愈伤灵胶囊注册申报资料

愈伤灵胶囊注册申报资料 愈伤灵胶囊注册申报资料目录 一、 药品注册表 二、 省药监局的药品注册受理通知单 三、 省药监局药品研制现场考核表 四、 省药监局药品注册申请审查意见表 五、 药品注册申报资料目录 (第一部分:综述资料)1.药品名称 2.证明性文件 3.立题目的与依据 4.对主要研究结果的总结和评价 5.药品说明书样稿、起草说明 6.包装、标签设计样稿 (第二部分:药学研究)7.药学研究资料综述 8.药材的来源及鉴定依据 12.生产工艺的研究、辅料来源及质量 15.质量标准草案及起草说明 16.检验报告书 17.稳定性试验研究资料 18.直接接触药品的包装材料选择依据及质量标准 中药、天然药物 第一部分 综述资料1-1 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:药品名称 药品名称 一、 中文名:愈伤灵胶囊 汉语拼音:愈伤灵 Jiaonang 二.命名依据:依据《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第八册 (WS-B-1662-93)收载的愈伤灵胶囊质量标准。 3 中药、天然药物 第一部分 综述资料1-2 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:证明性文件 保 证 书 国家食品药品监督管理局: 我单位申报注册已有国家药品标准的产品“愈伤灵胶囊”，在该产品申报前，我公司经查询国家中药品种保护委员会网站“中药保护品种动态受理名单”和“信息查询”两个数据库，并到国家知识产权局相关网站查询知识产权保护事宜，查询结果表明:未发现该产品已被授予中药保护品种或已受理该品种的中药保护，也未发现该产品相关的专利保护，所以我们的注册生产不存在侵权问题。 如该产品在注册或生产过程中出现相关知识产权纠纷，我单位愿负相应法律责任，并承担由此造成的一切后果。 二00四年十月二十三日 中药、天然药物 第一部分 综述资料1-3 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:立题目的与依据 立题目的与依据 愈伤灵胶囊处方来源于《部颁标准》中药成方制剂第八册，由土鳖虫、红花、自然铜(煅)、黄瓜子(炒)、冰片等9味原料组成，具有活血散瘀，消肿止痛的作用。临床用于跌打挫伤，筋骨瘀血肿痛，亦可用于骨折的辅助治疗。 一、 有关该品种生产、使用情况的综述 大凡跌打损伤轻则瘀血肿痛，重则伤筋断骨，本方中三七为主药，具有散瘀止血，活血定痛功效，用于跌打瘀肿疼痛，外伤出血可研未内服并外敷;当归、红花、落新妇、土鳖虫、活血祛瘀;自然铜、黄瓜子、续断，舒筋活络，通脉止痛，续筋接骨;冰片，气芳烈，味大辛，性善走窜开窍，以助上述活血去瘀诸药之功。 通过我们对市场调查和网上检索、查询，骨伤科类中成药目前确有疗效的药物还比较少，该产品全国生产厂家仅5家，每年生产产量不到16.2亿粒。占市场需求量的15%左右，且该产品临床反映疗效确实很好，无副作用。为了满足市场需求，我公司依据WS-B-1662-93标准中药成方制剂第八分册收载的品种《愈伤灵胶囊》3 标准处方制备本品，申报注册。 我公司颗粒剂生产线在2004年5月通过了***省药品监督管理局GMP认证，其生产能力为1.5 亿粒/年，公司技术力量雄厚，销售网络齐全，企业信誉好，预计每年可销售该产品200万盒，实现销售收入近620万元。 二、对该产品研究、可行性分析 我公司在申请该品种注册时，对其质量标准进行了研究。质量标准研究方法以原标准对照检查三批试制样品，并增加了以当归对照药材、岩白菜素、人参皂苷Rg 、1Rb三七皂苷R对照品为对照的薄层鉴别和该品种含三七以人参皂苷Rg计的含量测111定指标及醇溶性浸出物测定指标。同时按《药品注册管理办法》要求，对三批试制样品稳定性进行考察研究。 中药、天然药物 第一部分 综述资料1-4 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:对主要研究结果的总结 及评价 申报单位:++++++++ 申报日期:++++++++ 对主要研究结果的总结及评价 愈伤灵胶囊是《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第八册中收载的品种，我公司在产品申请注册时，对其生产工艺、质量标准进行了进一步研究，并对试制样品做了稳定性考察，研究结果总结如下。 一、工艺研究 我们按愈伤灵胶囊原标准工艺中试三批样品，所得的中间体(半成品)收率稳定，重现性较高，制得的成品经公司质量部检测，符合《部颁标准》中收载愈伤灵胶囊质量标准及本公司制定的质量标准草案。 二、质量标准研究 我公司试产了三批愈伤灵胶囊(批号:愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)，按《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第八册收载的愈伤灵胶囊标准检测，其性状、鉴别、崩解时限、水分、装量差异、微生物限度均符合。 为了提高产品质量的可控性，我们参照有关资料，通过研究，建立了以当归对照药材、岩白菜素、人参皂苷Rg 、Rb和三七皂苷R对照品为对照的薄层鉴别方法。111 该方法经三批试制样品和制备的当归对照品、落新妇对照品和三七对照品验证，结果在供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，且斑点清晰，分离效果佳，其它成份对实验无干扰。选择以当归对照药材、岩白菜素、人参皂苷Rg 、Rb和三七皂苷R对照品为对照，用薄层色谱法鉴别愈伤灵胶囊具有专111 属性，是可行的。该薄层鉴别已纳入愈伤灵胶囊质量标准草案。 愈伤灵胶囊质量标准中无含量测定,为更好地控制其质量,我们参考有关资料，用高效液相色谱仪对样品中三七主要成分人参皂苷Rg含量进行了研究。确定了人参1 皂苷Rg1的含量测定方法，该方法经研究验证，其线性关系考察 回归方程:Y = 2829634X + 12375、r = 0.9999，精密度RSD为0.91%，稳定性试验供试品溶液在8小时内RSD为0.97%，重复性试验RSD为0.75%，平均回收率为97.87%、RSD为1.48%，阴性对照无干扰。同时对五批样品中人参皂苷Rg含量进行检测，确定了愈伤灵胶囊1 每袋含三七以人参皂苷Rg计，不得少于1.5mg的定量指标。该检测方法及检测指标1 已纳入愈伤灵胶囊质量标准草案。 同时，我们对该品种所含重金属及砷盐按《中国药典》2000年版一部附录收载 的方法进行了研究。试验结果表明该品种含重金属不超过百万分之十，含砷盐不超过百万分之二，故未列入标准正文。 三、稳定性实验研究 根据国家药品监督管理局《药品注册管理办法》《中药新药研究的技术要求》和愈伤灵胶囊质量标准草案，对三批供试品(++++01、++++02、++++03)进行了三个月加速稳定性试验和六个月常温稳定性试验。考核项目为性状、鉴别、崩解时限、水分、微生物限度、含量测定、包装情况。在考察期内，三批试制样品在各个方面均无显著变化。表明本质量标准草案可用于愈伤灵胶囊的质量控制,试制的愈伤灵胶囊是比较稳定的，故暂定其有效期为2年。 中药、天然药物 第一部分 综述资料1-5 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 项目名称:药品说明书样稿、起草说明 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ 药品说明书样稿、起草说明 OTC 一、药品说明书样稿 愈伤灵胶囊说明书 甲类 请仔细阅读使用说明书并按说明使用或在药师指导下购买和使用。 [产品名称] 品 名:愈伤灵胶囊 汉语拼音:愈伤灵 Jiaonang [成份] 土鳖虫、黄瓜子(炒)、三七、红花、冰片、当归、自然铜(煅)、续断、 落新妇提取物。 [性状] 本品为胶囊剂，内容物显棕色至棕褐色;气香，味苦、微辛、凉。 [作用类别] 本品为骨伤科软组织扭挫伤类非处方药药品。 [功能主治] 活血散瘀，消肿止痛。用于跌打损伤，筋骨瘀血肿痛，亦可用于骨折的 辅助治疗。 [用法与用量] 口服，一次4~5粒，一日3次。 [禁忌]1、孕妇禁用。经期及哺乳期妇女禁用。 2、风寒外感，湿热有痰时禁用。 [注意事项] 1、 忌食生冷、油腻食物。 2、 儿童、年老体弱者应在医师指导下服用。 3、 高血压、心脏病、肝病、糖尿病、肾病等慢性病严重者应在医师指导下服用。 