(可编辑) 甘草有效成分的制备及甘草次酸类肝靶向抗癌前药的 合成研究 新疆医科大学 硕士学位论文 甘草有效成分的制备及甘草次酸类肝靶向抗癌前药的合成研究 姓名:马淑燕 申请学位级别:硕士 专业:生药学 指导教师:木合布力?阿布力孜 20080301英文缩略语表 英文缩写 英文全名 中文译名 甘草酸 甘草次酸 甘草次酸甲酯 磷酰氮芥二氯 熔点薄层层析色谱红外光谱 核磁共振光谱 学位论文独创性说明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及 取得的成果。据 我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人 已经发表或撰写过 的研究成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确的说 明并表示谢意。 日 研究生签名: 时间: 年 月 马艴 学位论文版权授权 本人完全了解新疆医科大学有关保留,使用学位论文的规定,学校有权保留学 位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文 用于赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查询。有权将学位论文的内 容编入有关数据进行检索,有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论 文在解密后使用本规定。 时间: 年 月 研究生签名:弓叔丝 年 月 日 导师签名: 时间: 舶都少摘要 甘草有效成分的制备及甘草次酸类肝靶 向抗癌前药的合成研究 摘要 目的:研究考察新疆甘草三萜类活性成分甘草次酸和黄酮类成分光甘草定的 制备工艺;并利用甘草次酸的肝组织靶向特征,以甘草次酸为起点,半合成制备其 衍生物作为运载药物的靶向载体,与环磷酰胺的强效抗癌基团磷酰氮芥二氯偶连制 成具有抗癌潜能的前药化合物并进行结构鉴定。方法:从新疆胀果甘草中提取纯化 甘草酸,经水解得到一甘草次酸,并通过还原、酯化等化学修饰得到六个半合 成衍生物;将.甘草次酸进行构象转化反应获得其光学异构体.甘草次酸; 根据反应性能特点和稳定性,选择其中的两个衍生物一【.和.甘草次酸甲酯 作为靶向载体,再与制备所得的抗癌基团磷酰氮芥二氯以酯键偶连得到两个肝靶向 前药新化合物。此外,用柱层析法和制备薄层法从新疆光果甘草中分离得到光甘草 定。利用常规方法对以上化合物进行结构鉴定和理化性质的研究。结果:合成得 到具有肝靶向潜能的六个载体化合物、两个肝靶向性抗癌前药【.甘甲磷氮芥和 .甘甲磷氮芥和一个黄酮类单体光甘草定,并测得有关理化性质及光谱特征数 据。结论:所制备的靶向载体和抗癌前药复合物为深入研究肝靶向创新药物奠定 基础,其活性有待药理实验来验证。本研究将对新型肝靶向抗癌药物的基础研究 及新疆甘草资源的深入不发利用具有重要参考价值。 关键词:甘草次酸类; 光甘草定; 化学载体; 肝靶向抗癌前药;合成制备新疆医科大学医掌硕士学位论文 ‘ ?? 娃: : : ; , ,???.: ? ; .,一; ? , ; ? ,? , 一 . ? .:,一 ? ?? ?: ?? . ?: .??一’?? . ? ; ;: ; ?. . ????新疆医科大学医掌硕士学位论文 刖 置 目前,癌症是引起人类死亡的重大疑难病,其危害程度仅次子心脑血管疾病, 而新疆也是癌症高发地之一。在临床上所使用的抗癌药物种类较多,虽然活性强 但由于很严重的全身性毒副作用而使患者难以忍受,药物疗效不佳。如氮芥类烷 化剂虽然对肿瘤有很好的作用,但是其毒副作用大。肝脏肿瘤是常见的恶性肿瘤 之一,它病程短,死亡率高,对人类健康威胁极大。目前,肝脏肿瘤的药物治疗 仍不理想,其主要原因之一是药物在肝脏中分布较少,毒副作用大,即药物的肝 靶向性差,如果将某一强效抗癌活性药物与运载药物的特殊载体相联而制成前药, 使该药在特定的肝脏病灶释放活性药物,则可以最大程度的降低 抗癌药物的全身 性毒副作用,提高病人的耐受能力,从而明显提高抗癌疗效。因此,选择一个理 想的运载药物的载体是非常重要的。 肝靶向药物是以肝细胞为靶点的一类药物,它们与特殊的靶向载体结合而制 成,是现代药物研究的热点之一,它将药物与特异的肝靶向载体偶联,使药物被 定向输送到肝脏,以达到增加药物在病灶部位的局部浓度、改善药代动力学参数、 减少全身性毒副作用的目的,对肝脏疾病的治疗有积极的推动作用【。目前国内外 正在研究并取得一定进展的肝靶向抗肿瘤药物载体主要有:大分子载体系统、微 粒载体系统、磁性药物制剂以及双重靶向给药系统等】,这些载体系统在提高抗肿 瘤药物活性和降低毒性等方面取得了一定的改善。然而仍然存在许多问题,如药 物仍缺乏足够的组织靶向性、治疗指数不够理想、药物的制备工艺复杂、载体来 源昂贵而使药物成本高等。这促使人们寻找更佳的肝靶向载体,以和制备新 型肝靶向抗癌药物。 在肝靶向抗肿瘤药物的研究中,选择与靶器官具有特殊亲和力的靶向载体是 非常关键的。我们课题组在天然小分子化学载体的研究过程中发现,甘草有效成 分甘草次酸具有较好的肝靶向潜能。研究表明,甘草次酸具有良好的保肝解毒及 一定的抗癌作用,并能促进癌细胞凋亡【~,同时它还具有较强的肝分佰特征和肝 细胞靶向性【『。