【doc】复方地西泮片中3种成分含量测定的改良研究

【doc】复方地西泮片中3种成分含量测定的改良研究 复方地西泮片中3种成分含量测定的改良研 究 9No9 的2种药物都呈碱性,因此,必须选择醣}生缓冲液. 实验结果还表明,不同的手性药物要求不同0U 的缓冲液,同时要求其浓度必须达到一定值.另外, 分离电压和温度对拆分效果也有一定的影响.本实 验通过手性拆分条件的选择,建立了该2种药物手 性分析的方法,为研究开发提供了可靠的分析手段. [作者il介]牛长群0964一),男,高级工程师,硕士学位, 现为河北医科大学博士研究生.研究方向:手性药物的药代 动力学及药赦学研究.新药研究开发中的分析方法的研究. fj',6, 2000年第9卷第9 联系电话:(0311)5051133—2083. [参考文献] 1]t2Z~II.罗国安毛细管电泳在手性分离中的应用及进展[J] 分析化学.1995,23(7)850—854+ 2]朱晓峰,林柄承毛细管电泳的手性拆分[J]色谱,1999,17 (2)l53一l57 03—29僖回:2000—06—30) (收稿:2000— 复方地西泮片中3种成分含量测定的改良研究 王杰',丁洁,冉晓静 (1山东省药品检验所,济雨250o12;2山东省医药工业研究所,济南250100) 【擒薹]目的:对复方地西泮片中3种成分的奇量测定进行改良研究.方法:地西泮 由系教倍率法改为HPLC 浩;咎维素仍用uV法,滓荆由正庚烷政寿硫酸乙醇;维生素B1由硅鸪酸沉淀法改 为uv法.结果:方法的平均加 样回收率(=5)分别为100.6%(地西辛).997%(各维素)与1007%(维生素B1);相对标 准偏差(RSD)舟别为 0.64%,1_06%与132%.结论:所拟方法比原方法快速,简便,准确,能有效地控制谈产 品的质量. [关?词】复方地西泮片;各维素:维生素t31;地西泮;奇量测定 [中田分类号]R9271l;R9714文献标识码]B[文章编号]1003—3734(2000)09—0615 —04 It-i2_ .niIjee)【tetr"m7inati.n.fc0-diaze.舢tablets WAN(;-Jie',DINGJiez,RANXiao-jitag (1InstituteforDrugControlShandongProvince,Jinan250012,China;2Institute ofPharmaceuticatIndustryofShandongProvince,jinan250100,China) 【Abe-act]Objective:Toimprovemethodfordeterminingcomponentsofco-diazepamtablets. Methods:DeterminationmethodfordiazepemandvitaminB】 werechangedfromcoefficientrateand silieotungsticacidprecipitationtoHPLCandUVrespectively.ThesolventforUVdeterminationofO— ryzanoIWaSchangedfromn— heptanetoamixtureofsulfuricacidandethanoIResults:Themeanrec_Jv— ery(=5)is100.6%fordiazepam:100.7%forvitaminBIand99.7%fororyzanolConclusion:A simpler,rllol~rapid,andaccuratemethodfordeterminationofeomponemsofco-diazepamwasobtained ino:xnparisonwiththeoriginaImethod. [Keyw0rds]co-diazepamtablets;oryzanol;vitaminB1;diazepam;assay 复方地西泮片(原名谷维安片)含谷维素,维生 紊B1与地西泮,为国家三类新药主要用于治疗各 类神经官能症,植物神经失调等症我们拟出了快 速,简便,准确的测定复方地西泮中3种成分含量的 方法,结果令人满意,如下. 