4、 服药3天症状无缓解，应去医院就诊。 5、 对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。 6、 药品性状发生改变时禁止服用。 7、 儿童必须在成人监护下使用。 8、 请将此药品放在儿童不能接触的地方。 9、 如正在服用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师 [规 格] 每粒装0.3g [贮 藏] 密封。 [包 装]铝塑板，12粒×2板/盒。 [有 效 期] 暂定为二年。 [批准文号] [生产企业] 企业名称: ++++++++ 地 址: 邮政编码: 电 话: 传 真: 网 址: 如有问题可与生产企业直接联系。 二、起草说明 本产品说明书依据国家药品监督管理局颁布的第23号令《药品包装、标签和说明书管理规定》及国家食品药品监督管理局网站OTC中药说明书有关规定和《部颁标准》中药成方制剂第十七册收载的愈伤灵胶囊标准起草。其品名、汉语拼音、成份、性状、功能主治、用法用量、注意事项同OTC中药说明书项下的规定、规格、贮藏同该产品标准项下的规定。有效期及内包装依据对本产品进行的稳定性实验而确定。 中药、天然药物 第一部分 综述资料1-6 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:包装、标签设计样稿 申报单位:++++++++ 申报日期:++++++++ 包装、标签设计样稿 一、标签设计样稿及说明 愈伤灵胶囊 愈伤灵胶囊 批准文号 批准文号 [用法用量] 口服，一次4,[用法用量] 口服，一次4, 5粒，一日3次 5粒，一日3次 [规格] 每粒装0.3g [规格] 每粒装0.3g [贮藏] 密封。 [贮藏] 密封。 ++++++++ ++++++++ 产品批号 愈伤灵胶囊 愈伤灵胶囊 批准文号 批准文号 [用法用量] 口服，一次4,[用法用量] 口服，一次4, 5粒，一日3次 5粒，一日3次 [规格] 每粒装0.3g [规格] 每粒装0.3g [贮藏] 密封。 [贮藏] 密封。 ++++++++ ++++++++ 产品批号 说明: 1、标签信息文字直接印刷在铝箔上。 2、每板12粒，规格尺寸为78mm×57mm(长×宽)。 3、产品批号热塑在每板正下方。 二、外包装盒设计样稿及说明 注册 批准文号: 商标 愈伤灵胶囊 Yushangling Jiaonang 地址: 电话: 传真: 邮编: 愈伤灵胶囊 [性状] 本品为胶囊剂，内容物显棕色至棕褐色;气香，味苦、微辛、 凉。 [主要成份] 土鳖虫、黄瓜子(炒)、三七、红花、冰片、当归、自然铜(煅)、续断、落新妇提取物。 [功能主治] 活血散瘀，消肿止痛。用于跌打损伤，筋骨瘀血肿痛，亦可用于骨折的辅助治疗。 [用法与用量] 口服，一次4~5粒，一日3次。 [注意事项] 详见说明书。 [规 格] 每粒装0.3g [贮 藏] 密封。 [包 装]铝塑板，12粒×2板/盒。 [产品批号] [生产日期] [有 效 期]至 年 月 中药、天然药物 第二部分 药学研究资料2-7 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:药学研究资料综述 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ 药学研究资料综述 我公司依据《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第八册中收载的愈伤灵胶囊标准对该药品申请注册，为了提高产品质量可控性及生产过程重现性，我们对其生产工艺、质量标准进行研究，研究方法及结果总结如下: 一、质量标准研究 我公司试产了三批愈伤灵胶囊(批号:愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)，按《部颁标准》中药成方制剂第八册收载的愈伤灵胶囊标准检测，其性状、鉴别、崩解时限、水分、装量差异、微生物限度检查均符合规定。 为了提高产品质量的可控性，我们参照有关资料，通过研究，建立了以当归对照药材、岩白菜素、人参皂苷Rg 、Rb和三七皂苷R对照品为对照的薄层鉴别方法。111 该方法经三批试制样品和制备的当归阴性对照品、落新妇阴性对照品和三七阴性对照品验证，三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)经薄层鉴别，供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，且斑点清晰，分离效果佳，阴性对照实验无干扰。在与岩白菜素对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，且斑点清晰，分离效果佳，阴性对照实验无干扰。在与人参皂苷Rg 、Rb和三七皂苷R对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，且斑点清111 晰，分离效果佳，阴性对照实验无干扰。故选择以当归对照药材、岩白菜素、人参皂苷Rg 、Rb和三七皂苷R对照品为对照，用薄层色谱法鉴别愈伤灵胶囊具有专属111 性，是可行的。该薄层鉴别已纳入愈伤灵胶囊质量标准草案。 愈伤灵胶囊质量标准中无含量测定,为更好地控制其质量,我们参考有关资料，用高效液相色谱仪对样品中三七主要成分人参皂苷Rg含量进行了研究。确定了人参1 皂苷Rg1的含量测定方法，该方法经研究验证，其线性关系考察 回归方程:Y = 2829634X + 12375、r = 0.9999，精密度RSD为0.91%，稳定性试验供试品溶液在8小时内RSD为0.97%，重复性试验RSD为0.75%，平均回收率为97.87%、RSD为1.48%，阴性对照无干扰。同时对五批样品中人参皂苷Rg含量进行检测，确定了愈伤灵胶囊1 每袋含三七以人参皂苷Rg计，不得少于1.5mg的定量指标。该检测方法及检测指标1 已纳入愈伤灵胶囊质量标准草案。 同时，我们对该品种所含重金属及砷盐按《中国药典》2000年版一部附录收载的方法进行了研究。试验结果表明该品种含重金属不超过百万分之十，含砷盐不超过百万分之二，故未列入标准正文。 三、稳定性实验研究 根据国家药品监督管理局《药品注册管理办法》《中药新药研究的技术要求》和愈伤灵胶囊质量标准草案，对三批供试品(++++01、++++02、++++03)进行了三个月加速稳定性试验和六个月常温稳定性试验。考核项目包括性状、鉴别崩解时限、水分、微生物限度、含量测定及包装情况。在考察期内，三批试制样品在各个方面均无显著变化。表明本质量标准草案可用于愈伤灵胶囊的质量控制,试制的愈伤灵胶囊是比较稳定的，故暂定其有效期为2年。 四、中试试验 我公司用标准的生产工艺进行了六批，前三批(++++01、++++02、++++03)中试均按标准处方量5倍投料，理论产量为12040粒，用于稳定性试验研究。随后三批(愈伤灵1、愈伤灵2、愈伤灵3)中试按标准处方量10倍投料，理论产量为24080粒。中试投产前，公司质量部对购进的原料、辅料和内包装材料按《中国药典》二OOO年版一、二部收载有关标准以及国家医药行业标准进行检验，均符合相关标准规定。试产中，提取浓缩后的浸膏收率比较稳定，重现性好。三批(愈伤灵1、愈伤灵2、愈伤灵3)产品收率分别为95.43%、94.93%、95.91%，六批中试样品经公司质量部按愈伤灵胶囊质量标准草案检测，均符合规定。 五、直接接触药品内包装材料选择 根据愈伤灵胶囊国家药品标准中的贮藏条件，我们选用PVC硬片、铝箔对三批试制的愈伤灵胶囊铝塑包装，经三个月加速稳定性实验(温度37?、相对湿度75%)和六个月的常温稳定性考察，该材料包装的药品质量均无显著变化，故选用PVC硬片、铝箔作为该产品内包材。 中药、天然药物 第二部分 药学研究资料2-8 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:药材的来源及鉴定依据 负责人: 实验者: 实验起止日期:2003.6.12-2004.9.26 原始资料保存地点:++++++++ 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ 药材来源和鉴定依据 一、药材来源 1.土鳖虫:本品为鳖蠊科昆虫地鳖EupolyphagaSinensis Walker或冀地鳖Steleophaga plancyi(Boleny)的雌虫干燥体。捕捉后，置沸水中烫死，晒干或烘干。主产江苏、浙江、河南、湖北等地，陕西等地亦产。