同本学者发现肝细胞膜组分中含有丰富的甘草次酸结合位点【】,国 内学者也发现肝细胞膜上具有甘草次酸特异性结合受体。因此,甘草次酸不始 作为肝靶向载体应用【叫。 本研究以我区资源丰富的甘草为依托,利用其有效成分甘草次酸类的肝组织 靶向特征,将它及其衍生物作为运载药物的肝靶向性特殊载体,与强效抗癌药物 环磷酰胺【】的抗癌活性结构片段一磷酰氮芥二氯【叫召联接,制成具有抗癌潜能 的肝靶向前药需要在靶组织内代谢活化的药物自订体,期望前药进入体内之后, 在药物载体的作用下被运送到肝脏,而被肝细胞选择性地摄取,并在肝细胞内通 ?.??内容与方法?第一部分 过酶解释放出活性药物而发挥抗癌疗效,从而明显降低一般抗癌药物的全身性毒 副反应如骨髓抑制、消化道上皮细胞和毛发细胞的严重毒性等。设计原理形 象图如下:’ 【】 【 】 ? 器争囚 囚 ’。一 本研究在肝靶向性抗癌候选药物研制、新疆甘草资源的高水平开发利用以及 促进药物化学学科发展等方面都将具有重要意义。 内容与方法 第一部分甘草中有效成分的制备 ,胀果 甘草是豆科多年生草本植物乌拉尔甘草 .的根和根茎。性 甘草 .光果甘草 甘味平,具有补中益气,清热解毒,祛痰止咳,缓急止痛,调和诸药之功,为中 药中的“国老”,几千年来应用广泛。甘草的有效成分主要包括三萜类、黄酮类、多 糖类和其他等四类。 甘草次酸属于三萜类化合物见图一,是甘草中逝垒啦主. 墨盛佥查?,是甘草酸水解后脱去两分子葡萄糖醛酸的产物,具有广泛的药理作 用【。研究显示,甘草酸及绝大部分甘草次酸衍生物在体内先经胃酸水解为, 然后经由小肠吸收入血液,因此最终发挥药效的是.甘草次酸?。现在良 甘草次酸已广泛作为合成衍生物的起始原料,所以寻找一种提取分离纯化 ? 的方法具有很重要的意义。国内对.甘草次酸的制各方法研究报道较多,但各 类方法各有一些优缺点,如收率、产品纯度、制备成本和环保等方面,本研究用 水煎法从新疆胀果甘草粗粉中先提取甘草酸,后用大孔树脂法进行纯化,再用酸 催化水解和溶剂萃耿等方法得到纯度较高的一甘草次酸,具有一 定的工业实用 价值。 此外,在甘草的综合不发利用中,对黄酮类成分的研究也具有重要意义。黄 酮成分主要包括甘草素、异甘草酸、甘草苷、新异甘草苷、异甘草素、光甘草定 等,其中光甘草定,图.是光果甘草中的主要异黄酮类成分之一。 光甘草定主要存在于光果甘草中,约占光果甘草黄酮类成分中的%,而且光果 甘草主要分布在我国新疆地区。目前,国内对光甘草定的研究几乎是个空白,在 一一新疆医科大学医学硕士学位论文 国外研究中其显示了较强的抗氧化、抗动脉粥样硬化和一定的降血脂、降血压等 作用‘~矧,而且在防治心血管疾病的方面显示出良好的研究自仃景。因此,本研究 将对光甘草定的制备工艺、理化性质和结构鉴定进行详细描述,从而对新疆光果 甘草资源的综合开发利用提供了依据。 光甘草定 一甘草次酸 图?甘草中活性成分一甘草次酸和光甘草定的化学结构式 .实验仪器 .实验材料与试剂 .实验材料 , .新疆天山 胀果甘草,光果甘草根 制药有限公司提供,新疆医科大学药学院天然药物化学/生药教 研室鉴定,甘草 酸标准品 标准品‰ ,,甘草次酸 ,光甘草定标准品 ,板 , , 定性鉴别用, ,,一型大孔树脂天津南不大学 目天津市化学试剂三厂 化工厂,硅胶目青岛海洋化工集团, ????内容与方法?第一部分 一 .实验试剂 甲醇 乙醇 三氯甲烷 二氯甲烷正丁醇冰醋酸浓氨水硫酸丙酮苯 环己烷等均为纯 .内容与方法 .甘草次酸的制备 ..甘草酸的提取分离鉴定 称取新疆优质胀果甘草,粉碎成粗粉,加倍量水煎煮次倍、 . ,倍、,合并两次水提液, 过滤, 浓缩至 ,冷却,边搅拌边 滴加浓至不再析出沉淀为止酸沉.,离心取沉淀物,水洗后。 干燥, 粉碎得甘草酸粗品, 用大孔树脂柱纯化,控制流速在/,依 次用 蒸馏水、%乙醇沈脱,收集%乙醇沈脱液,洗脱液浓缩,干燥得淡黄 色粉术, 用冰醋酸重结晶得甘草酸精品。具体提取分离流程如下图.: 新疆甘草根 优质胀果甘草粉末 煎煮次 ,倍 残渣弃去 水提液 过滤,浓缩 ? 甘草提取液 浓调沉淀 ? 离心一过滤?干燥 甘草酸粗品 大孔树脂柱 ’依次用蒸馏水,%乙醇洗脱 %乙醇洗脱液 浓缩,脱色 上冰醋酸重结晶 甘草酸纯品 图甘草酸的提取流程图 一,一新疆医科大掌医学硕士掌位论文 理化鉴定:无色结晶状粉术,不溶于水,溶于乙醇,易溶于氯 仿。:.~ .。和文献值】一致。 薄层层析鉴定: 载体:硅胶, 展开剂:正丁醇:水:冰醋酸::, 紫外灯下检测,样品与甘草酸对照品斑点 的一致.,如右图.所示: 图甘草酸的薄层层析图 ..甘草次酸的制备 ...制备原理 /弋 。 镌 ? /缔鲤 甘草酸 甘草次酸 ...制备方法 ....甘草酸三铵盐的制备 取甘草酸粗品,加入倍量的%乙醇加热回流,抽滤,残渣再用 %乙醇回流提取,合并滤液,加活性炭加热回流,保温,抽滤, 收率 滤液用浓氨水调.,搅拌析出土黄色沉淀甘草酸三钱盐.。 .% ....甘草酸单铵盐的制备 取甘草酸三铵盐用冰醋酸热溶,加活性碳保温,趁热抽 ?一内容与方法?第一部分 滤得棕色液体,放入冷水浴过夜,析出淡黄色沉淀,抽滤得甘草酸 单铵盐.。 收率.% ....甘草次酸的制备与纯化 取甘草酸单铵盐加%硫酸常压下加热回流,抽滤,水沈干燥 得甘草次酸粗品.。粗品用热氯仿溶解,趁热过滤,氯仿溶解液冷 却后 加入/的%溶液,室温下搅拌,可见淡黄色沉淀析出并漂浮在上层, 抽 滤,固体物用倍量的热水溶解,抽滤,滤液用浓盐酸调,搅拌后产 生大 量白色沉淀,用水洗涤,干燥,再用%乙醇反复重结晶得甘草次酸 精品。 