自体外周血干细胞联合自体骨髓移植与单纯自体骨髓移植后造血功能重建的比较

自体外周血干细胞联合自体骨髓移植与单纯自体骨髓移植后造血功能重建的比较 自体外周血干细胞联合自体骨髓移植与单纯自体 骨髓移植后造血功能重建的比较 冯 茹 ,周淑芸 ,伍柏松 ,刘启发 ,孙 竟 ,牛京娜 ()第一军医大学南方医院 ,广东 广州 510515 () () 摘要 :目的 :比较自体外周血干细胞联合自体骨髓移植 APBSCT + ABMT与单纯自体骨髓移植 ABMT后造血功能重建及有关 临床指标 。方法 :以 10 例 APBSCT + ABMT 及 10 例 ABMT 病人作为研究对象 。结果 :移植后 APBSCT + ABMT 组与 ABMT 组白细 9 21 9 21 9 21 (胞 > 1. 0 ×10L?、中性粒细胞 > 0. 5 ×10L?和血小板 > 50 ×10?L的中位数时间分别为 10 、11 、13 d 和 15 、17 、20 d 均为 P < ) ( ) 0. 05P < 0. 01。伊米配能使用率 ABMT 组明显高于 APBSCT。输血浆量及血小板量 APBSCT + ABMT 组明显较 ABMT 组为少 ( ( ) ) + ABMT 组 P < 0. 01。出血发生率及程度两组均有显著差异 P < 0. 05。住层流病房时间 APBSCT + ABMT 组明显较 ABMT ( ( ) ) 组短 P < 0. 01。但血红蛋白下降程度两组无显著差异 P > 0. 05。结论 :APBSCT + ABMT 可加快造血功能重建速度 ,并降低 严重感染和出血的发生率 ,减少血液成分输注及抗生素的使用 ,缩短住院时间 ,同时可利用骨髓进行体外净化 ,因此仍不失为 一种治疗恶性肿瘤的有效手段 。 关键词 :造血功能 ; 骨髓细胞 ; 自体移植 ; 造血重建 () 文章编号 中图分类号 : R 331. 2 文献标识码 :A :100728622 20000120009203 Comparison of hematologic recovery bet ween a utologous peripheral blood stem cell plus bone marro w transplants and simple a utologous bone marro w transplant (FENG Ru ,ZHOU Shu2yun ,WU Bo2song , et al . Department of Hematology ,Nanfang Hospital ,The First Military Medical )University ,510515 Abstract :Objective : To compare the speeds of engraftment and concerning clinical data between autologous peripheral () () blood stem cell plus bone marrow transplants APBSCT + ABMTand simple autologous bone marrow transplant ABMT. ( ) ( ) Methods :APBSCT + ABMTn = 10and ABMTn = 10were used on the treatment of acute leukemia and lymphoma 9 21 9 21 patients ,their data were studied. Results :The average days reach WBC > 1 . 0 ×10L?,N > 0 . 5 ×10L?and Plt > 50 921 ( ) ×10L?were 10 ,10 . 5 ,12 . 5 in APBSCT + ABMT group and 15 ,17 ,24 in ABMT group respectivelyP < 0 . 05. Therewas a significant decrease in the number of plasma and platelets transfusions in the APBSCT + ABMT group as compared ( ) with ABMT group P < 0 . 01. The rate of Tienam use was significantly greater in ABMT group than in APBSCT + ABMT ( ) group P < 0 . 05 , P < 0 . 01. There was a significant difference about the rate and degree of bleeding between these two ( ) group s P < 0 . 