与方法 l仪器与试药 岛津UV2201,UV3000紫外分光光度计;SP一 8800高效液相色谱仪,Spectra200型uv检测器, 4400积分仪;甲醇为优级纯,其他试剂均为分析纯 地西泮对照品(中国药品生物制品检定所),谷维素, 维生素B,安替比林均为已知含量的原料药.样品 为济宁安康制药厂委托送验样品. 2方法 2.1地西泮的含量与含量均匀度膏定曾采用系 一 615一 一一一囊蘩一习—一;篓匿—瓣一嚣 hit-,~eNewD啮Jounm【2000.Vol9】9 数倍率法进行测定,由于地西泮在样踮,{含量少 (125rag),比例小(分别为符维素的1/40与维生素 B.的1/10),测定误差较大,含量限度仅定为标示量 的85.0%,115.0%;我们试用HPLC法,以安替 比林为内标,使地西泮分离于其他物质后进行定量, 精度高,结果准确,含量测定限度提高为标示量的 90.0%,1l0.0%. 色谱柱:G8,5,tan,25~ma×0.46cm;流动相:甲醇一 水(75:25),用前用0.45?n滤膜滤过,抽臆并电磁 搅拌以除气;流速:0.85ml/mln;检测波K230nm; 衰减64;进样量51. 线性关系的考察:精密称取地西泮对照品约 125mg,置50ml量瓶中,用流动相溶解评稀释至 刻度,混匀,作为对照溶液;另取安替比林约0.2g, 精密称定,置200ml量瓶中,用流动相溶解井稀释至 刻度,混匀,作为内标溶液. 精密量取对照溶液2,4,6,8,10mt,分圳置25ml 最瓶中,各精密加人内标溶液3rnl,用流动褶稀释至 刻度,混匀.取各浓度分别4次注人液相色谱仪,以 对照品与内标的峰面积比为纵坐标,以对照品浓度为 横坐标,进行线性回归,得回归方程:Y=_]02943+ 002289X,r=0.9999,地西泮在0,l,f)57g范围 内线性关系良好. 含量均匀度测定:取本品1片,置25m1量瓶中, 精密加人内标溶液3ml与流动相适量,超声处理后 用流动相稀释至刻度,混匀,滤过,弃去初滤液,取续 滤液5l注人液相色谱仪,照以上方法道行色谱分 析,色谱罔见图1. 0482 H日(J 1维生索B1(227rnir1);2安替比林(内标,4l7mir一). 3地西泮(730n,in 图l复方地西绊片色阁 含量测定:取本品2O片,精密称定,研细,精密 称取细粉适量(约相当于地西泮1.25rag),置25mt 量瓶中,精密加入内标溶液3mt与流动丰H适量,超声 处理,以下照含量均匀度方法测定并计算 —— 616—— 翻 回收率试验:取上述已知含量的复方地西泮片 粉(批号940318)为基底,加入地西泮对照品适量, 照含量测定方法测定加样回收率. 2.2谷维素的含量测定曾以正庚烷为溶剂提取 后用紫外分光光度法测定含量.正庚烷溶剂膨胀系 数大,结果稳定性较差,而且价格较贵. 我们参照资料-,试用价廉的0.5%硫酸乙醇 溶液为溶剂,在200--400nm的波长范围内扫描,在 其最大吸收波长处(327nm),维生素B.无吸收,地 西泮虽有吸收,但由于量少悬殊,并不影响测定,见 图2,故选此波长作为测定波长. 用0.5%硫酸乙醇溶液制成含谷维素10, 20t~g/mt系列浓度的溶液,在327nm波长处测 定其吸收度,得回归方程:A=00287+00357C, r=0.9999,线性关系良好. 1备维索;2维生素BL3地西拌;4辅利 图2处土倒的符维索与其他药品及辅料的紫外吸收图 含量测定:精密称取地西泮项下的细粉适量(约 相当于谷维素35rag),置100mt量瓶中,加05%硫 酸己醇溶液适量,超声处理后,用05%硫酸乙醇溶 液稀释至刻度,混匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续 滤液2mt置50ml量瓶中,用05%硫酸乙醇溶液 稀释至刻度,混匀,在327nm波长处测定吸收度. 回收率试验:取上述已知含量的复方地西泮片 粉(批号94O3l8)为基底,加人谷维素适量,照含量 测定方法测定加样回收率. 