14食品添加剂叶酸

14食品添加剂叶酸 中华人民共和国国家 GB XXXX—XXXX 食品安全国家标准 食品添加剂 叶酸 National food safety standard Food additive Folic acid (征求意见稿) 2010-XX-XX发布 201X-XX-XX实施 中华人民共和国卫生部发布 GB ××××—×××× 前 言 本标准与美国《食品化学品法典》第五版(FCC?)“叶酸”的一致性程度为非等效。 本标准代替GB 15570—1995《食品添加剂 叶酸》。 本标准与GB 15570—1995相比，主要变化如下: ——试验方法中增加了安全提示; ——叶酸含量测定方法由比色分光法和HPLC内标法修改为HPLC外标法,质量分数指标由95%,102%修改为96%,102%; ——完善了水分测定方法; ——灼烧残渣指标由?0.1%修改为?0.2%。 本标准的附录A和附录B为性附录，附录C为资料性附录。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为: ——GB 15570—1995。 I GB ××××—×××× 食品安全国家标准 食品添加剂 叶酸 1 范围 本标准适用于化学合成法制得的叶酸。 2 规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。 3 化学名称、分子式、结构式、分子量 3.1化学名称: -[4-[(2-氨基-1,4-二氢-4-氧代-6-喋啶)甲氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸 N -[4-[(2-Amino-1,4-dihydro-4-oxo-6-pteridinyl)methyl amino]benzoyl]- L-glutamic Acid N 3.2分子式: CHNO191976 3.3结构式: 3.4相对分子质量: 441.40(按2007年国际相对原子质量) 4 要求 4.1感官要求:应符合1的规定。 表1感官要求 项 目 要 求 检验方法 色泽 黄色或橙黄色。 取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自 然光线下，观察其外观，并嗅其味。 组织状态 结晶性粉末。 4.2 理化指标:应符合表2的规定。 1 GB ××××—×××× 表2 理化指标 检验方法 项 目 指 标 叶酸(以CHNO计，干基计) ,w/ % 96.0,102.0 附录A中A.4 191976 附录A中A.5 水分,w/ % ? 8.5 附录A中A.6 0.2 灼烧残渣,w/ % ? 10 附录A中A.7 重金属(以Pb计)/(mg/kg) ? 3 GB/T 5009.76 砷(以As计)/(mg/kg) ? 2 GB ××××—×××× 附录A (资料性附录) 检验方法 A.1 安全提示 本标准试验方法中使用的部分试剂具有毒性或腐蚀性，按相关规定操作，操作时需小心谨慎。若溅到皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。在使用挥发性酸时，要在通风橱中进行。 A.2 一般规定 本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682中规定的三级水;试验中所用标准滴定溶液和其它所需溶液，在未注明时，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603之规定配制。 A.3 鉴别 A.3.1 试剂 氢氧化钠溶液:c(NaOH)=0.1 mol/L。 A.3.2 仪器设备 紫外分光光度计，附1? 吸收池。 A.3.3 紫外吸收试验 称取实验室样品，加氢氧化钠溶液制成每1 mL中含10 μg实验室样品的溶液，用紫外分光光度计测定，在256?2 nm，283?2 nm，365?4 nm的波长处有最大吸收，在256 nm与365 nm波长出的吸光度比值应为2.8,3.0。 A.4 叶酸含量测定 A.4.1 试剂 A.4.1.1 甲醇(色谱级)。 A.4.1.2 磷酸二氢钾。 A.4.1.3 氢氧化钾溶液:c(KOH)=0.1 mol/L。 A.4.1.4 氨水溶液:0.5%(体积比)。 1A.4.1.5 叶酸对照品(中国药品生物制品检定所)。 A.4.2 仪器设备 高效液相色谱仪。 A.4.3 色谱分析条件 推荐的色谱柱及典型操作条件见表A.1，叶酸典型高效液相色谱图参见附录C，其它能达到同等分离程度和柱效的色谱柱和色谱条件均可使用。 1 叶酸对照品是由中国药品生物制品检定所提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可，如果其他产品有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 3 GB ××××—×××× 表A.1 色谱柱和典型色谱操作条件 色谱柱 25cm柱长，4.6mm柱内径，十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱 以6.8g磷酸二氢钾与0.1mol/L 70 mL氢氧化钾溶液，加水稀释至850 mL，并流动相 调节pH值至6.3?0.1，加80 mL甲醇，用水稀释成1000 mL的溶液 流速 1mL/min 检测波长 254 nm 柱温 30?，控制精度?1? A.4.4 分析步骤 A.4.4.1 对照品溶液的制备 称取10 mg叶酸对照品，精确至0.02 mg，置50 mL容量瓶中，加30 mL 0.5%氨水溶液溶解后，用水稀释至刻度，摇匀。 A.4.4.2 实验室样品溶液的制备 称取10 mg实验室样品，精确至0.02 mg，置50 mL容量瓶中，加30 mL 0.5%氨水溶液溶解后，用水稀释至刻度，摇匀。 A.4.4.3 系统适用性试验 理论板数按叶酸峰计算应不低于2000，叶酸与相邻杂质蜂的分离度应大于1.5。 A.4.4.4 测定 按表A.1色谱柱和典型色谱操作条件，精密量取10 μL实验室样品溶液注入液相色谱仪， 色谱图;另取叶酸对照品溶液，同法测定。 A.4.5 结果计算 叶酸含量(以CHNO计,干基计)的质量分数以w计，数值以%表示，按式(A.1)计算: 1191976 Amw，，112„„„„„„„„„„„„„„(A.1) w,，1001Amw，，,(100)/10023 式中:——实验室样品质量的数值，单位为毫克(mg); m ——叶酸对照品质量的数值，单位为毫克(mg); m1 ——叶酸对照品(以CHNO计,湿基计)的质量分数的数值，数值以%表示; w1919762 ——按A.5项下测定实验品样品含水量的质量分数的数值，数值以%表示; w3 ——实验室样品溶液中叶酸的峰面积的数值; A1 A——对照品溶液中叶酸的峰面积的数值。 