收 率%。具体流程如图所示: %乙醇回流提取次 浓氨水调 甘草酸粗品????甘草酸乙醇渖??????甘草酸三铵盐 加活性炭,抽滤 搅拌析晶,过滤 冰醋酸热 %硫酸回流 ?????? 甘草酸单铵盐???? 淡黄色甘草次酸粗品 放冷析晶,过滤 水洗,抽滤 氯仿热溶,过滤 热水溶解,盐酸调 白色甘草次酸精品 ??????淡黄色沉淀????? 水洗,干燥,%乙醇重结 %搅拌析晶,过 图甘草次酸的制各流程图 ...结构鉴定 理化性质鉴定:白色粉术状晶体,难溶于水,溶于乙醇和乙醚,易 溶于氯仿, 。.,。 :.~.?和文献值【】一致, ?母一新疆医科大学医学硕士掌位论文 薄层层析鉴定; 载体:硅胶 展开剂::: 紫外灯下检测,样品与甘草次酸对照品的 一致.如右图.所示: 图甘草次酸薄层层析图 光谱鉴定:光谱中在一出现一强的吸收峰,提示结构中有.存在, 。 处出现的另一强吸收峰表示结构中还存在羰基,而且在~ 和~。处出现了齐墩果烷型五环三萜骨架的区和区。此外,在 ?中 ../也指证分子中含有一。综合上述分析,结合文献报道 【,该结构的理化性质和光谱数据与.甘草次酸一致,故鉴定其 为;.甘草次 酸.一 又名:,,一一一 一 一一一 取?.~:.,.,., 一 ., 、。一尸.区,,区 ..:.,,.,...,,一, .,,.,.,,., .,,.,., , .,.., , , .,.,.,.,一,.,., . ., ...,, .,.,. ,, ,., 一,., .,, .,. , .,..,,.。 .光甘草定的制备 ..光甘草定的提取分离. 称取光果甘草研碎,分别用丙酮提取次,每次,合并提取液, 减压回收溶剂得黄褐色浸膏.总提取物.提取物用柱层析分离,采 用 浓度梯度法进行沈脱, 沈脱液浓度依次为:、/:.、 /:、/:、/:,因光甘 草定的极性中等而留在极性中等的组分中组分。将组分再用硅胶 层析柱 进行分离,洗脱液浓度依次为、/:.、/: 、/:、/:,合并得到个组分:组分, 和,将组分用制备型薄层板进行进一步分离展不剂为 一卜一内容与方法?第一部分 /:,收集值为.的色带光甘草定的值为., 用丙酮提取,减压蒸干得粗品,再用苯/环己烷混合溶剂重结晶得 光甘草定纯品。 提取分离流程如图.所示: 甘草. 丙酮提取,过滤,减压浓缩 丙酮提取物总提取 广??????删层析柱 ‘ 丫 , 组分极性小 组分极性 柱 组分 制各型板分离 苯/环己烷重结品 ? 光甘草定 图光甘草定的提取分离流程图 ..光甘草定的鉴定 理化性质鉴定:微黄色粉术,..?和文献值‘】一致。与 反应显棕色。 薄层层析鉴定: 载体:硅胶 展开剂: :: 紫外灯下检测,样品与光甘草定对照品的 一致.,如右图.所示: 图.光甘草定的薄层层析图 光谱鉴定:综合分析,结合文献报道‘,该结构的理化性质和光谱 数据与光新疆医科大掌医学硕士学位论文 甘草定一致,故鉴定其为光甘草定。 ~: , , , , 一。 . , , , ., , ‘?.: ,, .,,. , ’..,,. , 。, . . . . ,, ,”. ,, . , ’., ,, ., . , ’一, . ,, . , ., . ,, . , ”.,. ,, . , ., . , .,.,,., . ,.,.,, ., .,, ., . ,., . , , ., ., . ”. , , ”.。 一?小结?第一部分 小 结 本实验重点对甘草酸的提取、甘草次酸的酸水解制备和光甘草定的提取分离 纯化方法进行了研究,并对目标化合物进行了理化性质研究和结构鉴定。 实验证明,采用大孔吸附树脂法分离纯化甘草酸,使产物的收率和纯度显著 提高,还具有污染少和节能等优点;制备.甘草次酸时,将甘草酸粗品先制成 铵盐来分离大量醇溶性杂质,再用硫酸催化水解并用溶剂法进行分离纯化得到 一甘草次酸的方法与传统方法比较效果要好,目标化合物的产率和质量都较高。 用柱层析法和制备薄层层析法对快速制备光甘草定少量纯品中具有重要意 义,所得目标产物的纯度和产率都符合要求。 一?新疆医科大学医学硕士掌位论文 第二部分甘草次酸的结构修饰一肝靶向载体的制备 一直以来,对甘草有效成分甘草次酸及其衍生物的研究,特别是对结构修饰 和构效关系研究,国内外学者都给予了广泛的关注,渴望寻找到疗效高,副 作用小的衍生物。 甘草次酸的结构修饰原则是在保留或增强原有药理活性的前提下,降低或消 除其假醛固酮副作用。结构修饰和生物活性结果显示,分子中的、、、 等四个部位的修饰可显著降低其副作用【~。 本研究主要对 一甘草次酸分子中的?两个部位进行化学修饰,将 羰基还原和/或将还原成.或变成酯键或引入其脂溶性基团等制 备甘草次酸类四个衍生物,从而降低母体的假醛固酮副作用、提高脂溶性和细胞 穿透力,作为肝靶向载体供药理筛选。 甘草次酸存在两个光学异构体,研究证明.甘草次酸的肝靶向性更强,但 在体内趋集性很小【。经甘草酸水解而得的苷元甘草次酸中,%以上是 .甘草 次酸,而其一异构体的含量非常微量。本研究还对.甘草次酸进行构象转化研 究,使其转化成 【.异构体,进而以 【一甘草次酸为起点合成一个衍生物,将它 作为【.甘草次酸类肝靶向载体。 .实验仪器 仪器名称 生产厂家 ,超导核磁共振谱仪 美国公司红外光谱仪 . . 