05,and also a significant shorting of living in laminar air flow bioclean room in APBSCT + ABMT group ( ) than in ABMT group P < 0 . 01. No difference was seen between two group s about reducing of hemoglobin and the num2 ( ) ber of red blood cells transfusion P > 0 . 05. Conclusion :APBSCT + ABMT can improve the rate of hematologic recov2 ery ,and thus ,decrease the rate of infection , bleeding ,transfusion ,antibiotics usage and length of hospitalization ,it is an effective therapy for malignancies. Key words :Hematopoietic function ; Bone marrow cell ; Autologous transplantation ; Hematologic recovery 为发挥不同来源造血干细胞的各自优势 ,有学 , 降 低 复 发 率 , 减 少 移 植 费 用 。我 科 自 生存 质 量 者提出应用自体外周血干细胞联合自体骨髓干细胞 1995 年 9 月 以 后 对 10 例 恶 性 血 液 病 患 者 进 行 了 () 进行移植 APBSCT + ABMT,以提高移植成功率及 APBSCT + ABMT , 收到较满意的效果 , 现将此 10 例 移植后造血重建及相关情况与我科同时进行的 10 ()例 ABMT 进行比较 ,如下 。基金项目 :国家自然科学基金资助项目 39300135 收稿日期 :1999211201 1 材料与方法() 作者简介 :冯 茹 1961 —,女 ,副主任医师 1. 1 病例情况 : 10 例行 APBSCT + ABMT 患者及 10 1. 3 造血干细胞 例 ABMT 患者均为我科住院之恶性血液病病人 ,一 1. 3. 1 CD34 阳性细胞检测 :用间接免疫荧光法 ,利 般情况见表 1 。 用流式 细 胞 仪 进 行 CD34 阳 性 细 胞 检 测 。鼠 抗 人 ( ) CD345 单抗 TUK3为丹麦 DAKO 公司产品 ,羊抗鼠 1. 2 造血干细胞采集及保存 1. 2. 1 外周血干细胞动员 、采集及保存 :APBSCT + FITC2IgG 为武汉生物制品所产品 。标本制备方法按 2 ABMT 组患者应用大剂量化疗联合粒细胞集落刺激 文献进行。 ( ) 因子 G2CSF进行外周血干细胞动员 。大剂量化疗1. 3. 2 CFU2GM 培养 :用体外琼脂培养法进行 CFU2 3 (() ) 方案 :阿糖胞苷 Ara2C联合足叶乙甙 VP16或米托 GM 培养 ,按文献方法进行 ,所用重组人粒2单细胞 () () ( ) 蒽醌 MIT或柔红霉素 DNR,具体剂量为 Ara2C 1 集落刺激因子 rh GM2CSF由美国先灵葆雅公司提 21 - 1 21 ,2 gd?×5 d ,VP16 100,200 mg?d ×3 d ,MIT 10供 ,终浓度 100 ngm?l。培养 14 d 计数 。 21 21 mgd?×3 d ,DNR 60,80 mgd?×3 d 。当外周血中 白细1. 4 造血干细胞移植 : 采用 MACC 方案或 CY 21 μ( ) ( 胞计数降至最低时始用 G2CSF 300 gd?麒麟 中国+ TB I 方案预处理 。MACC 方案 : M 马法兰160 , 9221 2 21 ) ( 医药有限公司皮下注射 ,白细胞上升至 2 ×10 180 mg/ md?×1 d ,Ara2C1 . 0 g/ md?×2 d ,CY环 磷酰21 2121 21 ( ) () L?左 右 时 应 用 CS23000Plus 血 细 胞 分 离 机 美 国胺60 mgk?gd?×2 d ,CCNU 环已亚硝脲240 mgd?×1 21 21 ) Baxter 公司开始进行外周血干细胞采集 ,每例病人 d ;CY + TB I 方案 : CY60 mgk?gd?×2 d , 采集 1,3 次不等 ,平均 2 次 ,每次处理全血量 10 L , TB I9 . 0 Gy ,分 2 次照射 ,剂量率为 6 . 06,6 . 12 c Gy? - 1 s 。预处理后输 入 骨 髓 或 骨 髓 及 外 周 血 干 细 胞 。分离产品用程控冷冻仪冷冻 ,液氮保存 。 1. 2. 2 骨髓细胞的采集及保存 :两组病人均择期在 并于移植后 + 1 开始使用 G2CSF 至粒细胞 > 1 . 0 × 921 硬膜外 麻 醉 下 由 髂 后 采 集 骨 髓 细 胞 , 骨 髓 细 胞 用 10L?。 2 χrhIL22 体外进行激活处理 ,以达净化目的 ,具体方法 1. 