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 2. 红花:本品为菊科植物红花Carthamus tinctoriusl. 的干燥花。夏季花由黄变红时采摘，阴干或晒干。主产河南、浙江、四川等地。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 3.自然铜(煅):本品为硫化物类矿物黄铁矿族黄铁矿，主含二硫化铁(FeS)，2采挖除去杂质。主产矿区，全年均可生产，拣取后除去杂石即可。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 4.黄瓜子(炒):本品为葫芦科植物黄瓜Cucumis sativusl的干燥成熟种子。夏、秋二季取种子成熟的老黄瓜，剖开取出种子，晒干。主产黑龙江等省，目前全国各地均有栽培。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 5.冰片(合成龙脑):本品为龙脑香(唐本草)Dryobalanops aromatica Gaer-th.f 科植物龙脑香树脂的加工品，或为樟脑、松节油等用化学方法合成的加工制成品。主产龙脑香分布南洋群岛一带，龙脑冰片主产于印度西亚的苏门答腊等地。机制冰片产于上海、天津、南京、广州一带。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 5.续断:本品为川续断科植物川续断，Dipsa Cus axperoidec.y chenget TM Ai 的干燥根。秋季采挖，除去根头及须根，用微火烘至半干，堆置“发汗”至内部变绿色时，再烘干。主产地河北、江苏、浙江、福建、广西、江西、山西、贵州、陕西等地。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 6.三七:本品为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk)F.H Chen的干燥根。秋季花开前采挖，洗净，分开主根、支根及茎基，干燥。支根习称“筋条” ，茎基习称“剪口”。主产云南、广西(栽培)、四川、湖北、江西等地有野生。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 7.当归:本品为伞形科植物当归Angelica sinensis(oliv)Diels的干燥根。秋末采挖，除去须根及泥沙，待水分稍蒸发后，捆成小把，上棚，用烟火慢慢熏干。主产于甘肃、四川、云南、陕西、贵州、湖北等地，各地均有栽培。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 8.落新妇:本品为虎耳草植物落新妇的根。产地:全国各地均有生长。由愈伤灵愈伤灵**///提供。 二、鉴定依据 1. 土鳖虫、红花、自然铜(煅)、冰片、续断、三七、当归质量标准来源于《中国药典》2000年版一部，其内容见复印件。 2. 黄瓜子质量标准来源于《黑龙江省地方药材标准》，其内容见复印件。 3. 落新妇质量标准来源于《辽宁省药材标准》中药材部分，其内容见复印件。 中药、天然药物 第二部分 药学研究资料2-12 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:生产工艺的研究、辅料来源 及质量标准 负责人: 实验者: 实验起止日期:2003.8.12-2004.10.22 原始资料保存地点:++++++++ 联系人: 电 话: 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ 生产工艺研究资料 一、处方组成 土鳖虫 60g 红花 120g 自然铜(煅)30g 黄瓜子(炒)120g 冰片 12g 续断 60g 三七 180g 当归 90g 落新妇提取物 50.4g 以上原料共制胶囊2408粒(每粒重0.3g) 二、制法 1.分别领取土鳖虫、三七、红花等七味药材，依次净选。 2.黄瓜子(炒):取黄瓜子，置适宜容器内，文火加热，并不断的翻动，炒至焦黄色，取出，晾凉。 3.取土鳖虫、三七、红花、自然铜、黄瓜子(炒)、续断、当归，分别粉碎，过100目筛，备用。 4.取落新妇，分别加入6倍水煎煮三次，每次1小时，合并煎煮液，过滤，滤液减压浓缩(P为-0.04,-0.06MPa T为60?)至相对密度为1.35(85?)以上的清膏，减压干燥，研细，过100目筛，备用。 5. 取冰片，研细，备用。 6.取土鳖虫、三七、红花、自然铜、黄瓜子(炒)、续断、三七、当归细粉，混合均匀，与冰片、落新妇提取物细粉配研，过100目筛，混合均匀，装入胶囊，分装，包装，检验，即成品。 三.工艺流程 土鳖虫、三七、红花、自然铜、净选 净药材 黄瓜子、续断、三七、当归、 落新妇 炒黄瓜子 炒制 黄瓜子 100目 土鳖虫、三七、红花、自粉碎 过筛 细粉 然铜、黄瓜子、续断、三 七、当归 1小时 煎煮液 加入6倍量的水 1小时 煎煮 加入6倍量的水 煎煮液 落新妇 箭煮 药渣 药渣 1小时 药渣 加入6倍量的水 箭煮 煎煮液 P为,0.04,,0.06MPa T为60-80? 减压浓合并 过滤 滤液 稠膏 缩 P?,0.06MPa T?60? 100目 减压干燥 研细 过筛 干膏 细粉 研细 冰片 细粉 土鳖虫等混匀 100目 七味药材 细粉 配研 过筛 填充 分装 冰片 落新妇提取 物 包装 成品 四、 制备工艺有关的设备 设备名称 型 号 生 产 厂 家 数量 自动控制粉碎机 ZKF-3 烟台制药设备厂 1 组 两门六车烘箱 CT-C 南京鑫长江制药设备厂 1 万能粉碎机 SF-250 江苏省泰兴县制药机械厂 1 V-型混合机 0.6T 江苏瑰宝制药机械厂 1 振动筛 ZS650 江苏瑰宝制药机械厂 1 全自动胶囊填充 JTJ-A 瑞安康利制药机械厂 1 机 铝塑包装机 SPB-2 锦州航空机械厂 1 抛光机 JPJ-100 瑞安康利制药机械厂 1 六、三批中试技术数据 三批中试均按标准处方量10倍投料，理论产量为24080粒(每粒重0.3g)。 投料日期 04年10月10日 04年10月11日 04年10月12日 生产批号 愈伤灵1 愈伤灵2 愈伤灵3 投药材量(kg) 6.94 6.87 6.80 粉碎 出粉量(kg) 6.60 6.60 6.60 出粉率(%) 95.10 96.07 97.06 投落新妇量(?) 5.0 5.0 5.0 提取出干膏量(?) 0.74 0.72 0.75 浓缩 干膏率(%) 14.80 14.40 15.00 加入冰片量(g) 120 120 120 加入落新妇提取物量(g) 504 504 504 成 品 量(粒) 22980 22860 23096 成品 成 品 率(%) 95.43 94.93 95.91 中药、天然药物 第二部分 药学研究资料2-15 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:质量标准草案及起草说明 试验者: 试验起止日期:2003.12.20-2004.2.28 原始资料的保存地点 :++++++++ 联系人: 电 话: 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ 一、质量标准草案 愈伤灵胶囊 愈伤灵 Jiaonang 【处方】 土鳖虫25g 红花 50g 自然铜(煅)12g 黄瓜子(炒)50g 冰片 5g 续断 25g 三七 75g 当归 37g 落新妇提取物 21g 【制法】 以上九味，除冰片、落新妇提取物外，其余红花等七味粉碎成细粉，将冰片、落新妇提取物分别研细，与上述粉末配研，过筛，混匀，装入胶囊，共制成1000粒，即得。 【性状】 本品为胶囊剂，内容物显棕色至棕褐色;气香，味苦、微辛、凉。 【鉴别】(1)取本品，置显微镜下观察:花粉粒类圆形、椭圆形或橄榄形，直径约60μm，具3个萌发孔，外壁有齿状突起，长管道状分泌细胞常位于导管旁，直径约至66μm，含黄棕色至红棕色分泌物。韧皮薄壁细胞纺锤形，壁略厚，表面有极微细的斜向交错纹理，有时可见菲薄的横隔。树脂道碎片含黄色分泌物。草酸钙簇晶直径15,50μm，存在于皱缩的薄壁细胞中，常数个排列成行。体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，可见刚毛。 (2)取本品粉末少量，进行微量升华，升华物呈不定形的无色片状结晶。 (3)取本品内容物1.5g，加乙醇10ml，置水浴中加热至沸，滤过，取滤液5ml，加3%碳酸钠溶液1.5ml，加热(70,80?)5分钟，再加新配制的0.9%4-氨基安替比林溶液和铁氰化钾试液各2滴，即显橘红色至深红色。 (4)取本品内容物1.5g，加水和盐酸各5ml，加热(70,80?)5分钟，滤过，取滤液加硫氰酸铵试液2滴，显深红色。 (5)取本品10粒，取内容物，加乙醚30ml，超声处理30分钟，过滤，挥干，加乙酸乙酯1ml溶解，作为供试品溶液;另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录?B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷—醋酸乙酯(9?1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 (6)取本品粉末5g，加甲醇40ml，超声处理30分钟，过滤，蒸干，加水10ml溶解，用正丁醇萃取2次，每次10ml，合并萃取液，蒸干，加甲醇5ml溶解，上中性氧化铝柱(100—200目，2.0 g，直径:15mm)，用甲醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液;另取岩白菜素对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录? B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以乙 氯仿—甲醇—甲酸—水(5:3:2:0.5:0.5)为展开剂，展开，晾干，喷酸乙酯— 以新制的1%三氯化铁—1%铁氰化钾(1:1)混合溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。 (7)取本品5粒，取内容物，加甲醇30ml ，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml溶解，用水饱和的正丁醇萃取2次，每次10ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次10ml，再用水洗涤3次，每次10ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解作为供试品溶液。另取人参皂苷 Rg1 、 Rb1 及三七皂苷R1 对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg 的混合溶液 ，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录 ? B)试验，吸取对照品溶液10μl 供试品溶液5μl ，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以乙酸乙酯—氯仿—甲醇—甲酸—水(5:2.5:2.5:0.5:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇(1?10ml)溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】 应符合胶囊剂项下有关的各项规定 (中国药典2000年版一部附录?L)。 【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(中国药典2000年版一部附录XA)试验，以乙醇为溶媒，不得低于20%。 【含量测定】照高效色谱法(中国药典2000年版一部附录附录?D)测定。 色谱条件与系统适应性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈—水(21:79)为流动相;检测波长203nm。理论板数按人参皂苷Rg峰计算不低于5000。 1 对照品溶液制备:精密称取人参皂苷Rg对照品5mg，置25ml量瓶中，加流动1 相溶解，并稀释至刻度，摇匀，即可(每1ml 含人参皂苷Rg0.20 mg )。 1 供试品溶液制备:取本品10粒，精密称定，精密称取内容物适量(约相当于5粒重量)，精密加入甲醇50ml，称定重量，回流1小时，称定重量，过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液25ml ，蒸干，加水20ml溶解转移至D大孔吸附树脂柱(内101 径1.5cm ，长12cm )，先用2% 氢氧化钠溶液100ml 洗后，用水洗至中性，再用30%乙醇80ml 洗后，用80%乙醇100ml 洗脱，收集该洗脱液，蒸干，用流动相溶解定容至10ml，精密量取该液5ml ，加流动相稀释至10ml，用微孔滤膜(0.45μm)过滤，即可。 测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品含人参皂苷Rg(CHO)，每粒不得少于1.5mg 。 1247214 【功能与主治】 活血散瘀，消肿止痛。用于跌打挫伤，筋骨瘀血肿痛，亦可用于骨折的辅助治疗。 【用法与用量】 口服，一次4,5粒，一日3次。 【规格】每粒装0.3g 【注意】 孕妇忌服。 【贮藏】 密封。 二、起草说明 1.被申请注册药品质量标准 2.主要检验仪器设备 TG328A型分析天平 (上海天平仪器厂) 2XC光学显微镜 (上海光学仪器厂) YJ-1450A医用净化工作台 (吴江市净化设备厂) 280型手提式压力蒸汽消毒器 (上海医疗器械工业集团公司) YX- LRH-150B生化培养箱 (广东省医疗器械厂) UV-8型三用紫外仪 (无锡科达仪器厂) HG303-3型恒温箱 (南京实验仪器厂) CQX-06超声源机(33KC) (上海超声源仪器厂) 500ml水分测定仪 (北京玻璃仪器厂) Spectra SERIES P100型高效液相色谱仪。 Spectra SERIES UV100型紫外分光检测器。 WFZ—800D型紫外分光光度计。 3 人参皂苷Rg1对照品(中国药品生物制品鉴定所批号 110703-200322含量测定用) 乙腈(色谱纯)其它试剂均为分析纯 供试样品(本厂制备) 3.品名、汉语拼音、成分:完全同原部颁标准，保持原文，不做修订。 4.制法:原标准工艺未明确标准处方制成总量，由于标准工艺中除落新妇提取外，其余药材均为原粉入药，标准处方明确了各味药材剂量及落新妇提取物的剂量， 同时标准有明确了愈伤灵胶囊规格为每粒重0.3g，为此经计算可得标准处方制成总量为2408粒。 各味药材总剂量为672g，落新妇提取物的剂量为50.4g。 (672g+50.4g)?0.3g=2408粒 4.性状:按三批样品的实际性状特征(色、形、气、味等)进行描述。 三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)性状均为本品为胶囊剂，内容物显棕色至棕褐色;气香，味苦、微辛、凉。 证明试制药品的性状检查符合愈伤灵胶囊已有国家药品标准。 5.鉴别 1)本方除冰片、落新妇提取物外，其余均为打粉入药。取三批供试品(批号:愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)置显微镜下观察，均可见如下易检出特征:花粉粒类圆形、椭圆形或橄榄形，直径约60μm，具3个萌发孔，外壁有齿状突起，长管道状分泌细胞常位于导管旁，直径约至66μm，含黄棕色至红棕色分泌物。(红花)。韧皮薄壁细胞纺锤形，壁略厚，表面有极微细的斜向交错纹理，有时可见菲薄的横隔(当归)。树脂道碎片含黄色分泌物。草酸钙簇晶直径15,50μm，存在于皱缩的薄壁细胞中，常数个排列成行(续断)。体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，可见刚毛(土鳖虫)(见附图1)。 图1:显微鉴别图 1.花粉粒和分泌细胞 2.韧皮薄壁细胞 3.草酸钙簇晶 4.体壁碎片 证明试制药品的显微鉴别符合愈伤灵胶囊已有国家药品标准。 (2)为的鉴别。冰片具有升华性，升华后呈不定形的无色片状结晶，利用此性质鉴别。该反应其它药味无干扰，维持原标准。 代表药材:冰片 三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)经鉴别，均呈阳性反应。 证明试制药品的鉴别(2)反应符合愈伤灵胶囊已有国家药品标准。 (3)为处方中内酯类成分的显色反应。