动物医学毕业论文 左旋咪唑对犬免疫指标的影响

动物医学毕业论文 左旋咪唑对犬免疫指标的影响 种类: 农学 编号(学号): 本科生毕业论文(设计) 左旋咪唑对犬免疫指标的影响 Effect of Levamisole on Some Immunity Indices of Dogs 、 职称: 教授 指导教师: 云南农业大学 教学单位: 云南农业大学动物科学技术学院 专 业: 动物医学 年 级: 2009级 论文(设计)提交日期:2010.1.19 答辩日期:2010.1.24 答辩委员会主任: 云南农业大学成人教育学院 2009年6月 摘 要 左旋咪唑是动物生产和兽医临床上常用的广谱、高效、低毒、安全的咪唑噻唑类驱虫药。研究表明，它除了有驱虫功能，还具有免疫调节作用，能促进免疫细胞的增殖，增强其吞噬、趋化功能，诱导机体产生各种细胞因子;提高补体活性;增强机体抗病毒能力及促进生长等方面。本实验通过对犬饲喂左旋咪唑来探讨其对犬免疫指标的影响，试验结果表明:中剂量的左旋咪唑(2.5mg/kg)能不同程度的提高犬的机体免疫球蛋白(IgG，IgM，IgA)和补体C3、C4的浓度含量，特别是免疫球蛋白(IgG)和补体C4的浓度含量(P<0.05)，从而提高了机体免疫水平。而大、小剂量的LMS(10mg/kg、0.1mg/kg)却不能提高犬的免疫水平，相反大剂量的左旋咪唑降低犬免疫球蛋白(IgM，IgA)和补体C3的浓度含量(P<0.05)，因此抑制了犬机体的免疫作用，从而降低了犬的机体免疫水平。 关键词:左旋咪唑;犬;免疫指标 1 Abstract Levamisole (LMS) is a sort of high efficiency, low toxity and safety insecticide, which is commonly and broadly used in the animal production and the clinic of veterinary. Many research shows that LMS possess many other physiologic properties including antiviral ability, enhancing the proliferation, phagocyotic and chemotactic function of immunocyte, inducing Cytokine synthesis and improving the complement activation by up- or down- regulating immune function., besides its Parasit Esexpelling. This experiment discussed the effect of levamisole on some immunity indices of dog, the results indicated: at moderate dose LMS(2.5mg/kg) improved the contents of immunoglobulin(IgG，IgM，IgA) and complement (C3, C4) in different degree, specially IgG and C4 density content (p<0.05), and raised the immunologie status of the organism. But high and low dose of LMS (10mg/kg、 0.1mg/kg)decreased the contents of immunoglobulin(IgG，IgM ，IgA) and C3, and depressed the immunologie status. Keys: Levamisole; Dog ; Immunity indices 2 前 言 左旋咪唑(LMS)是一高效的驱线虫药，是一种白色或黄白色结晶或结晶性粉末，无臭，苦味，极易溶于水，在碱性溶液中易分解变质。左旋咪唑是动物生产和兽医临床上常用的咪唑骈噻唑类驱虫药，具有广谱、高效、低毒、药源充足、性质稳定等优点。 分子中含有两个药理活性区域，一个是咪唑核，在左旋咪唑为四咪唑的左旋异构体，其 体内呈现药物作用，另一个是含硫区，可能在体内执行左旋咪唑的药理活性。