结核性脑膜炎患者脑脊液中腺苷脱氨酶和
结核抗体水平研究
中闭防旁枭恚2007年6月第29卷第3期
?
论着?
结核性脑膜炎患者脑脊液中腺苷脱氨酶和
结核抗体水平研究
王莉闫世明吴江
(1.长春市传染病医院长春130123;2.吉林大学第一医院长春130021)
摘要:目的探讨结核性脑膜炎(TBM)的早期诊断方法.方法采用氨的偶联酶测定法和酶联
免疫吸附实验(ELISA)检测3组病例(结脑组51例,病脑组30例,非脑膜炎组20例)脑脊液
(CSF)中
腺苷脱氨酶(ADA)的活性水平和脑脊液结核抗体(PPD.IgG)的阳性率.结果研究发现结脑组
脑脊
液中腺苷脱氨酶活性水平明显升高,与病脑组和非脑膜炎组比较有显着性差异(P<0.01).
而病脑
组与非脑膜炎组比较无显着性差异(P>0.05);结核性脑膜炎早期脑脊液中结核抗体的阳
性率为
80.4%(其中2周内PPD.IgG阳性率为80.4%,1周内为23.5%,其他为3.9%),在随后的临床跟
踪检
测中为100%.结论说明共同检测脑脊液中腺苷脱氨酶的活性明显升高和结核抗体阳性可以
作为
结脑早期诊断的重要依据.
关键词:结核,脑膜;脑脊液;腺苷脱氨酶;病毒性脑膜炎;结核抗体
ThelevelofADAandPPD-IgGinCSFsofpatientswithtuberculousmeningitis
Wang,YanShiming,Wufiang
TuberculosisHospitalofChangchun,ChangChun130123,China)
Abstract:ObjectiveToexplorethemethodtodiagnosetuberculousmeningitis(TBM)atearlierperiod.
MethodsThelevelofADAandanti—TBantibodiesincerebrospinalfluid(CSF)ofpatientswithTBMwasde—
terminedbythebiochemicalmethodsandELISA.ResultsThelevelofADAinCSFofallpatientssufferin
g
fromTBMincreasedmarkedlycomparedwiththosefromthepatientswithviralmeningitis(P<0.05)a
ndthe
normal(P<0.O1).Thepositiveratioofanti—TBantibodywas80.4%intheearlystageofdiseases,and100%
atthefollowingclinicalobservation,butnegativeinallpatientswithviralmeningitisandallnormalcontr
ols.
ConclusionTheelevationofADAlevelandthepositivePPD-?IgGinCSFofpatientsmightbehelpfultod
iag-?
noseTBM.
Keywords:TuberculousMeningitis;CerebrospinalFluid;AdenosineDeaminase;ViralMenigitis;PP
D—IsG
结核性脑膜炎是肺外结核中的重症结核病,在
发展中国家发病率,死亡率均较高…,近年来,在我
国发病率有所下降,但仍然是常见的中枢神经系统
感染性疾病.TBM的早期诊断对患者的预后有重
要影响,我们通过检测TBM结核抗体和腺苷脱氨酶
的活性水平,探讨结核性脑膜炎的早期诊断方法.
资料与方法
1.研究对象:TBM组(结脑组)51例,均为2002
年1月至2003年12月在长春市结脑研治中心的住
院患者,符合TBM早期诊断标准,发病在14d以内,
年龄16,45岁,平均年龄(25?1.23)岁;病毒性脑
膜炎组(病脑组)30例,均为2002年10月至2004年
2月期间吉大一院,吉林省医院神经内科住院患者,
符合病毒性脑膜炎诊断标准,发病在14d以内,年龄
16,36岁,平均年龄(26?1.31)岁;非脑膜炎组(对
照组)20例,均为2002--2004年2月期间吉林大学
第一医院神经内科就诊的脑脊液常规生化均正常的
门诊已排除脑膜炎的非脑膜炎患者.
2.研究方法:分别采用氨的偶联酶测定法和
?
234?中闭防痨杂志2007年6月第29卷第3期
ELISA检测CSF中ADA活性水平和CSF中PPD.IgG
(腺苷脱氨酶试剂盒,购自长春汇力生物技术有限公
司;TB快速检测试剂盒:四川省绵阳市生物试剂诊
断有限公司生产).实验数据以均值-I-标准差表示,
样本均数间比较使用t检验,以P<0.05作为有显
着性差异标准.
结果
1.各组脑脊液ADA活性水平的检测结果如表1.
表1各组脑脊液ADA活性水平
8)与非脑膜炎组比较P<0.Ol;与病脑组比较P<0.05
2.脑脊液中PPD.IgG检测结果如表2.
表2各组脑脊液PPD.IgG阳性率
讨论
TBM是由结核杆菌感染所致,若能从脑脊液中
检测到结核杆菌,其诊断即可确立.但在实际临床
工作中,脑脊液中结核杆菌实际检出率很低,大多数
TBM是依靠病史,症状,体征及脑脊液的常规化验
等综合
而做出的诊断.有些不典型的病例确诊
较困难,有的则需试验性治疗,在治疗过程中根据病
情变化加以判断.因而研究其特异性和敏感性较
高,能够满足临床需要的诊断与鉴别诊断方法,具有
重要的临床意义.