处方中落新妇提取物中含有岩白菜素等内酯类成分，该成分在碱性条件下，加热水解生成酚性物质，与0.9%4-氨基安替比林溶液和铁氰化钾试液各2滴，即显橘红色至深红色。该反应灵敏，维持原标准。 代表药材:落新妇提取物 三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)经鉴别，均呈阳性反应。 证明试制药品的鉴别(3)反应符合愈伤灵胶囊已有国家药品标准。 +3(4)为自然铜的显色反应。自然铜中主要成分为二硫化铁(FeS)，利用Fe2 --3可与SCN反应生成[Fe(SCN)6]，称深红色溶液的性质进行鉴别;该反应其它药味无干扰。故维持原标准。 代表药材:自然铜 三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)经鉴别，均呈阳性反应。 证明试制药品的鉴别(4)反应符合愈伤灵胶囊已有国家药品标准。 (5)为当归的薄层色谱鉴别。 原理:当归中含挥发油约0.3%,油中主含具特殊香气的正丁烯夫内酯(n-butylidenephthalide)另含邻羧基苯正戊酮(n-vakerophenone-o- carboxylic acid)、?2，4-二氢邻苯二甲酸酐(?2，4-dihydrophthalic anhydride)和几种倍半萜烯类化合物。该类成分易溶于乙醚，采用(2)中供试品溶液，简化了操作，正丁烯夫内酯在紫外灯下显示强烈的荧光，利用此性质检识。 供试品溶液的制备:取本品10ml，加石油醚(60,90?)振摇提取2次，每次15ml，合并石油醚液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，即可。 对照药材溶液的制备:取当归对照药材1g，加石油醚(60,90?)20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，即可。 空白对照液制备:按照处方和工艺制备不含当归的样品，取该样品，按供试品溶液制备法制备。 色谱条件:吸附剂:硅胶G 展开剂:以正己烷—乙酸乙酯(9:1) 显色:置紫外光灯(365nm)下检视。 结果:三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)按上述方法鉴别。供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应位置呈相同的荧光色斑(照片1)。 结论:通过以上实验证明，选择以当归对照药材为对照，用薄层色谱法鉴别愈 伤灵胶囊具有专属性，是可行的。 (6)为落新妇提取物的薄层色谱鉴别。 [1] 原理:落新妇中主含有岩白菜素。岩白菜素易溶于水、乙醇和甲醇中，其结构中含有酚羟基，但不具备与铝离子形成络和物的条件，根据上述性质，采用甲醇 提取，经过中性氧化铝柱处理，除去了大量杂质的干扰，使色谱更加清晰易辩。利用酚性物质易与三氯化铁—铁氰化钾溶液放映显兰色的性质检识。 供试品溶液的制备:同正文方法。 对照品溶液的制备:取岩白菜素对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，即可。 阴性对照液的制备:按照处方和工艺制备不含落新妇提取物的样品，取该样品按照供试品溶液制备法制备。 色谱条件:吸附剂 硅胶G 展开剂 乙酸乙酯—氯仿—甲醇—甲酸—水(5:3:2:0.5:0.5) 显色 喷以新制的1%三氯化铁—1%铁氰化钾(1:1)混合溶液。 结果:三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)按上述方法鉴别。供试品色谱中，在与岩白菜素对照品色谱相应位置呈相同的色斑(照片2)。 结论:通过以上实验证明，选择以岩白菜素对照品为对照，用薄层色谱法鉴别愈伤灵胶囊具有专属性，是可行的。 (7)为三七的薄层色谱鉴别。 原理:三七主含有人参皂甙(ginsenosides)Rb1、 Rd、Re、Rg1、Rg2、Rh,20-O-葡萄糖人参皂甙Rf ,三七皂甙(notoginsenoside)R1。皂苷易溶于水、乙醇和甲醇中，采用甲醇提取，用正丁醇萃取纯化，用氨试液洗涤再除去酚酸性杂质干扰，使色谱更加清晰易辩。利用皂苷类物质易与硫酸溶液显色的性质检识。 供试品溶液的制备:同正文方法。 对照品溶液的制备:取人参皂甙Rb1、Rg1和三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每lml含各含1mg的溶液，即可。 阴性对照液的制备:按照处方和工艺制备不含三七的样品，取该样品按照供试品溶液制备法制备。 色谱条件:吸附剂 硅胶G 展开剂 乙酸乙酯—氯仿—甲醇—甲酸—水(5:2.5:2.5:0.5:0.5) 喷以10%硫酸乙醇溶液，105?加热至色斑清晰。 显色 结果:三批供试品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03)按上述方法鉴别。供试品色谱中，在与人参皂甙Rb1、Rg1和三七皂苷R1对照品色谱相应位置呈相同的色斑(照片3)。 结论:通过以上实验证明，选择以人参皂甙Rb1、Rg1和三七皂苷R1对照品材 为对照，用薄层色谱法鉴别愈伤灵胶囊具有专属性，是可行的。 6.检查: ? 水分: 按《中国药典》2000年版一部附录 ? H 水分测定法检测，应不得 过9.0%,三批供试品检测结果: 愈伤灵01 4.9% 愈伤灵02 4.6% 愈伤灵03 4.7% 证明试制药品的水分检查符合胃炎康胶囊已有国家药品标准。 ? 装量差异: 按《中国药典》2000年版一部附录I L装量差异检查法检测，应 在0.3g?10%以内，三批供试品检测结果: 愈伤灵01 0.3123 0.3110 0.3121 0.3089 0.3103 0.3086 0.3098 0.3130 0.3144 0.3160 愈伤灵02 0.3032 0.3016 0.3171 0.3119 0.3072 60 0.3150 0.3164 0.3114 0.3052 0.31 愈伤灵03 0.3133 0.3090 0.3220 0.3119 0.3192 0.3186 0.3093 0.3202 0.3112 0.3147 证明试制药品的装量差异检查符合胃炎康胶囊已有国家药品标准。 ? 崩解时限:按《中国药典》2000年版一部附录XII A崩解时限检查法检测， 应在30分钟内全部崩解，三批供试品检测结果: 愈伤灵01 18分钟 愈伤灵02 17分钟 愈伤灵03 20分钟 证明试制药品的崩解时限检查符合胃炎康胶囊已有国家药品标准。 ? 微生物限度检查:按《中国药典》2000年版一部附录XIII C微生物限度检 查法测定，细菌数不得超过10000个/g，霉菌数不得超过100个/g;不得检出大肠 杆菌和活螨。三批供试品检测结果: 愈伤灵01 细菌数 360个/g 霉菌数 <10个/g 未检出大肠杆菌和活螨 愈伤灵02 细菌数 260个/g 霉菌数 <10个/g 未检出大肠杆菌和活螨 愈伤灵03 细菌数 220个/g 霉菌数 <10个/g 未检出大肠杆菌和活螨 证明试制药品的微生物限度检查符合胃炎康胶囊已有国家药品标准。 7、重金属、砷盐检查 7.1 重金属:重金属 依据中国药典2000年版一部附录 IX E第二法试验， 对愈伤灵胶囊进行了重金属检查。精密量取样品1.0ml，铅标准液1.0ml(10μg/ml)， 照(中国药典2000年版一部附录 IX E第二法)试验，结果见下表1。 表1:重金属检查结果 批号 取样量(g) 比色结果 重金属含量 (ppm) 1.0122 愈伤灵01 浅于对照管 ,10 1.0018 愈伤灵02 浅于对照管 ,10 1.0206 愈伤灵03 浅于对照管 ,10 1.0017 愈伤灵04 浅于对照管 ,10 1.0049 愈伤灵05 浅于对照管 ,10 1.0068 愈伤灵06 浅于对照管 ,10 1.0127 愈伤灵07 浅于对照管 ,10 1.0085 愈伤灵08 浅于对照管 ,10 1.0079 愈伤灵09 浅于对照管 ,10 1.0134 愈伤灵10 浅于对照管 ,10 十批样品愈伤灵胶囊样品溶液重金属含量均未超过10ppm，故未列入正文。 7.2 砷盐 依据中国药典2000年版一部附录IX F砷盐检查法及有关文献方 法，对本品中砷盐进行了分析。 7.2.1仪器与试药 仪器装置 按中国药典2000年版一部附录IX F规定。 盐酸、碘化钾为分析纯，锌粒为无砷锌粒。 醋酸铅棉花、酸性氯化亚锡溶液、溴化汞试纸按中国药典规定配制。 