型电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司 ? 型循环水式多用真空泵 郑州长城科共贸有限公司 .璎表显恒温电热套 郑州城科共贸有限公司 电子天平 紫外灯观测斑点 株式会社东京本乡 .增力电动搅拌器 江苏省金坛市医疗仪器厂 .实验材料与试剂 甘草次酸新疆天山制药公司 盐酸二氯甲烷 氯仿乙醇 石油醚乙酸乙酯丙酮『己 甲醇 烷二甘醇异丙醇四氢呋喃 盐酸硫酸氢氧化铡四氢铝锂凰第二部 分 硫酸钠碳酸氢钠钯碳二甲氨基吡啶三苯氯甲烷三乙胺均为分析 纯 .内容与方法 . 一甘草次酸甲酯的制备 ..合成原理 / 一?郎 妙? ..实验方法 取一甘草次酸.置于三口烧瓶内,加%.溶液, ~?搅拌~,用法检测反应进程展开剂:二氯甲烷/甲醇:。 反应结束后蒸除多余的甲醇,用蒸馏水洗至中性沈除,抽滤干燥 得. 甘草次酸甲酯粗品,用%重结晶两次得精品,产率为%。 ..结构鉴定 理化性质鉴定:白色针状结晶,溶于甲醇和热氯仿,微溶于无水乙 醇和乙酸 乙酯,不溶于水,:.~?和文献值一致【创。 薄层层析鉴定:载体:硅胶,紫外灯下检测, 分别用三种展开剂薄层分析,均显示单一斑 点,展不剂:::仁., 展不剂:石油醚:乙酸乙酯:仁., 展不剂:正己烷:丙酮:.如右 图.所示: 图 争甘草次酸甲酯的薄层 层析图 一一新疆医科大掌医学硕士学位论文 磁?数斑蠢 样品与一甘草次酸共薄层,在一甘草 次酸的位置无对应色点,样品色点上移, 甘草次酸经甲酯化后,极性降低,因此在相同的 薄层条件下,其值增大。如右图.所示: 展不剂::: 搿,壤扫、 图 甘草次酸甲酯与甘草次酸比较的薄层层析图 光谱鉴定:与一甘草次酸的谱图比较而言,的伸缩振动向高波数 方 向移动,出现在了 ~。此外,在谱图中出现.的甲氧基峰, 而.的羧基峰消失。综合上述分析,结合文献报道【】,该结构的 理化性质和光 谱数据与一甘草次酸甲酯一致,故鉴定其为.甘草次酸甲酯。 ? ~:,:,.,, ,;、 、一一’.,区,,区. ’?.:..,,,一,一,. ,,.,.?.,, .,.,,一., ,一,. ,, ., ... ,, .,.,, 一,一,.,一,.,一, . ,, . ,一, .,,. ,.,.?.,,.,.,., , .,. ,一, .,, ... , , .。 . 伐一甘草次酸的制备 ..合成原理 ” ? .一 .一. 一一第二部分 ..实验方法 取 放入耐压瓶中,加热, .甘草次酸. ,加入. 反应液冷却后减压浓缩至干,用热丙酮溶解,趁热倾入的冰水中 搅拌 ,抽滤得白色物质,用丙酮.水重结晶得到和。甘草次酸甲酯的混 合物。 取.一和.甘草次酸甲酯混合物,加入一定量的氢氧化钠,蒸馏水, 二 甘醇和异丙醇加热至沸,搅拌反应,冷却,用%调,用乙酸乙 酯萃取,萃取液用无水干燥,减压浓缩至干得粗品,粗品用乙醇. 丙酮重结 晶三次得【.甘草次酸精品,产率%。 ..结构鉴定 理化性质鉴定:白色粉术,溶于和热氯仿,微溶于无水乙醇和甲 醇, ., 不溶于水,:.~.?和文献值【】一致,仅】:. 薄层层析鉴定:载体:硅胶,紫外灯下检测, 分别用三种展开剂薄层分析,均显示单 一斑点,展开剂:石油醚:乙酸乙酯: 仁.,展开剂:正己烷:丙酮: .展.不剂: :: 触.,如右图.: 同一一一一日 图 .甘草次酸的薄层层析图 样品与.甘草次酸共薄层,值差别不 大,样品色点较.甘草次酸的位置稍下移。 如右图所示: .甘草次酸仁. 【.甘草次酸铷. 展不剂: :: 图 一甘草次酸和肛一甘草次酸比较的薄层层析图 光谱鉴定:光谱中在。出现一强的吸收峰,提示结构中有.存在, 处出现的另一强吸收峰表示结构中还存在羰基,而且在~ ?一新疆医科大掌医掌硕士掌位论文 和处出现了齐墩果烷型五环三萜骨架的区和区。此外,在 中 ..也指证分子中含有.。综合上述分析,结合文献报道 】,该结构的理化性质和光谱数据与【一甘草次酸一致,故鉴定其 为【一甘草 。 次酸 仅:,,,一, ,.,矗\ 、一.广“,妒,,。.。. . .. ? : , , ,, ., 一, . , , .,....,., ...,, ., .,, ., .,, 一, 一,.,一,.,.,。,.,. ,, .,. , , ., 一,. ,, .,. .,...,, .,.,, . ,.,.,. ,, 一,.】 ,, 一. . 伍一甘草次酸甲酯的制备 ..合成原理 ? ? .. 实验方法 取【.甘草次酸.克置于三口烧瓶内,加%.溶液, ?搅拌~,用法检测反应进程展开剂:二氯甲烷/甲醇:。 . 反应结束后蒸除多余的甲醇,用蒸馏水沈至中性洗除,抽滤干燥 得 甘草次酸甲酯粗品,用%重结晶得精品,产率为%。 .. 结构鉴定 理化性质鉴定:白色针状结晶,溶于甲醇和热氯仿,微溶于无水乙 醇和乙酸 乙酯,不溶于水,:..和文献值一致【。 薄层层析鉴定:载体:硅胶,紫外灯下检测, 一? ,一,.,,第二部分 分别用三种展不剂薄层分析,均显示单一 斑点,展开剂:石油醚:乙酸乙酯: .,展开剂:正己烷:丙酮: .,展开剂: :: .,如右图.?: 同目 同目 图. 草次酸甲酯的薄层层析图 样品与.甘草次酸共薄层,在.甘草 次酸的位置无对应色点,样品色点上移,. 甘草次酸经甲酯化后,极性降低,因此在相同的 薄层条件下,其值增大。如右图所示: 展开剂: :: 图 .甘草次酸甲酯与甘草次酸比较的薄层层析图 样品与.