2.3维生素B1的含量测定曾采用硅鹤酸沉碇法 进行测定,々属性高,结果可靠准确,但操作费时,繁 杂.如套用中国药典维生素片的测定方法_2一,地 西泮在盐酸溶液【1—10o0)中溶解,干扰测定.我 们利用它们在水中溶解度的差异(维生素B.易溶, 地西泮几乎不溶,谷维素不溶L2."一),先以水提取维 生素B一后,再以盐酸溶液稀释,照药典方法进行测 定,排除了干扰,其紫外吸收图见图3,结果准确,操 作方便. _一_蕊Illll誊_ Chir,~eNewDru鼬Joun~2000,V909 1维生紊马;2其他药品盟辅料 图3维生紊B与其他药品监辅料的紫讣啦收 含量测定:精密称取地西泮含量测定项下的细 粉适量(约相当于维生素Bl50rag),置lOOml量瓶 中,加水适量,振摇使维生素B.溶解.用水稀释至刻 度,混匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液2ml, 置另一100量瓶中,加盐酸溶液稀释至刻度.混 匀,在246TlTn的波长处钡i定吸收度. 回收率试验:取上述已知含量的复方地西泮片 粉(批号940318)为基底,加入维生素H;适量,照含 量钡i定方法测定加样回收率. 结果 1地西泮的含?,含量均匀度及回收率试验 见表1,表2,表3. 囊1地西泮的含量均匀度测定结果 批号标示量(%)R)r 940318l?8j)58 940319l020i)78 9403201025n34 2谷维蠢的含量测定及回收率试验 见表4及表5. 囊4答维蠹的含量测定结果【标示量 新药杂志20?年第9卷第9期 表5谷维蠹加样回收事的实噙结果 样品号样品含量(mg)加样品(T)测得量("回收辜(%) j2074l50035469922 2120215?36629892 32008t5_…34689886 42054t5帅36?10l30 5202215o03533l003U 均值20他j513tI35629970 3维生素B的含量测定及回收率试验 见表6及表7. 表6维生蠹的含量定结果f标示?% 样品号 3 均值 样品音量{"加样品(n)测得量(rng)回收辜(% 302s 3042 3008 2988 2900 2993 200tl 200tl 20130 20o0 20】 2000 50} 50 5l 5068 4871 100l 999 1026 1016 994 1007 讨论 本品中地西泮的HPLC测定曾有报道_5J,测定 波长为292nm,流动相为乙腈一甲醇一水(35:103:48, 用乙腈为"降低压力"),峰高比定量.本实验改用 75%甲醇作流动相,降低费用,工作压力并不高(仅 约l300psi),测定波长改用地西泮的最大吸收波长 230nm,提高测定灵敏度,并未发现"影响测定的负 峰",以峰l面积比定量. 谷维索为以环木菠萝醇类为主体的阿魏酸酯的 混合物-,不溶于水,在甲醇中微溶,理化性质与维 生素B相差甚远,所以不可能如报道is]所述在色谱 图前部紧挨维生素B一出峰,而可能为所加内标己烯 雌酚的分解产物.我们曾以甲醇为流动相,流速为 lml/min进行实验,结果答维素在l8,30min出一 复峰,与预测相吻合.因此,为减少谷维紊进入色谱 柱,难以洗出,以流动相(75%甲醇)溶解样品,可降 低试液中谷维素的浓度.这样,谷维素在实验条件 下出峰时间约在4h后,仅使基线稍呈波动,不影响 测定.待实验结束后,用甲醇充分冲洗色谱柱即可. 内标物质改用安替比林,保留时间比样品短 3rnin,可保证日后充分分离. 答维素改用硫酸乙醇溶液,结果准确,费用降 NewDrII畦Journal2000,?9No9 作,否则含量很快下降.维生素Bl改用提取uV 法,方便,迅速,准确,但加水放置3h后,再滤过测定 时,发现含量会高出3%,5%,可能由于在水中难 溶的地西泮或谷维素有缓慢溶出的现象.只要及时 测定或及时滤除不溶物,即可避免上述情况. [作者简介]王杰(1958一),男.副主任药师,事药品检 验,仪毒分析工作.联系电话:(0531)6923349. [参考文献] [1]朱碧君,田慧改良紫外分光光度法测定各维素片的含量及含 6一6 9眷第9 量均匀度[J:药物分析杂志.1994,14(2):43—44. [2:中国药典:s]二部.1990.634 [3]中国药典:s]二部1990189 [4]卫生部药品标准[s].