7.2.2方法与结果 精密量取十批愈伤灵胶囊 (批号为愈伤灵01,愈伤灵10) 样品各1.0ml，加入1g氧化钙细粉，搅匀，加少量水，水浴蒸干，再于上面覆盖1g氧化钙细粉，小火炽灼至完全炭化，于500?炽灼至完全灰化，取出，放冷，加水5ml润湿灰分后，加盐酸5ml，将溶液移入验砷瓶中。取与灰化样品同样量的氧化钙，加入砷标准溶液(1μg/ml)2.0ml，同法制备标准对照溶液。照(中国药典2000年版一部附录 IX F第一法)试验，结果见表2 表2:砷盐检查结果 批号 取样量(g) 砷斑颜色 砷含量(ppm) 1.0154 愈伤灵01 浅于对照品 ,2 1.0107 愈伤灵02 浅于对照品 ,2 1.0205 愈伤灵03 浅于对照品 ,2 1.0006 愈伤灵04 浅于对照品 ,2 1.0128 愈伤灵05 浅于对照品 ,2 1.0147 愈伤灵06 浅于对照品 ,2 1.0058 愈伤灵07 浅于对照品 ,2 1.0067 愈伤灵08 浅于对照品 ,2 1.0059 愈伤灵09 浅于对照品 ,2 1.0108 愈伤灵10 浅于对照品 ,2 十批供试品溶液生成的砷斑远比标准砷斑颜色浅，即样品中含砷量不超过百万分之二，故未列入标准正文。 8、浸出物:照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(中国药典2000年版一部附录? A) 测定，用乙醇作溶剂。测定结果见表3 表3:浸出物测定结果(n=2) 批号 浸出物(%) RSD(%) 愈伤灵01 24.97 0.27 愈伤灵02 24.36 0.58 愈伤灵03 26.65 0.19 愈伤灵04 26.25 0.32 愈伤灵05 21.83 0.43 愈伤灵06 26.58 0.08 愈伤灵07 23.14 0.42 愈伤灵08 20.20 0.12 愈伤灵09 24.69 0.32 愈伤灵10 22.87 0.47 测定结果表明十批样品浸出物均不低于20%，故暂定本品浸出物含量限度为:不少于20%。 9.含量测定 本品由9味中药组成，原标准未建立含量测定项，为了提高标准的约束力，本次修订增加了用高效液相色谱法测定三七中人参皂苷Rg1的含量方法，经对试制样品的测定，该方法稳定可靠，方法准确，重复性好。 9.1 试验溶液的制备 9.1.1 对照品溶液的制备:精密称取人参皂Rg10.65mg，置25ml量瓶中，加流1 动相溶解，并稀释至刻度，摇匀，即可。(每1ml含人参皂苷Rg0.426mg)。 1 9.1.2.样品溶液制备:取本品10粒，精密称定，精密称取内容物适量(约相当于5粒重量)，精密加入甲醇50ml，称定重量，回流1小时，称定重量，过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液25ml ，蒸干，加水20ml溶解转移至D大孔吸附树脂101柱(内经1.5cm ，长12cm )，先用2% 氢氧化钠溶液100ml 洗后，用水洗至中性，再用30%乙醇80ml 洗后，用80%乙醇100ml 洗脱，收集该洗脱液，蒸干，用流动相溶解定容至10ml，精密量取该液5ml ，加流动相稀释至10ml，用0.45μm 微孔滤膜过滤，即可。 9.1.3 阴性对照液的制备:按处方和工艺制备不含三七的样品，按样品制备法 制备。 9.2色谱条件:色谱柱:Hypersil BDS C(200×4.6mm)5μm;流动相:乙腈18 —水(21:79)，检测波长:203nm;流速:1.0ml/min;灵敏度:0.1AUFS;柱温:室温。本条件是根据《中国药典》2000年版一部“人参”项下[含量测定]项建立，经试验，流动相比例(30:70)，人参皂苷Rg不能达到完全分离，经调整至(21:1 79)，分离效果好，人参皂Rg可达到完全分离，理论塔板数按人参皂苷Rg峰计算11 为8695。为了考察干扰组分的干扰情况，分别吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照液各20μl，注入色谱仪。计录色谱图，结果供试品色谱中，在与对照品色谱相同保留时间有对应的峰，阴性对照液无对应峰。用流动相溶解人参皂苷Rg1制成适当浓度的溶液，在波长190-350nm测定吸收光谱，结果最大吸收为203nm，光谱见图1;对照品、供试品和阴性对照色谱见图2。 A B C 图2:对照品、供试品和阴性对照色谱 A(对照品 B。供试品 C。阴性对照 线性考察:精密量取对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置5ml量9.3 瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述系列溶液各20μl，注入液相色谱仪，峰面积，以进样量X与峰面积Y回归，的回归方程为: Y = 2829634X + 12375 r = 0.9999 表4线性试验结果 X(μg) 1.704 3.408 5.112 6.816 8.520 Y 4839839 9658513 14457188 19308418 24123371 进样量在1.704—8.52μg范围，线性良好。 9.4 精密度考察:取浓度为0.213mg /ml对照品溶液。连续进样5次，记录人参皂苷Rg1峰面积，计算相对标准偏差。结果见表5 表5:精密度试验结果 序号 峰面积 RSD(%) 1 11930990 2 12116670 3 12202766 0.91 4 12035823 5 12169455 9.5 稳定性试验;取批号为愈伤灵01的样品溶液，每间隔2h进样一次，共5次，记录峰面积，计算相对标准偏差RSD，结果见表6。 表6:稳定性试验结果 时间(h) 峰面积 RSD(%) 0 17080235 2 17130565 4 16955635 0.97 6 17315684 8 16897746 9.6 提取完全性考察:按样品溶液制备法，称取样品粉末5份，分别回流40，50 ，60，70，80min.按正文拟订方法测定人参皂苷Rg的含量，结果回流60min后，1 测定结果变化不大，说明回流60min时，人参皂苷Rg已完全溶解。为了考察其它制1 备过程的损失情况，对30%乙醇洗脱液的最后20ml流出液、80%乙醇洗脱后，再用20ml洗脱液，分别蒸干，加甲醇1ml 溶解，按鉴别(7)法色谱条件进行薄层试验，结果均未检出人参皂苷Rg的明显色斑。说明处理过程损失较少(表7)。 1 表7:提取时间考察结果 时间(min) 人参皂苷Rg(mg/粒) 1 40 2.38 50 2.41 60 2.42 70 2.42 80 2.41 9.7 重复性试验:取批号为愈伤灵01的样品，按拟订方法测定5次，结果见表8。 表8:重复性试验结果 编号 人参皂苷Rg(mg/粒) 平均含量(mg/粒) RSD(%) 1 1 2.43 2 2.45 3 2.52 2.43 0.75 4 2.40 5 2.43 9.8 回收率试验:取已知含量的样品，取内容物混匀，精密称取适量(相当于2粒重量)，共5份，分别加入一定量的人参皂苷Rg，按供试品溶液制备法制备，1 按拟订方法测定人参皂苷Rg含量，计算回收率，结果见表9。 1 表9:回收率试验结果 原含有量加入量测得量平均回收回收率(%) RSD(%) (mg) (mg) (mg) 率(%) 4.682 3.586 8.254 99.61 4.755 3.497 8.146 96.97 4.364 4.122 8.432 98.69 97.87 1.48 4.876 3.245 7.989 95.93 4.835 3.652 8.420 98.17 9.9 样品测定:按正文拟订方法测定5批样品中人参皂苷Rg的含量，结果51批含量均在1.5mg/粒以上;由于本品制法，是将三七以原粉形式加入，根居《中国药典》2000年板一部“三七”项下，对其中人参皂苷的含量要求，三七中人参皂苷Re 和人参皂苷Rg总和不低于3.8%，按此计算本品含人参皂苷Re和人参皂苷Rg1 1 总量为2.85mg/粒，其中Rg按50%计算，应为1.425mg /粒，测定结果与实际基本1 相符，故暂定本品含人参皂苷Rg，每粒不得少于1.5mg 。样品测定结果见表10。 1 表10:样品测定结果(n=2) 批号 人参皂苷Rg(mg /粒) RSD(%) 1 愈伤灵01 2.43 0.75 愈伤灵02 1.68 1.23 愈伤灵03 1.54 0.46 愈伤灵04 2.17 0.38 愈伤灵05 1.98 0.74 10.功能与主治:活血散瘀，消肿止痛。用于跌打挫伤，筋骨瘀血肿痛，亦可用于骨折的辅助治疗。 