甘草次酸甲酯共薄层,值差 别不大,样品色点较.甘草次酸甲酯的位置 稍下移。如右图?所示: .甘草次酸甲酯. 【.甘草次酸甲酯. 展不剂: :: 图 .甘草次酸甲酯与甘草次酸甲酯比较的薄层层析图 光谱鉴定:与 【.甘草次酸的谱图比较而言,的伸缩振动向高波数方 向移动,出现在~。此外,在.谱图中出现.的甲氧基峰, ,该结构的理化性质 ..的羧基峰消失。综合上述分析,结合文献报道【 和光谱数据与一甘草次酸甲酯一致,故鉴定其为一甘草次酸甲酯 ?。 ~:.,.,.,, 一.一新疆医科大学医掌硕士掌位论文 ?昌詈置?皇詈皇詈皇詈詈暑詈詈暑蕾 詈詈詈??皇?皇昌皇皇皇暑昔暑詈暑詈毫葛暑暑詈暑暑皇詈詈詈皇昌詈暑詈詈詈詈鲁詈詈詈喜詈鲁暑詈詈署詈鲁皇皇邑喜詈詈暑詈皇毒鲁詈皇暑暑鲁鲁詈詈葛皇搴 ’..厂:”.区,,区. ,,.,.,一,. ’?:... ,,.,...,, .,.,, .., , 一, . , , ., ...,,..,,., .,.,.,.,.,., . ,, . , ., ., ...,, .,., . ,, .,. , 一, ?.. .. .,, ,, . .甘草萜醇的制备 ..合成原理 ? . / ?。 .甘草次酸 .甘草萜醇 ..实验方法 称取. 一甘草次酸放入三口瓶中,加入经过无水处理的,分 次加入. 认粉末,升温至?搅拌,用法检测反应终点: :硫酸显色,将反应液降至室温,加入 终止反应,再 用冰水稀释,静置后抽氯,用乙酸乙酯萃取,蒸干得粗品,再用乙 酸乙酯: 乙醇:重结晶得一甘草萜醇精品,收率%。 ..结构鉴定 理化性质鉴定:白色结晶性粉末,易溶于四氢呋喃,溶于热甲醇和 热氯仿, 微溶于无水乙醇和乙酸乙酯,不溶于水。:..。,与文献值【】一 致。 薄层层析鉴定:载体:硅胶,紫外灯下检测,显示为单一斑点,:隆. 。 ,: 一仔一第二部分 通过薄层层析图可以看出,样品与.甘 草次酸共薄层,在.甘草次酸的位置无对应 色点,样品色点下移,证明.甘草次酸经还 原后,极性变大,因此在相同的薄层条件下,其 值减小。如右图.所示: 展不剂:.: 图? ?甘草萜醇与.甘草次酸比较的薄层层析图 光谱鉴定:结合文献报道【,该结构的理化性质和光谱数据与甘草 萜醇一致,故鉴定其为甘草萜醇 一。 ‘:, 鼬, , :, , . . ,, 一,., , :. ,. ,, ., . , , ., . ,, .,, .,, ., .,, ., ., ., . ,., .,/一.,.,. , ,., . , ., .,,. , .. . .脱氧甘草萜醇的制备 ..合成原理 / ?甘草萜醇 一脱氧甘草萜醇 ..实验方法 称取. .甘草萜醇放入三口瓶中,用碳酸氢钠饱和的乙 醇溶解,并在密闭容器内通入氢气,室温进行钯碳催化氢化还原, 反应小时后 过滤,将反应液减压浓缩至干,用乙酸乙酯重结晶,真空干燥得一 脱氧甘草 萜醇精品,产率为%。 一?新疆医科大掌医掌硕士学位论文 ..结构鉴定 理化性质鉴定:白色结晶性粉术,溶于氯仿和丙酮,:~。与文献 值【】一致。 薄层层析鉴定: . 载体:硅胶 展不剂: 氯仿:丙酮: 紫外灯下检测,样品显示单一斑点 .,如右图?所示: 图 一脱氧甘草萜醇 的薄层层析图 光谱鉴定:结合文献报道 ,该结构的理化性质和光谱数据与 一 脱氧甘草萜 醇一致,故鉴定其为一脱氧甘草萜醇一?. ~: , ? , , . ?. .,,一,.,,一, : .,,.,.,,一,.,,.,., ,一,.,,.,. ,, , ., ., ,, . ,, , 一. . .三苯甲基.脱氧甘草萜醇的制备 .. 合成原理 偶斛 \ \》 ??】扣 自?毋 ..实验方法 取 一脱氧甘草萜醇.、三苯氯甲烷. 和二甲氨基吡 、三乙胺. 二氯甲烷溶解,?加温回流小时,冷却, 啶.放于三口瓶内,用. ??一,,??第二部分 加 水搅拌,用氯仿提取三次每次 ,无水硫酸钠干燥,减压浓缩 至干得橘黄色粉未。粗品用硅胶柱层析分离流动相为::: :.,收集.的馏分,减压浓缩至干得白色一三苯甲基~.脱氧甘 草萜醇粉末精品,收率%。 ..结构鉴定 理化性质鉴定:白色结晶性粉末,:~?。 薄层层析鉴定: 载体:硅胶 展不剂: 正己烷: 紫外灯下检测,样品显示单一斑点 .,如右图.所示: 图. .三苯甲基.脱氧甘草萜醇的薄层层析图 光谱鉴定: 综合上述分析,结合文献报道,该结构的理化性质和 光谱数据与 .三苯甲基一.脱氧甘草萜醇一致,故鉴定其为.三苯甲基一.脱氧 甘草萜醇 一? 。 ~:,。,?, 《, , . 一 ,, .,. ,, .:. ., .,, 一, ,.,,.,., , . . , , 。,. , , ., ,/?., ., .,,. , ., ., .,,. , 】.. 一?新疆医科大学医学硕士掌位论文 小 结 本实验以.甘草次酸为起点进行两方面的研究:一是对.甘草次酸进行 还原、酯化等化学修饰制备得到四个半合成载体衍生物;二是对.甘草次酸进 行构象转化反应得到其光学异构体洳甘草次酸及其甲酯化衍生物。以上所合成 的六个甘草次酸的衍生物,将作为肝靶向前药的载体使用。 本研究对各衍生物的合成工艺、理化性质和光谱特征进行较系统的研究和详 细描述,对于反应条件进行一定的优化,对各反应物的配料比、反应条件控制、 反应温度和反应时间等因素进行反复摸索和考察,最后得到较高产率的各类纯品, 为下一步的肝靶向前药的制备和生物活性测定奠定基础。 本研究所完成的.