顺铂肾小管损害中线粒体改变及氨基酸的保护作用

顺铂肾小管损害中线粒体改变及氨基酸的保护作用 顺铂肾小管损害中线粒体改变及氨基酸的 保护作用 糠9受Y{》【孝梭 检查显示于用药第16周,C组总积分显 着高于B组,进一步提示长期口服强的 松,大鼠阿霉紊肾病变加重. 3.非阿霉紊肾病大鼠(D组)使用强 的松后尿蛋白排泄量,血脂及肾脏组织 学改变了也与正常对照组有显着差别, 提示糖皮质激素对正常肾脏的蛋白质滤 过与重吸收功能可能有一定的影响.其 肾脏组织学改变与A组也有显着区别, 不仅支持这种可能,而且提示长期大剂 量使用激素于正常大鼠也可诱发某种程 度的肾小球损害. 4.至今激素仍然是治疗多种原因 引起肾病综合征的基本药物,它对以微 小病变为代的原发性肾小球疾病的确 有显着治疗作用但对于难治性肾病,盲 目使用激素的潜在危害性,临床医生重 视不够激素对难治性肾病的不良影响 可能有:(1)加重病变肾脏的高灌注状 态.Baylis等发现”.给正常或肾上腺切 除的大鼠给予激素可以使肾小球滤过率 增加.对难治性肾病综合征激素使用日 肾脏有效血浆流量显着增加17].(2)增加 病变肾小球毛细血管滤过膜对大分子蛋 白的通透性Thomas等”发现.大剂量激 素用于肾病综合征,可以改变尿蛋白的 ,/l 一bI 时 —— 16 28 中华肾脏病杂志2000年8月第16卷第4期ChinJNephro1.August2000,V16,No4 与A组比较,?P<005;与B组比较,AP<005;与A组及l司组与第16周比较,?? P<0.05 构成,增加大分子百分比.我们使用尿蛋.Th…MGcon曲0f 白圆盘电泳方法也证明了激素的这种作:叫q….fI:b;aruP[ak.0f缸 用….(3)增加尿蛋白排泄量.隔日激素beadngbu,AmJNeprho1.I993,13: 疗法期间,激素使用日尿蛋白排泄量为385— 398 激素停用日的15倍c{4)激素加重4崔世维.邵亚男,钱桐荪.等.糖皮质激 肾病综合征高脂血症,发生脂质肾损害素对肾小球滤过膜通透性影响中华肾 【6I .(5)肾上腺糖皮质激素可以诱导血管脏病杂志,1998,14:186188. 紧张紊?1型受体的基因表达,使血管平 5BncioT,MolinaA,EgidoJ.elIL?1?like 滑肌上这种受体的数量增加,从而增加 productioninadfiamycin-inducednephrotlc 肾脏对血管紧张紊?的敏感性….syndromeinthe呲ClinExplmmunol? 1992,87:117-124. 参考文献6CareenJSProtelnuria且ndprogressionin humangI…lardiseasesAmJN~phrol, 1BaylisC,Bm~arBMMechatfi~of1990.10Supplh8l一87. slu~orticoid—inducedinere.asein7SatoA. SuzukiH.Mural~miM.eta1. gbm盯I丑rfiltrationm-AmJPhysiol,Glueoeorfi~idincreases且n0忙nsin?type 197124:FI66-FI70Ipmanditsgeneexpression 2崔世维,邵亚男.钱桐荪.澈紊请疗难治HyPC~ensi.n. 30. 1994.23:25— 性肾病综合征对蛋白屎及肾脏高滤过状(收稿日期:199进腹腔,于肾血管平面下插动脉导管进 腹主动脉,记录平均动脉压,实验中维持 在100,120mmHg.每30min收集尿一 作者单位:310003杭州.浙江大学医学院 附属第一医院泌屎外科(谢立平);德国基尔 大学医学院泌屎外科{cSkr~zek,Hw且nd) S{Pez.,c,6 表1实验结束时肾小管细胞线粒体呼吸功能测定 fn?10l?mi.一?mg线粒体蛋白,.?”) 与对照组比,?P<0O1.与顺铂组比.?P<0.01,与对照组比,#P<005 次用于测屎流率和屎肌酐.实验完成时 从门静脉抽血2ml测血肌酐;结扎肠系 膜上动脉及肾血管上腹主动脉,经动脉 导管用4?灌注液冲洗一侧肾脏后取下, 对侧肾脏作形态学研究. 实验动物随机分为5组:{1)对照组 {=21):取灌注侧肾脏,用于分离线粒 体;{2)假手术组{=16):静脉滴注{静 滴)0.9%,氯化钠2ml后以2ml/h速率 维持;{3)顺铂组(=12);静滴09%氯 化钠2ml后注射10mg/kg顺铂,氯化钠 溶液继续2ml/h静滴;(4)顺铂+氨基 中华肾脏病杂志2000年8月第16卷第4期 ChinJI~eohrolAt2000.Vol16.N0.4 酸组(n=10):静滴8种L.氨基酸合剂 (甘氨酸与丙氨酸为主)2ml后给予10 mg/kg顺铂,继以氨基酸2ml/h维持; (5)氨基酸组(n=16):静滴氨基酸合剂 2ml后以2ml/h维持. 肾小管细胞呼吸功能以极谱法在25 ?测定.测定时反应池中加入045ml含 5mmol/L苹果酸及5mmol/L谷氨酸的 线粒体混悬液,加0.5mm.Dl/L二磷酸腺 苷(ADP)后测得的氧耗率称为状态3呼 吸.ADP耗尽时的氧耗率称为状态4呼 吸.