魔芋精粉中甘露聚糖的测定方法

； ⋯ j-TF ⋯ 袭擀 瞅 一 魔芋精粉中甘露聚糖的测定方法 陕西省林科所 吴万兴 李科友 陕西省轻工所 丝 方法一 一 ． 原理l 魔芋甘露聚糖用酸水解后生浅D一甘露糖和D一葡萄糖。甘露糖在常温下与荦胼生最甘露膝，是一 种沉淀物．年惘 这种特性可测定出生成的甘露糖腙的重量，进而计算出魔芋甘露聚犍的台量·甘露糖与甘 露糖腙的分子量分别为18o和270一魔芋甘露聚糖是由一分子葡萄糖和二分子甘露糖构成的，即0．2 33克 甘露拮相当于o．35克魔芋甘露聚糖。 二，试剂 1．2．5 盐酸溶渤 2．2O 氢氧化钠溶渤 3．盐酸苯胼 (分析纯) 4．醋酸钠 (分析纯)， 5．盐酸苯胼一一醋酸钠混合液的制备， 取I克盐酸苯拼和1．5克醋酸钠溶于25毫升蒸馏水中。此液幅用时配制。 三 ．操作步骤 1．水解 称取魔芋精粉0．5克 (准确至0．0002克)，装八 250--300毫升的三角瓶中，加八6o一8o毫 升盐酸溶液，装上回流器冷藏，于沸水浴中，水解4—5小时．冷却后，用氢氧化钠溶液小心地调至PH值 6，然后进行过滤 (有色时，可加o．5克活性炭后再过滤)，滤液收集于120毫升的瓷燕发皿中，用少量 蒸馏 水洗涤残渣．洗涤滤出液并八蒸发皿中。滤液应是无色透明的水解糖液。 2．甘露糖腙的生成：将过滤好的永解塘液在永褡上蒸发浓缩，至体积为 5毫升左右取下．冷却．加 八盐酸苹阱和醋酸钠的混合液5毫升。摇匀。将该蒸发皿置低于10’C条件静置24小时，令其进行甘露糖 膝 反应，其结果生成白色至嫩黄色的甘露糖腙沉淀。 3．干燥称重：将生成的沉淀物，用巳恒重的G3—4玻砂漏斗过滹，收集沉淀。再用 30—5o毫 升 蒸 馏水分2—3次洗涤沉淀。然后将带有沉淀的玻砂漏斗移八干燥箱中。于i00‘C下，烘干至恒重，即为甘 露糖腙。滤液中的甘露糖腙等于德液毫升数乘以o．o (1O0毫升水溶液可溶解0．04克甘露糖腙)。 4．计算t 魔芋甘露聚糖 )= ； ×1o × × 署 式 申- G一干燥恒重的甘露糖腺 (克) B一滤波中甘露糖腙的含量 (克) W 一试样重量 (克) 方法= 一 ． 试剂与仪器 74 7 维普资讯 http://www.cqvip.com 1．试剂：葡萄错，甲酸，硫酸，氢氧化枘，3．5一二硝基水杨税。 2．仪器：'／21型分光光良计，LD4—2型离心机，KINEMATICA 高速匀浆器。 二、操作步骤 1．制标准曲线：分别称取12．5rag、2 5rag、3 7．5rag，5omg葡萄糖，定溶于2 5毫升塌瓶中．配制成 0．5rag／毫升，1mg／毫升，1．5rag／毫升、2mg／毫升标准液，用分光光度计在 550am处澜{定其光密 度O．D55o值承标准品毫克和O．D65o之间韵回归方程， 以O．D55O为Y、标准品鼍克为x的回归直线作 为标准曲线。 2．制Dm (魔芋甘露聚糖)试样；称取0．3克雇芋精粉于250毫升烧杯中，加 0．IN甲酸一氢氧化钠 缓冲液 (PH3—3．2)B0毫升，在室温下溶胀lotJ~时，用匀装器匀浆4o秒，注八客鼍瓶中，在离心机上 寓 L,2o分钟 (,1o0o转／分)，取上清液1o毫升 (Din试样)备用。 3．制D：lax水解液：分别吸取1毫升Dm上清液于3支2 5毫升的试管中，各加八0．5毫升 6N硫酸，混匀 后加塞密封，在沸水浴中水解1．5小时，取出，冷却，再各加八o．5毫升6N氢氧 化 钠 溶 液，混 匀，备 用 - 4．测定 ；分别吸取2毫升Dm试 样于3个25毫升的试管申】再分别吸取2毫升ling／唾开的苘萄糖标准 液于3个2 5毫升的试管中。在制得的Dm试样、Dm水解液、标准液9个试管中分别加八 2毫升3．5--二硝 基水杨酸。用燕馏水作空 白．在l砩水俗中加热5分钟，冷却后用蒸馏水定窑25毫升，在分光光度上比色 测定，分剐求出各相同3管的O．D550平均值，在标准曲线上通过所避的标品O．D550点相2mg所对应的 点推出标准曲线的平行线，即校正曲线，在校正曲线上由样品的O D55O值上对应的x轴上的值就是弹品 的毫克数。 5．计算 魔芋甘露聚糖台量 ( 塑旦二 塑旦 xloox o ．9 式中： W =样品重 Crag) T Dm水解液比色测定矗标准曲线的毫克数。 T =Dm试样比色洲定结果查标准曲线毫克教。 o．目=换算系数。 售 书 消 息 《食品工业科技增刊 》平装l4元，精装20元。 《实用食品加工新技术 》 (7)lo元 《食品加工机械 》。17元} 《轻工业科 技 信 息 手 册 》 z2 元} 带加工食品的营养价值手册》，15．5O元J 《食品科学手册 。1 3．5元：《汉英营养科学词典 21 元} 《食品营养成分表 ．10元。本刊备有；89，90、91，92，93年各年合订本，每年一册，每册定价 3o元' 《英日汉食品与营养学用语词典 。u．3o元， 替物科学与]：艺学原理 -9．5o元' 《抗瘟食 药本草》t 10元；《食用瀑加荆检验 》-17元． 墩食品加工技术工艺与配方大垒》土、中、下 (45元) 及续集上，中，下 (60元)} 《世界面包大观 》。 l2元， 氍肉制品拥上手册 }24．50元} 《欢恢科 工 艺学渖 30元． 《食品添加剂》-16元．以上书价均畲邮寄费。 维普资讯 http://www.cqvip.com