甘草次酸的构象转化制备,国内无文献报道,因此,首 次合成了一甘草次酸,而且反应转化率高达%注明:此部分因正在申请专 利,反应条件未作详细描述。 一?第三部分 第三部分 甘草次酸类肝靶向抗癌前药的设计和合成制备 靶向药物是指与体内特定的器官或组织细胞具有较强结合能力的药物。利用 靶向药物的目的就是将药物选择性分布于体内特定的病变部位,以提高药物在病 变部位的浓度,同时降低药物因在体内广泛分稚而对正常组织产生毒副作用。目 前国内外对靶向抗癌药物作了大量的研究,并取得了一定的成就。 目前肿瘤的靶向治疗包括三个方面,如受体介导的靶向治疗、载体介导的靶 向治疗和免疫靶向治疗等【。肝靶向抗肿瘤药物的研究中,与靶器官具有特殊亲 和力的靶向载体的选择是个关键。国内外正在研究的肝靶向抗癌药物有毫微粒及 微球制剂、免疫导向药物、无唾液酸糖蛋白受体介导的肝靶向药物、信号靶向药 物、小分子化学载体介导的肝靶向药物等【卜。其中小分子载体介导的肝靶向药 物的研究目前成为靶向抗癌药物研究中的另一热点。 小分子化学载体介导的肝靶向药物属于载体介导的靶向药物。这类药物载体 中,胆酸是目前惟一的口服肝靶向药物载体。研究表明,抗肿瘤药物与胆酸偶合 后,可明显增加药物在肝脏的浓度,其他组织分布较少,这就可降低原药的毒副 作用,同时,原药的药理活性也不同程度地保留了下来,有些还能克服原药的耐 药性卯。 本研究所选用的抗癌基团??磷酰氮芥二氯是临床上常规使用的强效抗癌药 物环磷酰胺的活性代谢物。研究表明环磷酰胺在体内受酶活化而发挥作用,非环 状的磷酰胺脂的治疗指数高于环磷酰胺【,本实验中它作为活性抗癌基团,与甘 草次酸类靶向载体偶连,制成具有肝靶向潜力的前药复合物即本身无活性而在 靶组织内代谢活化的药物前体。环磷酰胺也是个前药,但不是肝靶向药物,它 在体内转化成活性磷酰氮芥二氯的同时,还产生对膀胱剧毒的丙烯醛。 本研究选择了制备所得到的甘草次酸衍生物中反应性能和化学稳定性较高、 合成工艺相对成熟的两个衍生物??和一甘草次酸甲酯作为肝靶 向前药的 载体,将它与磷酰氮芥二氯偶联合成了具有肝靶向潜能的和.甘草次酸甲 酯.磷酰氮芥前药复合物简称和一甘甲磷氮芥,同时对反应条件进行考 察,化合物的光谱特征和理化性质进行研究。所制各的化合物将对肝靶向前药的 药理筛选和构效关系研究奠定基础。 ??新疆医科大学.学硕士掌位论文 .实验材料与试剂 二乙醇胺氯化亚砜三氯氧磷吡啶氯仿石油醚丙酮正己烷乙酸乙酯 甲醇二氯甲烷均为分析纯 。 。 ???????’???。’’ /邺哟:竺 .一坠一. \ . 二乙醇胺 双一一氯乙基氨基磷酰二氯 ..实验方法 ...双..氯乙基胺盐酸盐的制备 取二乙醇胺 溶于倍体积的氯仿约中,缓慢滴加体积氯化 亚砜约,?水浴搅拌反应, 此反应为放热反应,并在反应过程 中产生有毒性气体和等,因此在?水浴旱进行,以避免大量的气体产 生,反应液减压蒸馏至干得黄白色固体约.,用丙酮/无水乙醇混合溶剂 重结晶,趁热抽滤放冷得双..氯乙基胺盐酸盐,再用少量无水丙酮沈.次 .?文献值为~ 】。 得精品,产率为%,: 一?第三部分 ...双..氯乙基氨基磷酰二氯 。 取氮芥盐酸盐置于三口烧瓶内,加入新蒸的三氯氧磷,在 下搅拌~得棕色液体,减压蒸除过量的溶剂后得黑色粘稠物,用丙酮/石油 醚混合溶剂重结晶,趁热抽滤后冷藏得磷酰氮芥二氯精品,产率%。 ..结构鉴定 理化性质鉴定:无色片状结晶,有腐蚀性,对湿气敏感,加热时激烈分解; 是环磷酰胺的中间体。溶于石油醚和丙酮,微溶或几乎不溶乙酸 乙酯,:.~ .和文献值一致【】。 光谱鉴定:综合上述分析,该结构的理化性质和光谱数据与磷酰 氮芥二氯一 致,故鉴定其为磷酰氮芥二氯。 :., ., ?., . 。 .:...,,. ,. .,, . , ?。 .肝靶向性抗癌前药的制备 .. 一甘甲磷氮芥的制备 ...合成原理 , 。 ...实验方法 取一甘草次酸甲酯.和磷酰氮芥.置于三口烧瓶内,加氯仿溶 解,再加入无水吡啶无水硫酸钠干燥,?搅拌回流~,用检 测反应进程,反应结束后将反应液减压蒸干得黄色粘状物,用石 油醚沸程 ??.丙酮重结晶,趁热抽滤放冷得.甘甲磷氮芥粉末。 结构鉴定 理化性质鉴定:白色粉术,溶于乙酸乙酯,石油醚和甲醇,:.~.。 薄层层析鉴定:载体:硅胶,紫外灯下检测。 ?.一新疆医科大掌医学硕士学位论文量皇詈昌?置皇暑詈昌皇? 皇阜昌暑詈詈舅?量鲁詈暑昌詈詈盲墨暑葛昔暑詈詈鲁詈皇詈詈詈 暑昌暑曹葛詈鼍皇詈皇暑皇鲁詈暑暑皇詈鼍皇鲁暑詈盘 分别用三种展不剂薄层分析,均显示单一斑 点,展不剂:::., 展开剂:石油醚:乙酸乙酯:邵., 展开剂;正己烷:丙酮.,如 右图? 所示: 图 坩甲磷氮芥的薄层层析图 样品与.甘草次酸甲酯共薄层,在.甘草次酸甲 酯的位置无对应色点,样品色点上移,因为甘甲磷氮芥是 对 .甘草次酸甲酯的极性.进行磷酰酯化以后所 获得的磷酰酯类产物,因此,其极性要比一甘草次酸甲 酯低,在相同的薄层条件下,其值增大。如右图. ‘ 所示展开剂:石油醚:乙酸乙酯:: 图. .甘甲磷氮芥与.甘草次酸甲酯比较的薄层层析图 /一 的吸收峰 谱图鉴定:取谱图中除了存在.甘草次酸甲酯的 和 一的酯基吸收峰两个特征峰外,还出现了 处的..吸收峰, 一 处的. 一处的吸收峰, 处的..吸收峰和 吸收峰。此外,在谱图中,除了出现.甘草次酸甲酯的.的 甲氧基信号峰外,还出现了皓.和.的一和一信号峰。 