呼吸控制率(RCR)=状态3呼吸/状 态4呼吸.此外,线粒体混悬液中加2 nmol/L对三氧甲氧基苯腙基氰化物 (FCCP)以测定FCCP解耦联呼吸. 以J比色法测定血,屎肌酐浓 度.CFR(ml/min)=尿肌酐浓度(mg/m1) - 尿流率(ml/min)/血清肌酐浓度 (mg/m1). 肾脏接常规作半薄切片(厚I一2 m)甲苯胺蓝染色作常规检查,超薄切 片(厚5011111)乙酸双氧铀及枸橼酸铅染 色作电镜观察.剩余肾组织以coldner及 HE染色,作光镜检查. 二,结果 顺铂组,候手术组,氨基酸组及对照 组的肾脏形态学检查无异常发现 顺铂组3h后CFR为(I50?013) ml/min,假手术组为Il七7?0.08)ml/min 罔塑差异显着性意义(P>005).而 {一确 与假手术组相比,顺铂+氨基酸组 【(330?019)ml/min】及氨基酸组 【(3.45?021)ml/min】GFR分别增加 77%及85%,差异有非常显着性意义(P (0.OI1 实验结束时,顺铂组状态4呼吸增 加I倍(P<0.01),状态3呼吸,RCR及 FCCP解耦联呼吸分别减少46%(P< 0.OI),74%(P(0.O1)及47%(P( 0.0I).同时应用氨基酸合剂使状态4呼 吸恢复至正常水平.受抑制的状态3呼 吸,RCR及FCCP解耦联呼吸明显改善, 受抑百分比分别降为对照组的16%(P (0.05),22%(P(0.OI)及2I%(尸< 0O1),见表I. 三,讨论 本实验静注顺铂后3h,肾脏形态检 查及肾小球滤过率均正常,但肾小管细 胞线粒体状态4呼吸增高I倍,状态3 呼吸,RCR及FCCP解偶联呼吸分别抑 制46%,74%及47%,说明线粒体电子 传递与氧化磷酸化均受抑制,导致肾小 管细胞能量代谢障碍,提示线粒体改变 可能为顺铂引起肾小管早期损害的重要 环节. 甘氨酸及丙氨酸对钙离子载体及多 种氧化剂引起的离体肾近曲小管细胞致 死性损伤有保护作用….本实验结果也显 示8种L_氨基酸合剂有显着的对抗顺铂 所致肾小管细胞线粒体功能障碍作用. 肾局部内皮素与蛋白尿关系的实验研究 章洁 \// 马恒颢王小眷邹小宁李勇辉 内皮素(endothe[inET)在肾脏生理 病理过程中所起的重要作用已日益受到 人们的重视,但内皮素在蛋白尿发生发 展过程中的变化及可能起的作用尚未见 报道.为探讨内皮素与蛋白尿的关系,我 们观察了不同时期阿霉素性肾病综合征 大鼠血,肾ET的变化并进行了相关的研 究. 基金项目:军队九五规划医药卫生科研 基金资助项目(961~36) 作者单位:5101710广州军区广州总医 院儿科 261 氨基酸肾功能保护作用的机制未 明,甘氨酸,丙氨酸剂量过高有潜在肾毒 性,而低至中剂量氨基酸可引起血管扩 张及GFR的增加.我们也观察到氨基 酸台剂能增加鼠GFR. 甘氨酸,丙氨酸保护肾功能的作用 无需经过代谢,按基和氨基的取代或消 除会导致作用丧失.甘氨酸与丙氨酸 通过其特定的理化性质稳定蛋白的三级 结构,从而阻止肾小管细胞结构的破坏 … .本实验显示氨基酸台剂改善顺铂引 起的细胞呼吸障碍,提示该氨基酸合剂 通过保护肾小管细胞线粒体电子传递及 氧化磷酸化功能而奏效. 参考文献 IBainesAD.ShaikhN.ItoPMech蛐isn-sof ~ffusedkidneyy帕p0lectionbyairline BDdglyelneAmJ州oL1990,259: FS0.F85 2ElSayedAA,ItaylorJ,ElHah拈 AM.Mediatorsoflhedirecteffee~ofamiDO 耻ids0?theratkidney.Cllnsci.1991.81: 427-430. 3WeinbergJM.Venkat舵】lEd删NA.Ga一 (tBr0R.et.Structural删iHI栅 forp~tectionby9?m~un,Jno耻】dsgTIst bypoxieu呵inkidneypm:draaltuhI|I? FASEBI990.4:3347?3351 (收稿日期:I999-08.2C1) (本文编辑:李耀荣) 一 ,材料和方法 用体重为150—180gSD大鼠制造 阿霉素肾病综合征并设对照组,于注射 阿霉素后隔日留24h尿测定尿蛋白量. 分别于注射阿霉素后4d,8d,32d,56d 将大鼠麻醉,经左颈动脉插管后将插管 经三通管连接于惠浦78834C多功能监 护仪,测量收缩压和舒张压.选用瑞典产 激光多普勒微血管流量测定仪测定肾皮 质血流,测血压及肾皮质血流后取血及 肾皮质,标本处理按药盒说明,采用放射 免疫分析法直接测定血及肾皮质ET.药 盒由301医院东亚免疫技术研究所提 供. 二,结果 1.24小时尿蛋白定量:肾病鼠于注 药后8d始尿蛋白显着升高(与正常组 比较P<0.05);28,32d为尿蛋白高 峰期;48,56d有所下降.用阿霉素 4d,8d,32d,56d划分为蛋白尿前期, 初期,高峰期及高峰期后. 2.平均动脉压:平均动脉压在8, 32,56d时略有升高,以32d达到高点, 56d时有所回落,但与正常组比较差异 均无显着性意义. 3.肾皮质血流变化:注药后4,8, 磐勾’张,刍亥礁