左旋咪唑以它的咪唑环与效应细胞如淋巴细胞，多核白细胞和巨噬细胞的胸腺生成素的受体结合，通过改变细胞内的环核苷酸比例而影响细胞代谢和功能。 [1]自Renoux等(1971)发现左旋咪唑能增强小鼠布什杆菌菌苗免疫效果后，其免疫作用引起了相关研究者的极大兴趣，对其在免疫方面的探索性研究和验证性研究不断发表。之后左旋咪唑相继被应用在病毒性、细菌性、免疫缺陷性疾病以及某些蠕虫及原虫的免疫上。如 Monier等对两头患有狼疮样综合症(伴有消瘦的热性多关节炎)的德国牧狗。每天用2mg/kg剂量的左旋咪唑，每周连续3天，连用4,5个月，结果发现 [2]发现临床症状明显改善，特别是多关节炎消失 。Giambrome等对7日龄鸡注射球虫疫苗时，腹腔内注射左旋咪唑，接种三周后，实验组比未注射左旋咪唑的鸡只增重明显，并提高了对艾美尔球虫的抗感染力，并且他们研究证明:如果在接种前三天以0.25mg/kg [ 3]剂量皮下注射，能产生最强的免疫能力。Shanma等(1990)报道左旋咪唑不仅增强犊牛对多杀性巴氏杆菌疫苗免疫初次体液免疫应答反应，也促进回忆性体液免疫应答反应[4]。肖俊杰等(1991)报道对2、4日龄的雏鸡经加左旋咪唑—葡萄糖微粒的新城疫?(ND [5]?)苗首免后的H1抗体效价显著高于?苗接种组(p<0.01)，增强免疫保护率;乔彦良等(2000)报道:左旋咪唑有增强鸡细胞免疫和体液免疫功能的作用，LMS用药后能 [6]使正常鸡血清补体活性明显升高，增强鸡机体巨噬细胞功能; Wisniewski等(1993)报道左旋咪唑促进猪伪狂犬疫苗免疫细胞的免疫应答，对白细胞的抑制增强，淋巴细胞 [7]转化指数升高，但体液免疫并无变化;罗晓松等(1994)对仔猪接种猪瘟疫苗时同时加服左旋咪唑 ，结果显示左旋咪唑能提高抗体效价，延迟抗体水平下降时间，进一步 [8]表明了左旋咪唑能显著提高猪瘟疫苗免疫的体液免疫应答，增强免疫作用;张日俊等(1999)报道左旋咪唑具有良好的免疫刺激或调节作用，同时兼有提高增重和饲料转化 [9]的功效，可以用于使用抗生素对免疫器官及其免疫功能的抑制作用等等相关表明: 3 左旋咪唑有调节动物机体免疫作用，影响着机体免疫应答，具有增强，促进某些动物机体的体液和细胞免疫的作用。 近年来，国内、外不断的对左旋咪唑的免疫作用进行了探讨研究，并不断的有报道报告左旋咪唑在某些动物免疫方面发现的新作用，扩大了左旋咪唑在临床上的应用途径和作用。但未见有资料表明左旋咪唑在犬身上也能增强犬机体免疫，对犬免疫作用有影响。因此本实验对犬进行饲喂左旋咪唑来检测免疫球蛋白和补体的浓度含量变化来探讨左旋咪唑对犬免疫的的影响作用。 1 1.1 试验动物 本次实验所用的12只犬由镇康流浪动物救助站提供，实验前已对犬进行预防接种疫苗，并确定所选犬均属健康。实验前、后均按正常方式饲养，环境、饲料不变。 2.2 实验药物 盐酸左旋咪唑片(由四川省崃兽药厂生产，川兽药字，2008015078)。 2 方法 2.1 实验分组 选择健康犬只12只，按年龄体重相近似原则分成4组，每组3只，实验组一饲喂小剂量左旋咪唑0.1mg/kg;组二饲喂中剂量左旋咪唑 2.5mg/kg;组三饲喂大剂量左旋咪唑10mg/kg;组四为对照组，不喂左旋咪唑。各实验犬均按正常管理、饲喂。 2.2 血样的采集和处理 试验期为2周，在第1、7、14天分别进行采血取样。采用前肢静脉采血(每次每只采取血液1.5-3ml)，所采血样放入肝素纳负压储血管保存后于离心机中离心，以4000r/min离心30min，分离血清，取上层血清移入各试剂杯中，置4?冰箱备用、待测。每次采血后分别投与相应的左旋咪唑。 2.3 检测指标 主要检测用于 IgG、lgM、IgA浓度和补体C3、C4浓度的测定。 4 2.4 检测方法 血清检测法为免疫比浊测定法。 2.5 数据分析 全部数据采用平均值对比(图表比较)和采用F检验与q检验，结果用(均数?标 准差)表示。 3 结果 表1 不同时期各组各免疫指标平均数比较 组别 采血期 IgG(mg/L) IgM(mg/L) IgA(mg/L) C3(mg/L) C4(mg/L) 1 天 54.278 59.548 35.256 30.861 29.998 对照组 7 天 50.070 55.979 32.518 32.493 32.454 14天 53.829 53.916 33.544 37.099 34.901 1 天 50.070 50.583 32.518 30.087 27.787 低剂量组 7 天 34.923 37.712 21.906 21.675 21.154 14天 39.551 