综合上述分析,结台文献报道,该结构的理化性质和光谱数据与. 甘甲磷氮 芥一致,故鉴定其为.甘甲磷氮芥.又名:,.二氯乙基.一.甘草 亭酸甲酯基磷酰胺单脂】。 ,、 , :.,。,‘一’, ., .., 一 区区, ?:.,,,....,,, ,. .,, .,...,, 一,., , 一 , . ,, .,...,, .,.,., 一,.,.,,, .,.,.,.,一,...,, 一?第三部分 .,, . ,.,.,, ,.,. 一。 ,,.,.,,..,.,, .. .甘甲磷氮芥的制备 ...合成原理 ,...实验方法 取.甘草次酸甲酯.和磷酰氮芥.置于三口烧瓶内,加氯仿溶 解,再加无水吡啶无水硫酸钠干燥,?搅拌回流,用检测反应进 程,反应结束后将反应液减压蒸干得黄色粘稠物,用石油醚沸程 ~?重 结晶,趁热抽滤放冷得【.甘甲磷氮芥粉末。 ...结构鉴定 理化性质鉴定:白色粉术,溶于乙酸乙酯,石油醚和甲醇,:.?.?。 薄层层析鉴定:载体:硅胶,紫外灯下检测, 分别用三种展开剂薄层分析,均显示单一斑 点,展开剂:石油醚:乙酸乙酯:仁., 展开剂: .,展不剂:正己 烷:丙酮:仁.如右图?所示: 图? 甘甲磷氮芥的薄层层析图 一?新疆医科大掌掌硕士掌位论文 样品与值.甘草次酸甲酯共薄层,在.甘 草次酸甲酯的位置无对应色点,样品色点上移, 因为甘甲磷氮芥是对甘草次酸甲酯的极性. 进行磷酰酯化以后所获得的磷酰酯类产物,因此, 其极性要比【.甘草次酸甲酯低,在相同的薄层 条件下,其值增大。如右图.所示展开 剂:石油醚:乙酸乙酯:: 图? 一甘甲磷氮芥与.甘草次酸甲醑比较的薄层层析图 样品与.甘甲磷氮芥共薄层,其值差别 不大,在.甘甲磷氮芥的位置无对应色点,样 品色点下移。如左图.所示: .甘甲磷氮芥. 一甘甲磷氮芥. 展开剂:石油醚:乙酸乙酯: 图 .甘甲磷氮芥与.甘甲磷氮芥比较的薄层层析图 ,‘一\ 光谱鉴定:谱图中除了存在【.甘草次酸甲酯的 ‘的。吸收峰 和 的酯基吸收峰两个特征峰外,还出现了 一处的一.吸收峰, 处的吸收峰, 处的..吸收峰和 。处的. 吸收峰。此外,在.谱图中,除了出现。.甘草次酸甲酯的砖.的 甲氧基信号峰外,还出现了碚。和碚.的.和一信号峰。 综合上述分析,该结构的理化性质和光谱数据与【一甘甲磷氮芥 一致,故鉴定其 为 【?甘甲磷氮芥。又名:,一二氯乙基?.【一甘草亭酸甲酯基磷 酰胺单脂。 .,:。 ~:., ‘,一川’, 区区,.,.?,一. . :.,,.,...,, 一,一,一,.,, 一, .,, . , . , , .,.?.,, .,.,.,.。一,., 一.一第三部分 .,, .,.,.?.,, .,.,.,., :. ×.,.,,. ,×一.,,.嫩, .., .。 .,, .,, ’ 小 结 本研究通过逻辑地设计和多部化学反应,制备出具有肝靶向潜力的甘草次酸 类前药复合物,并对它的合成工艺、理化性质和光谱特征进行较系统的研究和详 细描述。在磷酰酯化反应目标化合物甘甲磷氮芥的制备反应中,对各反应物 的配料比、无水条件控制、反应温度和反应时间等因素进行反复摸索和考察,最 后得到较高产率的纯品,为将来的深入研究和生物活性测定奠定基础。 讨 论 .甘草中主要有效成分之一为甘草酸,由于广泛的药理作用而倍受关注, 其提取分离方法较多【】,从总体上看,水提法、稀氨水提取法和 氨性醇提取法由 于成本低,提取工艺简单,因此较适合于甘草酸粗品的提取,本研究利用水提酸 沉法制备甘草酸粗品。甘草酸的精制纯化也有多种,有复溶解法、二次沉淀法、 大孔吸附树脂法等,本实验选用了使产品收率及纯度相对都较高的大孔树脂吸附 法【?,实验证明,一大孔吸附树脂分离甘草酸有吸附量大可达吲、 解吸率较高、易沈脱、分离效果好的优点,所得产品纯度比溶媒法要高,且不耗 毒性有机溶剂、污染少、节能、产品质量好,因此是纯化甘草酸的较理想方法。 .在制备甘草次酸的过程中,将甘草酸粗品先制成铵盐来分离大量醇溶性杂 质,再用硫酸催化水解并用溶剂法进行分离纯化得到 一甘草次酸的方法与传统 方法比较效果要好,目标化合物的产率和质量都较高。此外,在制备甘草酸三铵 盐时要严格控制值,用浓氨水调.左右,过于偏大与偏小都将影响三铵 盐的产率及质量;在甘草酸三铵盐转化成甘草酸单铵盐时,要注 意冰醋酸热溶时 间不宜过长,温度不宜过高,否则产物部分水解使成分复杂化。 .对甘草次酸的结构修饰研究较多【 ,主要有.位羰基的修饰,.位羧 基的修饰,?.位羰基和.位羧基的共同化学修饰等,这都是为了降低甘草次酸 的副作用从而增强疗效。本课题通过合理的结构设计,对位羰基和一位羧基 进行化学修饰合成了六个甘草次酸类肝靶向载体衍生物。最后选择了合成工艺相 对成熟和生物活性较高的.和.甘草次酸甲酯作为肝靶向药物的载体使用, .位羧基的酯化修饰使其不仅提高脂溶性和细胞穿透能力,同时避免羧基上可能 一?新疆医科大掌医学硕士学位论文 发生的副反应。根据相似的合成思路,还可以对位羧基引入其他基团,如引入 各种胺或氨基酸成酰胺【,糖配基成糖酯等,以得到动力学性质较好的甘草次酸 类肝靶向载体衍生物’。 .本研究中,以四氢铝锂为还原试剂将甘草次酸的位羰基和位羧基 进行选择性还原修饰只还原羰基和羧基,而保留烯键成功获得了 甘草 萜醇。实验证明,以四氢铝锂为还原剂进行还原反应,在结构式复杂含多基团的 天然化合物??甘草次酸的选择性还原修饰中是个有效的方法。