11.用法与用量:口服，因此4,5粒，一日3次。 12.规格:每粒装0.3g 13.注意:孕妇忌服。 14.贮藏: 密封。 参考文献 [1]. 冀春如等，中药化学实验技术与实验，河南科学技术出版社，1986，第一版，336 [2]. 中国药典，一部，2000 照片1 照片2 1.当归对照药材 1.岩白菜素对照品 -4为样品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03) 2-4为样品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤2 灵03) 5.缺当归的阴性对照 5.缺落新妇提取物的阴性对照 照片3 1人参皂甙Rb1、Rg1和三七皂苷R1对照品 2-4为样品(愈伤灵01、愈伤灵02、愈伤灵03) 5.缺山药的阴性对照 中药、天然药物 第二部分 药学研究资料2-16 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:检验报告书 负责人: 试验者: 试验起止日期:2004.10.21-2004.10.26 原始资料的保存地点 :++++++++ 联系人: 电 话: 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ ++++++++ 成品检验报告书 报告书编号(2004) 001号 品 名 愈伤灵胶囊 包 装 铝塑板 批 号 愈伤灵1 样品数量 100粒 规 格 每粒装0.3g 送检部门 产品开发部 检验项目 全检 送检日期 2004年10月21日 批 量 数 22980粒 报告日期 2004年10月26日 检验依据 注册质量标准草案 检验 标准规定 检验结果 项目 应为胶囊剂，内容物显棕色至棕褐色;为胶囊剂，内容物棕褐色;气性状 气香，味苦、微辛、凉。香，味苦、微辛、凉。 (1)应符合规定 符合规定 鉴别 (2)应呈正反应 呈正反应 (3) 应呈正反应 呈正反应 (4)应呈正反应 呈正反应 (5)应检出当归 检出当归 (6)应检出岩白菜素 检出岩白菜素 (7)应检出人参皂苷 Rg 、 Rb 及三七 、 Rb 及三七皂检出人参皂苷 Rg1111 皂苷R苷R11 水分 不得过9.0% 5.9% 检查 崩解时限 不得过30分钟 18分钟 装量差异 0.3g?10% 符合规定 微生物限度 应符合规定 符合规定 细菌数 不得过10000个/g 10个/g 霉菌数 不得过100个/g <10个/g 大肠杆菌 不得检出 未检出 活螨 不得检出 未检出 醇溶性 按干燥品计,不得少于20.0% 24.9% 浸出物 含量 每粒含三七以人参皂苷Rg1(CHO)2412141.71 mg 测定 计,不得少于1.5mg。 结论:本品按注册质量标准草案检验，结果符合规定。 检验人 复核人 负责人 ++++++++ 成品检验报告书 报告书编号(2004) 002号 品 名 愈伤灵胶囊 包 装 铝塑板 批 号 愈伤灵2 样品数量 100粒 规 格 每粒装0.3g 送检部门 产品开发部 检验项目 全检 送检日期 2004年10月21日 批 量 数 22860粒 报告日期 2004年10月26日 检验依据 注册质量标准草案 检验 标准规定 检验结果 项目 应为胶囊剂，内容物显棕色至棕褐色;为胶囊剂，内容物显棕色;气性状 气香，味苦、微辛、凉。香，味苦、微辛、凉。 (1)应符合规定 符合规定 (2)应呈正反应 呈正反应 (3) 应呈正反应 呈正反应 (4)应呈正反应 呈正反应 鉴别 (5)应检出当归 检出当归 (6)应检出岩白菜素 检出岩白菜素 (7)应检出人参皂苷 Rg 、 Rb 及三七 、 Rb 及三七皂检出人参皂苷 Rg1111 皂苷R苷R11检查 水分 不得过9.0% 5.5% 崩解时限 不得过30分钟 17分钟 装量差异 0.3g?10% 符合规定 微生物限度 应符合规定 符合规定 细菌数 不得过10000个/g 20个/g 霉菌数 不得过100个/g <10个/g 大肠杆菌 不得检出 未检出 活螨 不得检出 未检出 醇溶性 按干燥品计,不得少于20.0% 25.1% 浸出物 每粒含三七以人参皂苷Rg1(CHO)计,241214含量 不得少于1.72 mg 测定 1.5mg。 结论:本品按注册质量标准草案检验，结果符合规定。 检验人 复核人 负责人 ++++++++ 成品检验报告书 报告书编号(2004) 003号 品 名 愈伤灵胶囊 包 装 铝塑板 批 号 愈伤灵3 样品数量 100粒 规 格 每粒装0.3g 送检部门 产品开发部 检验项目 全检 送检日期 2004年10月21日 批 量 数 23096粒 报告日期 2004年10月26日 检验依据 注册质量标准草案 检验 标准规定 检验结果 项目 应为胶囊剂，内容物显棕色至棕褐色;为胶囊剂，内容物显棕色;气性状 气香，味苦、微辛、凉。香，味苦、微辛、凉。 (1)应符合规定 符合规定 (2)应呈正反应 呈正反应 (3) 应呈正反应 呈正反应 (4)应呈正反应 呈正反应 鉴别 (5)应检出当归 检出当归 (6)应检出岩白菜素 检出岩白菜素 (7)应检出人参皂苷 Rg 、 Rb 及三七 、 Rb 及三七皂检出人参皂苷 Rg1111 皂苷R苷R11 水分 不得过9.0% 5.8% 崩解时限 不得过30分钟 20分钟 检查 装量差异 0.3g?10% 符合规定 微生物限度 应符合规定 符合规定 细菌数 不得过10000个/g 20个/g 霉菌数 不得过100个/g <10个/g 大肠杆菌 不得检出 未检出 活螨 不得检出 未检出 醇溶性 按干燥品计,不得少于20.0% 24.1% 浸出物 每粒含三七以人参皂苷Rg1(CHO)计,241214含量 1.69 mg 不得少于测定 1.5mg。 结论:本品按注册质量标准草案检验，结果符合规定。 检验人 复核人 负责人 中药、天然药物 第二部分 药学研究资料2-17 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 项目名称:稳定性研究试验资料 负责人: 试验者: 试验起止日期:2004.3.21-2004.9.21 原始资料的保存地点 :++++++++ 联系人: 电 话: 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ 一、稳定性考察方法 1.考察方法:根据国家药品监督管理局《新药审批办法》以及《中药新药研究 的技术要求》，对三批供试品(++++01、++++02、++++03)进行了初步稳定性试验。 (1)三个月加速稳定性试验 将三批供试品(++++01、++++02、++++03)每批300盒愈伤灵胶囊在上市包装条件下，放在盛置饱和氯化钠溶液(其在37?相对湿度为75%，在40?时相对湿度为74.7%)的干燥器中，再将干燥器置38?恒温箱中，即37-40?，相对湿度75%保存，每月考核一次，连续三个月。 ?六个月常温稳定性试验 将三批供试品(++++01、++++02、++++03)每批300盒愈伤灵胶囊在上市用包装条件下，在常温保存，以开始考察结果为零月，以后每月考察一次，连续六个月。 2(考核项目:性状、鉴别、水分、装量差异、崩解时限、微生物限度、含量测定、浸出物、包装情况等。 3(使用的仪器设备 WD-A 药物稳定性实验仪 (天津药典标准仪器厂) HG303-3型恒温箱 (南京实验仪器厂) CQX-06超声源机(33KC) (上海超声源仪器厂) UV-8型三用紫外仪 (无锡科达仪器厂) 500ml水分测定仪 (北京玻璃仪器厂) TG328A型分析天平 (上海天平仪器厂) YJ-1450A医用净化工作台 (吴江市净化设备厂) LRH-150B生化培养箱 (广东省医疗器械厂) 高效液相色谱仪 (大连依利特科学仪器有限公司) 二、考察结果见表1、表2、表3、表4所示 三、结论 本品三批按三个月恒温加速试验考察及六个月常温考察，其外观、性状、微生物限度及内在质量均未发生变化，各项指标均符合规定。证明本质量标准草案可用于愈伤灵胶囊的质量控制,仿制的愈伤灵胶囊是比较稳定的，故暂定其有效期为2年。 表1:愈伤灵胶囊三个月加速稳定性试验结果 试验日期2004年3月21日,2004年6月21日 批 号 ++++01 ++++02 ++++03 结 放置时间 0月 1月 2月 3月 0月 1月 2月 3月 0月 1月 2月 3月 论 项目 结果 3月21日4 月21 日5月21 日6月21 日3月21日4 月21 日5月21 日6月21 日3月21日4 月21 日5月21 日6月21 日 符为胶囊剂，内容物为胶囊剂，内容物为胶囊剂，内容物显合显棕褐色;气香，味苦、显棕褐色;气香，味苦、棕色;气香，味苦、微性 状 规微辛、凉。 