2 取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的相对偏差在2.0%以内。 A.5 水分的测定 A.5.1 试剂 A.5.1.1 费休氏试液。 A.5.1.2 无水甲醇(分析纯)。 A.5.2 仪器设备 费休氏水分测定仪。 A.5.3 分析步骤 4 GB ××××—×××× 按《中华人民共和国药典》二〇〇五年版二部附录? M 水分测定法第一法A测定，具体方法如下: 称取0.1 g实验室样品，精确至0.0002 g，溶剂为无水甲醇，用水分测定仪直接测定，或将实验室样品置干燥的具塞玻璃瓶中，加25,30 mL无水甲醇,在不断振摇(或搅拌)下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指示终点;另作空白试验。 A.5.4 结果计算 实验室样品中水分的质量分数以计，数值以%表示，按式(A.2)计算: w3 ()VVF,，10 „„„„„„„„„„„„„„(A.2) w,，1003m 式中: —每1mL费休氏试液相当于水的质量的数值，单位为毫克每毫升(mg/mL); F —实验室样品消耗费休氏试液的体积的数值，单位为毫升(mL); V1 —空白所消耗费休氏试液的体积的数值，单位为毫升(mL); V0 —实验室样品质量的数值，单位为毫克(mg)。 m 取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行试验的相对偏差应小于0.2%。 A.6 灼烧残渣的测定 A.6.1 试剂 硫酸。 A.6.2 分析步骤 称取1.0 g实验室样品，精确至0.0002 g，置已灼烧至恒重的坩埚中，缓缓灼烧至完全碳化，放冷;加硫酸0.5,1 mL使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在(550?50)?灼烧使完全灰化，移至干燥器内，放冷，精确称定后，再在(550?50)?灼烧至恒重(恒重指连续两次灼烧后的重量差异在0.3 mg以下的重量，灼烧至恒重的第二次称重应在继续灼烧30分钟后进行)。 A.6.3 结果计算 灼烧残渣的质量分数以计，数值以%表示，按式(A.3)计算: w4 ()mm,23„„„„„„„„„„„„„„„(A.3) w,，1004m 式中:——恒重坩埚和残渣的质量的数值，单位为克(g); m2 m——恒重坩埚的质量的数值，单位为克(g); 3 m——实验室样品质量的数值，单位为克(g)。 取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于0.02%。 5 GB ××××—×××× 附录B (规范性附录) 重金属检查法 B.1 试剂 B.1.1 硝酸。 B.1.2 硫酸。 B.1.3 盐酸。 B.1.4 甘油。 B.1.5 乙酸铵。 B.1.6 硝酸铅。 B.1.7 硫代乙酰胺。 B.1.8 乙醇。 B.1.9 氨试液: 400?1000。 B.1.10 盐酸溶液: c(HCl)=7 mol/L。 B.1.11 盐酸溶液: c(HCl)=2 mol/L。 B.1.12 氨水溶液: c(NH.HO)=5 mol/L。 32 B.1.13 氢氧化钠溶液:c(NaOH)=1 mol/L。 B.1.14 乙酸盐缓冲液(pH3.5):取25.0 g乙酸铵，精确至0.01 g，加水25 mL溶解后，加38 mL 7 mol/L盐酸溶液，用2 mol/L盐酸溶液或5 mol/L氨水溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示)，用水稀释至100 mL，即得。 B.1.15 酚酞指示液:1%乙醇溶液。 B.1.16 混合液:取15 mL氢氧化钠溶液(1 mol/L)，5.0 mL水及20 mL甘油，混合摇匀; B.1.17 硫代乙酰胺溶液:取4 g硫代乙酰胺，精确至0.01 g，加水使溶解成100 mL，置冰箱中保存。临用前取混合液(B.1.16) 5.0 mL，加上述1.0 mL硫代乙酰胺溶液，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。 B.1.18 标准铅溶液:称取0.160 g硝酸铅，精确至0.0002g,置1000 mL量瓶中，加5 mL硝酸与50 mL水溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取10 mL贮备液，置100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1 mL相当于10 µg的Pb)。 配置与贮存用的玻璃仪器均不得含铅。 B.2 分析步骤 按《中华人民共和国药典》二〇〇五年版二部 附录? H 重金属检查法第二法，具体方法如下: 取该品种灼烧残渣项下遗留的残渣，加0.5 mL硝酸，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后(或取实验室样品1g，缓缓灼烧至完全炭化，放冷，加0.5,1.0 mL硫酸，使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽后，加0.5 mL硝酸，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500,600?灼烧至完全灰化)，放冷，加2 mL盐酸，置水浴上蒸干后加15 mL水，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加2 mL乙酸盐缓冲液(pH3.5)，微热溶解后，移置纳氏比色甲管中，加水稀释成25 mL;另取配制实验室样品溶液的试剂，至瓷皿中蒸干后，加2 mL乙酸盐缓冲液(pH3.5)与15 mL 6 GB ××××—×××× 水，微热溶解后，移置纳氏比色乙管中，加(1?0.01)mL标准铅溶液，再用水稀释成25 mL;再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2 mL，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，甲管中显示的颜色与乙管比较，不得更深。 7 GB ××××—×××× 附录C (资料性附录) 叶酸含量测定典型高效液相色谱图 主峰叶酸 8 GB ××××—×××× 1