本实验中通过摸 索反应条件获得较高纯度的产品。 .甘草次酸的主要副作用是引起假醛固酮增多症。分子生物学和分子药理学 研究显示,甘草次酸产生此副作用的原因是因为它在体内能抑制氢化可的 ?? , 代谢酶一一羟基甾醇脱氢酶 的活性,从而导致体内氢化可的松的堆积,引起所谓的假醛固酮增多症【。 和’等研究发现,甘草次酸位羰基和位羧基的还原修饰可明显 降低或消除此副作用,并认为 .脱氧甘草萜醇类衍生物无此副作用,本研究合成 的一脱氧甘草萜醇和.三苯甲基一脱氧甘草萜醇即属于此类,为甘草次酸类 肝靶向抗癌前药提供了良好的载体。 .磷酰氮芥二氯是常规抗癌药物环磷酰胺的体内活性代谢产物, 是环磷酰胺 通过在肝脏代谢并在癌细胞内分解之后所产生的活性代谢产物,即环磷酰胺的代 谢活化形式【”。在本研究中,该基团作为肝靶向抗癌前药的抗癌功能基团使用。 由于环磷酰胺是个专利保护产品,其合成工艺非常保密,虽然清楚其合成原理但 其制备操作并没有具体描述。因此,本实验在磷酰氮芥二氯的制备方面作了大量 的探索性操作,才总结出以上的较成熟制备工艺,尤其对盐酸氮芥和磷酰氮芥二 氯的重结晶工艺成功摸索,使产品质量和纯度明显提高。 .?.和.甘甲磷氮芥是个新化合物,由载体甘草次酸甲酯和抗 癌功能基团磷酰氮芥二氯在无水条件下经磷酰酯化反应而制得。磷酰酯化反应主 要发生在.,该反应的副产物较少,但产率不是很高,需要继续摸索反应条 件,如反应溶剂的选择、反应温度和时间的单因素考察分析等,以便优化反应条 件,提高酯化反应的产率。 一?结论 己 .? 结论 ;口 甘草是新疆优势要用药材之一,其活性成分甘草酸及其苷元甘草次酸在医药、 食品、保健品和化妆品工业上较广应用。甘草酸和甘草次酸的化学结构修饰研究 主要是以保留或增强原有药理活性的前提下,,降低其假醛固酮副作用较长期、 较大剂量用药时可引起药原性高血压和水肿等为目的。这就限制了甘草三萜类 活性成分在临床上的广泛应用,也限制了地方甘草药材资源的深入不发研究。当 前的分子生物学研究证实,甘草引起的盐皮质激素样副作用是由于它能抑制氢化 可的松代谢酶??.羟基脱氢酶的活性。从此医药界对甘草酸类的化学结构修饰 和药用不发研究给予广泛重视,并从中开发一些创新药物。 甘草次酸一和?体本身具有保肝解毒和一定的抗癌药理活性,同时 具有较高的肝组织分布特征和肝细胞靶向性,使它不仅可作为药物载体,也可与 抗癌药物产生协同作用。这使甘草次酸在新型肝靶向药物研究中具有新的应用潜 力。关于甘草次酸的良好肝组织分布特征和肝细胞靶向性是具有充分实验研究依 据和理论前提的。 本研究首先以改善甘草次酸的药动学特征和降低假醛固酮副作用为目的,以 甘草次酸为起点,经化学结构修饰制备了六个甘草次酸类衍生物,并对合成设计 及其验证、天然大分子上多种官能基团的选择性化学修饰,制备方法选择和工艺 优化、结构鉴定和理化性质研究等方面进行考察,获得了甘草次酸类靶向载体化 合物的有关化学性数据。 由于甘草次酸的两个光学异构体中,.甘草次酸的肝靶向性更强比. 甘草次酸强一倍。因此,本研究同时对 .甘草次酸成功进行构象转化,制备 .甘草次酸和 【.甘草 得到其光学异构体 .甘草次酸及其甲酯,并发现合成 次酸甲酯的工艺方法切实可行且这两种化合物均为国内首次合成得到。 第二步,根据化合物的反应性能和稳定性特点,选择甘草次酸衍生物其中两 个??伐.和.甘草次酸甲酯作为载体,与制备所得的抗癌基团磷酰氮芥二氯 以酯键偶连得到两个肝靶向前药复合物,并进行鉴定。其中,【一甘甲磷氮芥也 是首次合成得到的新化合物,其活性有待于用药理实验进行验证。通过这种研究 思路,对甘草次酸可以尝试其他的化学修饰,再与磷酰氮芥二氯或.氟尿嘧啶等 抗癌活性药物联结,制备其他的肝靶向潜能抗癌前药。此研究中,需进一步探索 甘草次酸类衍生物与抗癌药物问的连接部位,寻求最佳的偶联方式来保持甘草次 酸的最佳分子识别能力,同时使得前药在血液中稳定,进入靶器官后能充分解离, 还要进一步研究抗癌药物从甘草次酸偶合物中解离释放机制、动力学速率及量效 关系。 一?新疆医科大学医掌硕士掌位论文 此外,本研究还对光果甘草黄酮类成分光甘草定的制备工艺进行考察,用杜 层析法和制备薄层法从新疆光果甘草中分离得到光甘草定,对其理化性质和结构 鉴定进行详细描述。光甘草定是光果甘草中的主要异黄酮类成分,在总黄酮中含 量达%,具有良好不发前景。国内对光甘草定的研究几乎是个空白。本研究对 . 光甘草定的深入研究提供一定参考依掘。 本研究中所制备的靶向载体和抗癌前药复合物对深入研究肝靶向创新药物奠 定一定基础,其生物活性有待药理实验来验证。本研究工作在新疆甘草资源的深 入基础研究和不发利用以及促进药物化学学科发展等方面将具有重要意义。 ??致谢 致 谢 本论文是在指导老师木合布力.阿布力孜教授的悉心指导和关怀下完成的。木 老师严谨求实的治学作风和诲人不倦、孜孜以求的态度将使我终生受益。他的敬 业精神和不知疲倦的科研热情,为我树立了榜样并将影响我的一生。近两年的实 验过程中,在我专业知识和技能得到提高的同时,也从老师那里学习了许多科研 的思想,再次衷心感谢木老师这近两年来在学习、实验上的指导以及生活中的关 心和帮助。 衷心感谢药化/有机教研室的各位老师在我研究生实验期间给予的无微不至的 关怀和全心全意的帮助。感谢研究生师姐及同学在我实习期间对我生活上的关心 及实验上的指导。 此外,还要特别感谢我的家人