微辛、凉。 辛、凉。 定 符合规定符合规定符合规定(1) (2) 呈正反应 呈正反应 呈正反应 (3) 呈正反应 呈正反应 呈正反应 符鉴 (4) 呈正反应 呈正反应 呈正反应 合 规检出当归检出当归检出当归(5) 别 定 检出岩白菜素检出岩白菜素检出岩白菜素(6) 检出人参皂苷 Rg 、 检出人参皂苷 Rg 、 检出人参皂苷 Rg 、 111(7) Rb 及三七皂苷RRb 及三七皂苷RRb 及三七皂苷R111111 水分5.0 5.2 5.0 5.6 4.8 5.1 4.8 5.4 4.7 4.9 5.6 5.3 符(%) 检合崩解时规查 限17 18 19 17 19 20 18 19 19 18 21 20 定 (min) 细菌数 350 390 410 430 270 260 290 270 200 210 240 245 微(个/g) 霉菌数 生符<10 <10 <10 10 <10 10 10 <10 <10 <10 10 10 (个/g) 合物规未检未检未检未检未检未检未检未检未检未检未检未检大肠杆菌 定 出 出 出 出 出 出 出 出 出 出 出 出 限 未检未检未检未检未检未检未检未检未检未检未检未检活螨 度 出 出 出 出 出 出 出 出 出 出 出 出 人参皂 苷Rg1 2.42 2.41 2.42 2.38 1.66 1.63 1.65 1.60 1.57 1.56 1.52 1.53 含符1.5 mg/粒 量合测规25.325.124.626.6浸出物定 定 25.06 25.31 25.53 24.72 24.81 26.78 26.43 26.50 (%) 4 9 4 1 符 合良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 包装情况 规 定 表2:愈伤灵胶囊六个月常温稳定性试验结果 试验日期 2004年3月21日,2004年9月21日 批 号 ++++01 放置时间 结 0月 1月 2月 3月 4月 5月 6月 论 3月21日 4月21日 5月21日 6月21日 7月21日 8月21日 9月21日 项目 结果 符合性 状 为胶囊剂，内容物显棕褐色;气香，味苦、微辛、凉。 规定 符合规定(1) 呈正反应 (2) 符 呈正反应 (3) 合 鉴 呈正反应 (4) 规 别 定 检出当归(5) 检出岩白菜素(6) 检出人参皂苷 Rg 、 Rb 及三七皂苷R(7) 111 5.0 4.8 4.8 5.1 5.0 5.0 5.3 水分(%) 检符合崩解时限查 规定 17 18 19 20 21 20 18 (min) 细菌数 350 380 350 390 420 450 430 (个/克) 微符 霉菌数 ,10 10 10 ,10 10 10 15 生合 (个/克) 物规 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 限大肠杆菌 定 度 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 活螨 人参皂苷含Rg1 2.42 2.37 2.41 2.43 2.39 2.37 2.35 量符合 1.5 mg/粒 测规定 浸出物(%) 25.34 24.53 24.61 24.06 23.84 23.81 24.04 定 符合 包装情况 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 规定 表3:愈伤灵胶囊六个月常温稳定性试验结果 试验日期 2004年3月21日,2004年9月21日 批 号 ++++02 放置时间 结 0月 1月 2月 3月 4月 5月 6月 3月21日 4月21日 5月21日 6月21日 7月21日 8月21日论 9月21日 项目 结果 符合性 状 为胶囊剂，内容物显棕褐色;气香，味苦、微辛、凉。 规定 符合规定(1) 呈正反应 (2) 鉴 符 呈正反应 (3) 合 规 呈正反应 (4) 定 检出当归(5) 别 检出岩白菜素(6) 检出人参皂苷 Rg 、 Rb 及三七皂苷R(7) 111 水分(%) 4.8 4.7 4.5 4.9 5.1 5.0 5.1 检符合崩解时限查 19 19 18 21 23 24 21 规定 (min) 细菌数 270 290 310 300 350 340 370 (个/克) 微符 霉菌数 ,10 ,10 10 10 10 15 20 生合 (个/克) 物规 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 限大肠杆菌 定 度 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 活螨 人参皂苷含Rg1 1.66 1.64 1.59 1.63 1.64 1.62 1.67 量符合 1.5 mg/粒 测规定 浸出物(%) 25.53 23.94 24.06 24.19 24.06 24.39 23.85 定 符合 包装情况 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 规定 表4:愈伤灵胶囊六个月常温稳定性试验结果 试验日期 2004年3月21日,2004年9月21日 批 号 ++++03 放置时间 结 0月 1月 2月 3月 4月 5月 6月 3月21日 4月21日 5月21日 6月21日 7月21日 8月21日论 9月21日 项目 结果 符合性 状 为胶囊剂，内容物显棕色;气香，味苦、微辛、凉。 规定 符合规定(1) 呈正反应 (2) 符 呈正反应 (3) 鉴 合 规 呈正反应 (4) 别 定 检出当归(5) 检出岩白菜素(6) 检出人参皂苷 Rg 、 Rb 及三七皂苷R(7) 111 水分(%) 4.7 4.9 4.6 5.2 5.1 5.3 4.9 符合检 崩解时限查 规定 19 19 17 19 23 22 24 (min) 细菌数 200 210 260 270 310 340 360 (个/克) 微符 霉菌数 ,10 10 10 10 ,10 10 10 生合 (个/克) 物规 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 限大肠杆菌 定 度 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 未检出 活螨 人参皂苷含Rg1 1.57 1.52 1.58 1.54 1.53 1.51 1.52 量符合 1.5 mg/粒 测规定 浸出物(%) 26.78 26.18 24.93 25.73 25.49 25.42 25.68 定 符合 包装情况 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好 规定 中药、天然药物 第二部分 药学研究资料2-18 注册分类:第11类 药品名称:愈伤灵胶囊 资料项目名称:直接接触药品的包装材料的 选择依据及质量标准 申报单位:++++++++ 申报时间:++++++++ 我公司对直接接触愈伤灵胶囊药品的包装材料选用药用聚氯乙烯硬片(PVC)、铝箔。 一、 选择依据 1.聚氯乙烯硬片性能依据国家标准《药用聚氯乙烯(PVC)硬片》YBB00212002，其拉伸强度,450 kgf/?，落球冲击破损率,40%，加热伸缩率为?7%，水蒸气透过 2量?2.5g/(m.24h)。具有良好的防潮性。无异味，安全性好。热封性能好，生产易自动化。包装产品易于贮存、运输和携带。 2.铝箔性能依据国家标准《药品包装用铝箔》GB12255-1990，其粘合层热封强度?5.88N/15mm，破裂强度?98kPa。不透气，具有良好的防潮性和遮光性能。无异味，安全性好。表面光洁，易于印刷信息。热封性能好。 3.我公司试生产愈伤灵胶囊三批(++++01、++++02、++++03)，每批采用药用聚氯乙烯硬片(PVC)、铝箔热塑包装，经三个月加速稳定性实验和六个月常温稳定性实验考察，产品质量无显著变化，包装外观良好。 二、质量标准 聚氯乙烯硬片质量标准执行国家标准《药用聚氯乙烯(PVC)硬片》1. YBB00212002。 2. 铝箔质量标准执行国家标准《药品包装用铝箔》YBB00152002。 附件 PVC、铝箔生产企业自检报告书