【doc】香砂六君浓缩丸中陈皮甙含量的高效液相色谱分析
香砂六君浓缩丸中陈皮甙含量的高效液相
色谱分析
第19卷第1期湖南师范大学自然科学l996年3月ActaSciNatUmvNorm}hn丑
nVoI_19No.1
M盯.1996
香砂六君浓缩丸中陈皮甙
含量的高效液相色谱分析
汤澍徐秉坤?
(湖南师范大学测试中心,长沙.410081)
2,/
摘要用三羟甲基胺基甲烷(磷酸调pH值至2.7)甲醇作流动相进行梯度洗脱.建立
丁香砂
六君浓缩丸中陈皮甙含量的反相高效}使相色谱分析
.本法分析速度快.重现
性好,陈皮甙的平
均回收率为97.O4.
善,至里互星鎏墼-!生堕堕塑垒堂分类号0656.28
HPLCAnalysisofHesperidininXiangshaliujunConcentratePill TangShuXuBing"
(ExperimentalCenter,HunanNormalUniversity,Changsha.410081) AbstractAnHPLCmethodfortheanalysisofhesperidininXlangahaliujun concentratepi【【waspresented.Elutedhygradientmodefrom70A(O.02too|/lTris—
H3PO',pH2.7)and3C}B(methano1)to3C}Aand70B,aquantitativeseparationof hesperldinwithothercomponentsinthepil1waaohtained.Theresultsdemonstratethatthis
analysismethodisquickandsimple,andtheaveragerecoveryofhesperidinis97.04.
KeywordsXia"gshaIiujunconcentratepill;hesperldin;HPLC 香砂六君浓缩丸是一种具有健脾开胃,行滞化气等功效的新药.它由陈皮,木香,砂
仙,当
归,茯苓,红姜等多味中药配制而成.其中有效成份陈皮甙的含量是该药质量的重要指标,它可
用紫外分光光度法…,薄层扫描法以及高效液相色谱法测定.其中,紫外分光光度法只
能测定含对陈皮甙不干扰组分的样品或单一的陈皮甙,薄层扫描法定量测定则需对斑点的深
度进行对比.精度差.而采用高效液相色谱法,尽管香砂六君浓缩丸经反复抽提后组成仍很复
杂,但经分离后能消除干扰,准确测定其陈皮甙的含量.
1实验部分
1.1仪器与试剂
岛津LC一6A高效液相色谱仪,SPD一6AV紫外可见光分光光度
器C—R3A色谱数据
?收稿日期r1995-O7—15
潮南师范大学自然科学第L9卷
处理机.色谱柱YWG—ODs(25cm×4mn2)
甲醇为色谱纯试剂,磷酸,三羟甲基胺基甲烷为分析纯,水为二次蒸馏水. 1.2色谱条件
在紫外检测波长286tim下,采用流动相A:0.02mol/i三羟甲基胺基甲烷水溶液,用磷酸
调pH至2.7,流动相B甲醇,控制流速为lmL/min,进行梯度洗脱. 1.3样品处理
将香砂六君浓缩丸粉碎成粉末,精确称取5g置于索氏提取器中,先用石油醚(bp:3O,
60?)提取2h将石油醚挥发至干,再用含0.1mol/iNaOH的5o乙醇溶液2oml回流提取2次
4h,然后过滤,最后用甲酰胺定容至100mi.
2结果与讨论
2.1色谱分离
用起始条件为7o三羟甲基胺
基甲烷一磷酸缓冲液(pH=2."和
30甲醇,终止条件为3O%三羟甲基
胺基甲烷一磷酸缓冲液和7O甲醇, 按图l虚线所示的梯度进行洗脱.由 图1可见陈皮甙和其它组份完全分 开,达到了基线分离.相同条件下.可
获得实际样品的分离图.我们曾试着 采用文献4,5中所报道的分离条件. 即磷酸溶液+甲醇体系.但由于样品
虽经处理仍很复杂,不能排除对陈皮 甙测定的干扰.实验中,我们在流动
相中加入三羟基胺基甲烷,发现可使 陈皮甙的保留时间拖后,从而改善了 与其它干扰物的分离.这是由于无机 盐能增加流动相的表面张力.我们用 此法还测定了片剂药物中的陈皮甙, 图谱也很理想【见图2),达到了基线 分离.
围1香O,-v,君浓缩丸样品色谱圈围2片荆药枷的色谱囤
(a为陈皮甙峰.虚线为洗脱梯度)(丑为陈皮甙嶂) 2.2陈皮甙峰面积与浓度的线性关系考查 按本文所述色谱条件分别进样对照样品溶液5,8,10,15.20~.1,测定峰面积.陈皮甙
在4.74
g,18.96g的回归方程为Y一6123.76+9279.00X,r一0.9979,陈皮甙进样量与峰面
积
呈很好的线性关系,因此可用外标法定量测定. 3.3精密度测定
在上述色谱条件下.对2个样品分别重复进样3次,得其陈皮甙的含量,精密度的计
算结果
见表1.它们的保留时间的变异系数达到0.8161,满足定性,定量分析要求.
第1期汤澍,镣秉坤:香砂六君浓缩丸中陈皮甙含量的高技液相色谱分析
表1精密度测定
2.4回收率实驻
准确量取一定量样品?再加入陈皮甙
物适量,在上述色谱条件下,进样20l,测其
回
收率.从表2可见回收率良好,可达97.04. 表2回嫂率测定
2.5不同溶剂的比较
陈皮甙属于黄酮类化合物,多含
酚羟基,显一定的酸性.可溶于碱性
溶液中.据此性质,采用碱醇作溶
剂,但实验发现其标准物的HPLC图
谱上,出现了两个色谱峰(见图3的a, b峰),可能是由于碱浓度过大,破坏
了黄酮母核,进一步实验表明选用甲
酰胺作溶剂,此现象消失(见图4),只
有a峰.我们还曾经根据陈皮甙易溶
于乙酸乙酯的性质,用乙酸乙酯作提
取剂和溶剂.但测得的陈皮甙的含量
明显低些,约为甲酰胺作溶剂的三分
之一,而且甲酰胺在低温下不凝固,
对样品测定无干扰,故甲酰胺是理想
的溶剂.
2.6样品的分析
处理好的样品在上述邑谱条件3
下进样201.用外标法定量得其陈皮
甙的含量1号:
碱醇作溶剂的标样色谱盈固4
(b,c为陈皮甙的两丹裂峰)
甲酰胺作溶剂的标样色谱圈
(a为雕皮甙的标准峰)
0?2178mg/ml一2号:0.3615mg/m1.从结果可知.样品中陈皮甙的含量较高.本法能准确测定
陈皮甙的含量,可以作为控制产品质量标准的方法,
湖南师范大学自然科学第lg眷
3结论
采用反相高效液相色谱,我们建立了香砂六君浓缩丸中陈皮甙的分析方法.根据此法我们
还测定了片荆中陈皮甙的含量.实验结果表明本法作为陈皮甙的分析方法操作简便,准确,适
用于药厂产品的质量控制.
参考文献
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