5 统计学处理 :应用 t 检验 、检验及秩和检验 1 见文献。 分析两组之间的差异 , P < 0 . 05 为相差显著 。 表 1 病人一般资料 分组 序号 性别 年龄 诊断 移植时状态 分组 序号 性别 年龄 诊断 移植时状态 ALL2L1 第一组 1 女 14 CR1 第二组 1 女 27 CML CR2 女 女 2 39 CR2 2 21 AMLL2M4b CR1 ANLL2M2a 男 男 33 34 ANLL2M3a 3 35 CR1 NHL2 ?A CR3 男 男 ALL2L2 4 27 CR1 4 15 NHL2 ?B CR1 男 女 5 23 CR1 5 40 CR1 NHL2 ?A ANLL2M3a 男 男 女 男 6 30 PR2 6 30 ANLL2M4 Eo CR1 NHL2 ?A 女 男 7 35 PR3 7 29 CR1 ANLL2M3b NHL2 ?B 女 男 8 37 ANLL2M2a CR2 8 15 PR2 NHL2 ?B 男 男 9 33 ANLL2M3 CR1 9 52 CR1 ANLL2M3 3 10 15 ANLL2M2a CR1 10 21 CML CR1 注 : CR1 、CR2 、CR3 分别为第一 、第二 、三次达完全缓解 ; PR2 、PR3 分别为第二 、第三次复发后达部分缓解 。 3 示已死亡病例 。 9219 21 () ( ) 2 结果ANC> 0 . 5 ×10L?及血小板 Plt> 50 ×10L?的 () APBSCT + ABMT 组病人平均输入外周血单个核 中位数时间 波动范围见表 2 ,两组相差显著 。 8 21 表 2 APBSCT + ABMT 或 ABMT 疗效的比较 () () ( 细胞 MNC2 . 29 ?1 . 04×10k?g,CFU2GM 12 . 35 421 + 6 APBSCT + ABMT ABMT () ) ?22 . 98×10k?g,CD34 细胞 6 . 38 ?6 . 48×10?921 3 321 821 ()10 . 00 8,14 ( ) ( ) WBC > 1. 0 ×10L?d15 . 0 11,42() (kg,输入骨髓 MNC 1 . 25 ?0 . 87×10?kg,CFU2GM 5 . 9 21 3 ( )( )10 . 50 9,14() ANC > 0 . 5 ×10 L ? d 17 . 0 11,424 21 + ( ) )921 14 ?7 . 53×10k?g, CD34 细胞 4 . 95 ?2 . 90 3( ) Plt > 50 ×10L?d骨 ()() 12 . 50 8,1424 . 0 10,55621 ( ) 髓达增生活跃 d住3( ×10k?g。ABMT 组病人平均输入骨髓 MNC 2 . 92 ( )20 . 00 13,40() 30 . 0 14,50( ) 层流室时间 d输血3 38 21 4 21 19. 90 ?1 . 9326. 60 ?6 . 92 ) ( ) ?0 . 7710k?g, CFU2GM 7 . 86 ?10 . 410k?g,×() 浆量 ml输血小板3 3 50 . 00 ?62 . 47350 . 00 ?202 . 55 ()+ 621 量 U () CD34 细胞 7 . 55 ?3 . 11×10?kg。3 3 25. 00 ?3 . 78 42 . 50 ?11 . 88 () 输红细胞量 ml 2. 1 造血功能重建时间 575. 00 ?157 . 1450 . 00 ?244 . 1121Hb 下降程度 g?L 29 . 20 ?22 . 8033 . 40 ?15 . 002. 1. 1 外周血恢复时间 :移植后两组病人外周血白 921 组间比较 : 3 P < 0 . 05 , 3 3 P < 0 . 01 。 () 细胞计数 WBC回升至 > 1 . 0 ×10L?,中性粒细胞 ( ) 和检验 , u = 2 . 00 P < 0 . 05。 ,导致移植后复 肿瘤骨髓极易受到肿瘤细胞的侵犯 2. 2 血液成分输注情况 : 从表 2 中可看出 ,移植后 发率高 。而外周血造血干细胞则是含有不同分化阶 (每例患者输入的血浆量 、血小板量相差非常显著 为 段的细胞群体 ,移植后不仅可使造血功能重建 ,而且 ( ) ) 迅速 ,从而减少并发症 ,减少病人痛苦 ,缩短住层流 P < 0 . 01,而红细胞输入量无显著差异 P > 0 . 05。 2. 3 严重感染发生率及抗生素应用情况 : 移植后 室时间 ,减少费用 , 并且由于肿瘤细胞污染可能性 6 APBSCT + ABMT 组除一例发生绿脓杆菌败血症外 , 少,移植后复发率低 。以往认为其最大的不足为 无其他严重感染 。而 ABMT 组除一例败血症外 ,发 造血不持久 ,所以多提出与骨髓联合移植以弥补之 。 生严重呼吸道感染 4 例 。两组体温 > 39 ?发生率 、 然而近年来的研究和移植的经验表明 ,外周血能够 7 三代头孢使用率分别为 20 % 、60 %和 50 % 、90 % ,无 长久造血因此倾向外周血造血干细胞替代骨髓 。 ( ) 显著差异 P > 0 . 05。而从目前临床认为最强的抗 本组 APBSCT + ABMT 组造血重建速度与国外 文献 7 ( 生素 ———伊米 配 能 的 使 用 率 两 组 分 别 为 20 %和 报道相近,而作为自体移植 ,体内外微小残留 病的 ) 80 % , P < 0 . 01,推测 APBSCT + ABMT 组感染发生 净化对降低复发率 、提高病人生存质量关系重 大 ,率及程度均较 ABMT 组低 。 由于外周血干细胞必须冷冻保存 ,因此净化与冷 冻之间的顺序何者先行仍有争议 , 有人认为 ABMT 2. 4 出 血 及 贫 血 情 况 : 出 血 发 生 率 两 组 分 别 为 40 %和 100 % , 有 显 著 差 异 , P < 0 . 05 。出 血 部 位 时先进行 IL22 激活骨髓再冷冻保存 ,细胞解冻后净 8 化效果受影响,而众所周知 ,冷冻后的细胞需及时 APBSCT + ABMT 组以皮肤粘膜出血 、血尿 、阴道出血 为多见 ;ABMT 组除以上情况外 ,出现蛛网膜下腔出 回输 ,否则回输的造血干细胞活力或数量损失较大 。 血致病人死亡一例 。另外移植后两组均有血红蛋白 而本组病人取部分骨髓用于 IL22 激活 ,不仅达到了 下降 ,但无显著差异 P > 0 . 05 ,表 2 。净化目的 ,而且避免了外周血干细胞冷冻与激活之 2. 5 住层流室时间 :两组相比住层流室时间相差非 间的矛盾 。因此认为对恶性血液病仍不失为一可取 ( ) 常显著 P < 0 . 01。 的治疗手段 。 参考文献 :2. 6 移植成功率及复发率 :两组中各有一例移植相 1 刘启发 ,周淑芸 . 白细胞介素 2 激活的骨髓对自身骨髓中 关性死亡 ,死因分别为肝静脉闭塞病并败血症及败 () 白血病细胞的净化作用 J . 实验血液学杂志 ,1996 ,4 4: 血症并脑出血 。而复发率因时间尚短至今两组尚无 405 - 407. 显著差异 。 黄小军 ,张海帆 ,王申五 ,等 . 多元耐药相关蛋白 P170 糖 2 蛋白在白血病骨髓细胞中的表达 J . 实验血液学杂志 , 3 讨论 () 1993 ,1 2:167 - 171. 造血干细胞治疗恶性血液病已被广泛应用 ,随 刘秀珍 ,主编 . 造血祖细胞培养技术实验方法手册 M . 着人们对不同来源造血干细胞生物学特点研究的不 3 北京 :北京出版社 ,1993. 49 - 57. 断深入 ,除骨髓造血干细胞以外 , 外周血造血干细 Kessinger A , Armitage JO. The evolving role of autologous 4 ,5 胞 、脐血造血干细胞等相继被用于临床。为发 4 peripheral stem cell transplantation following high - dose 挥不同来源造血干细胞的各自特点 ,我们对 10 例恶 chemotherapy for malignanciesJ . Blood ,1991 ,77 :211 - 213. 性血液病进行了 APBSCT + ABMT 移植 ,就移植后造 Broxmeyer ME ,Srivastava A ,Lu I , et al . Cord blood transplan2 5 tation :an update J . Exp Hematol ,1994 ,22 :677. 血功能重建 、移植相关的并发症及移植过程中成分 Zimmerman TM , Mick R , Myers S , et al . Source of stem cells 输血等情况与我院同期进行的 10 例 ABMT 患者进 6 impacts on hematopoietic recovetr after high - dose chemothera2 行比较 ,结果显示 ,APBSCT + ABMT 移植后造血功能 pyJ . Bone Marrow Transplant , 1995 ,15 :923 - 927. 重建迅速 ,出血 、感染等并发症的发生率低 ,程度轻 ; 刘海川 ,姚善谦 ,彭裔云 ,等 . 自体造血干细胞移植治疗白 输血液制品次数和数量少 ,病人住层流室的时间短 ; 血病及其他恶性肿瘤 41 例临床研究 J . 中华内科杂志 , 7 提高了移植成功率 ,降低了移植相关死亡率 。 1993 ,32 :461 - 463. 有关联合外周血造血干细胞移植后造血重建迅 Charak BS ,Malloy B ,Agah R , et al . A novel approach to purg2 速的原因 ,普遍认为骨髓细胞中主要是一群分化程 8 ing of leukemia by activation of bone marrow with interleukin 2. J . Bone Marrow Transplant ,1990 ,6 :193 - 198. 度较早的造血干细胞 ,移植后虽可造血重建但较为