44.059 25.329 21.837 23.245 1 天 31.043 42.536 20.374 22.484 16.997 中剂量组 7 天 74.474 88.387 52.712 43.674 35.496 14天 54.278 55.979 35.256 31.866 29.99 1 天 54.829 62.882 41.001 37.392 30.635 高剂量组 7 天 37.868 38.301 22.591 21.352 22.289 14天 50.069 51.265 33.544 28.793 25.158 100 90 80IgG(mg/l)70IgM(mg/l)60IgA(mg/l)50C3(mg/l)40C4(mg/l)30 20 10 0 1 天 对照组低剂量组中剂量组高剂量组7 天 图1 不同时期各组各免疫指标平均数比较 14天 1 天 7 天 5 14天 1 天 7 天 14天 1 天 7 天 14天 由表1和图1可知，在给犬投喂左旋咪唑后，其不同程度的刺激犬机体免疫，使免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和补体C3、C4的含量都有不同程度的变化，说明左旋咪唑能够刺激犬机体免疫，不同程度的调节影响着犬机体免疫体质。在此过程中中剂量组的左 、IgA、C3、C4的最大提高作用可分别达43.43%、45.85%、旋咪唑对犬各免疫指标IgG、IgM 32.34 %、21.19 %、18.50%(与投药前相比)。而高剂量组对犬免疫指标IgG、IgM、IgA、C3、C4的抑制作用可分别达16.04%、8.34%、24.58%、16.96%、18.41%(与投药前相比)。 表2 各免疫指标分析，结果用(均数?差) IgG(mg/L) IgM(mg/L) IgA(mg/L) C3(mg/L) C4(mg/L) aaa aa 对照组 52.73?4.59 56.48?5.99 33.77?5.42 33.48?4.09 32.45?5.62 aa b aa低剂量组 41.52?8.35 44.12?7.41 26.58?5.61 24.53?5.42 23.54?4.33 b aa ab中剂量组 53.27?23.60 62.30?28.76 36.11?18.66 32.68?13.36 27.50?9.80 a bb ba高剂量组 47.59?10.36 50.82?12.75 32.38?9.33 29.18?8.45 26.03?5.41 注:表中列数字右肩字母不同者，表示两组间差异显著(P<0.05) 由表2可知，中剂量组的免疫球蛋白(IgG)和补体C4同对照组相比差异显著(P<0.05)，高剂量的免疫球蛋白IgM、IgA和补体C3与对照组相比差异显著(P<0.05)。 4 讨论 4.1 实验结果表明:犬饲喂中剂量(2.5mg/kg)左旋咪唑后激发了免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)与补体C3、C4的含量浓度(表1、2)，使犬机体免疫球蛋白和补体的含量浓度有了不同程度的提高，特别是免疫球蛋白(IgG)和补体C4的浓度含量(P<0.05)，从而增强了犬机体的免疫能力。 4.2 饲喂高剂量(10mg/kg)左旋咪唑能降低机体免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)与补体C3、C4的含量浓度 (表1和图1)，特别是免疫球蛋白(IgM、IgA)和补体C3的浓度含量(<0.05)，从而抑制了犬机体免疫水平。 P 4.3 实验中发现，适量的左旋咪唑(2.5mg/kg)能刺激犬机体免疫，不同程度的增加犬免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA)和补体C3、C4的浓度含量，从而增强了犬机体免疫能力。但大剂量的左旋咪唑(10mg/kg)能抑制犬的机体免疫。所以在给犬投喂左旋咪唑时建 6 议使用适量的左旋咪唑(如2.5mg/kg)以达到驱虫并增强其免疫的双重作用。但在应用左旋咪唑时，也应谨用，并严格注意其用量，以免发生抑制免疫起不到理想的免疫、驱虫效果。 7 参考文献 [1] Renoux G .Thegeneral immunophamacolgy of levamisole . 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