化学药品及制剂第,册,1989.55. 5]刘贵银,刘丽敏HPLCj击测定谷维安片中安定的古量均匀越 [J药物分析杂志.1991,l1(4):240—241. :6]王杰与"改良觜外分光光度法曩I定答维素片的吉量厦吉量均 匀度一文的一点商榷[J].药物分析杂志.1995,15(4):53— 54 (杖稿:2000—05—23管回1200~1—07一l2) 薄层色谱扫描法检测茶碱中毒者和哮喘患者血清中茶碱浓度 鱼型,至树华,卫满升l (1山西医科大学,太原030001;2首都医科大学宣武医院,北京100053;,,, 3山西省运城地区公安处技术科,运城044300)2t盔 [擒要]目的:建立血清中蒂碱的提取和薄呈色谱扫描定性和定量检测方法.方法:血 清用1%盐馥硬化,乙 醚二氯甲烷(6:4)或氯仿萃取,点于GF24薄层板上,正庚烷:三氰甲烷:无水乙辞:乙 馥乙酯:甲辞:冰乙馥(5:2:2: 1.5:2.5:0.5)展开;薄层扫描检测.结果:茶碱薄层层析Rf值为0.35;最大吸收波长为 275ran;血中茶碱线性检i—j 范围为1,24tag,最4,检出浓度为04,ughnl:结论:丰法快速,简便,定性定量准确,可 用于茶碱中毒的快速谤 肿浓羹兰层色谱弛血清哼喃芬-绣[关t词】茶碱;薄层色谱扫描;血清.f [中圈分类号]R92711;R974.3文献标识码]B[文章编号]1003—3734(2000)09—0618 —03 DeterminationofserumtheophyllinebyTLCscanning incasesoftheophyllinepoison YUNKe-ming.WANGXiu一.TIANShu—hua',WEIMan—ahend (1Shar~riMedicalUniversity,Tai3~tan030001,China;2Xuan'wuHospital,Capital UniversityofMedicalSciences,13eiying100053,China;3TechnicalSection,Local PublicDepartmentYunchengCitYurwheng0443OOChina) [Ab~a'act]Objective:Toestablisharapidmethodfordeterminationoftheophyllineinseruin. Methads:SeFdrllsampleisacidifiedwith1%HCI,thenextractedthether_dicholromethane(v/v= 6/4)Orchloroform.TheextractisappliedtoaGF254TLCplateanddevelopedwithasolventmixture ofn.heptane:chloroform:ethanol:ethylao~tate:methanol:aceticacid(5:2:2:1.5:2.5:0.5)and,hen determinedbyTLCscanningResults:TheRfvaluefortheophyllineis035withamaxirnumabsorp— tionat275r1m.Thelinerrangeoftheophyllineis1, 24,~/m[withadetectionlimitof0.4btg/rrd. Conclusion:Arapid,~nvinient,andaccuratemethodforqualitativeandquantitativedetertm nationof theophyllineinseruinisestablishedI'heophyllinepoisoningandse?theophy11inelevelcanbedeter— minedbythismethod. [Keywords]theophylline;TIcscanning~serum —— 618—— __蠹