本实验采用氨的偶联酶测定法,通过检测3组
病例CSF中ADA活性水平显示TBM组脑脊液中
ADA活性水平明显升高,与非脑膜炎组和病脑组相
比有显着性差异(P<0.01),病脑组与非脑膜炎组
比较,CSF中ADA活性水平,无显着性差异(P>
0.05).TBM组CSF中ADA范围为11.72,14.68U/
L,如以CSF中ADA活性水平为11.72U/L作为结脑
的诊断标准,则检出的阳性率为96%,特异性为
100%.腺苷脱氨酶(ADA)是一种与机体免疫系统
有重要联系的巯基酶,是T细胞增殖,活化过程中产
生的,ADA活性水平与T细胞数量以及T细胞的活
性密切相关,可以间接地,较真实地反映局部的细胞
免疫状态J.TBM的病理发展及转归,与机体的免
疫功能密切相关,而结核杆菌属于胞内寄生菌,故抗
结核免疫是以细胞免疫为主的免疫应答.细胞免疫
的强弱,既可以决定其抵抗结核菌感染的能力,同时
也决定了机体的病理性损伤程度.细胞免疫低下,
则导致机体不能清除结核杆菌的感染而导致结核杆
菌的大量和快速的积聚;若细胞免疫过强,则导致超
敏反应及病理性免疫损伤,甚至不可逆的病理损
伤J.国外报道:TBM患者CSF中ADA活性检测的
阳性率为75%,96%,特异性为84%,99.4%【.
国内也有相关的报道J,但因病例数少尚无定论.
通过本实验研究,我们认为脑脊液中ADA活性明显
升高可作为TBM早期诊断与鉴别诊断的一个重要
辅助指标.
在TBM患者CSF中Ig含量升高,以IsG最为明
显L6J,在临床症状改变出现之前即发生变化,重症患
者尤为明显,一般认为是由于血脑屏障的通透性增
高所致,但TBM患者CSF中抗结核杆菌IgG抗体与
其自身血液中特异性IgG抗体相比,前者高于后者,
这就说明TBM患者CSF中的IsG抗体至少有部分
是中枢神经系统受抗原刺激后在局部所合成,这一
点已经EllardGA等J证实.本实验研究采用
PPD—EusA检测3组病例脑脊液中结核菌素纯蛋
白衍化物的IsG抗体的阳性率.实验结果表明CSF
中PPD.IgG在结脑早期的阳性率为80.4%,其中,2
周内PPD.IsG阳性率为80.4%,1周内为23.5%,其
他为3.9%,但阴性患者在随后的临床跟踪检测中
也呈现阳性,因此结脑组CSF中PPD.IgG阳性率的
临床跟踪检测为100%,由此说明CSF中PPD.IgG阳
性支持结脑早期诊断.提示检测脑脊液中PPD.IsG
在结脑早期诊断中敏感性低,可能出现阴性结果.
在病脑组和非脑膜炎组CSF中PPD.IgG均无阳性改
变.因此TBM脑脊液中结核抗体阳性可以作为
TBM诊断的重要辅助指标.
对结脑组CSF中ADA和PPD.IgG进行比较性
分析显示,在PPD.IgG早期检测阴性的10例患者
中,其中有8例ADA活性水平显着升高,仅2例
ADA活性水平虽有升高但低于诊断标准(11.72U/
L).这10例患者早期做结核菌素实验结果:其中6
例为阴性,4例为弱阳性.说明结核杆菌引起的免
疫反应和变态反应是同时发生的,是一致的.因此,
分析结脑早期脑脊液中PPD.IgG阴性可能的原因:
(1)机体免疫力低下;(2)结核杆菌毒力弱,数量少.
而ADA参与TBM发病和转归的机制还缺乏确切的
理论依据,故将其单独作为TBM早期诊断的特异性
中l习防旁套志2007年6月第29卷第3期
结核分枝杆菌脂多糖的提取及其检测
血清结核抗体的研究
周丽蓉罗永艾王国治.
(1.重钢总医院呼吸科重庆400080;2.重庆医科大学附属第一医院肺科重庆400080;
3.中国药品生物制品检定所菌苗室北京100050)
?
论着?
摘要:目的提取结核分枝杆菌(MTB)脂多糖抗原,检测结核血清参考品,评价其在血清学诊断
中的价值.方法将MTB菌体冰浴超声破碎,用酚/氯仿,氯仿/甲醇抽提除去蛋白和脂质,再用
DNaseI酶和RNase酶作用除去DNA和RNA,得到初步纯化的脂多糖即LPS.1,LPS.1在去污剂Triton.
x1l4作用后,分成含有阿拉伯甘露糖(AM)的水相即LPS.2和含有脂阿拉伯甘露糖(LM)和脂甘露糖
(LM)的有机相即LPS.3,以三种多糖作为抗原,通过ELISA方法检测结核阳性和阴性血清参考品.结
果LPS.1对结核血清参考品检测的敏感性为71.7%,特异性为96%,LPS.3的敏感性为43.9%(18/
41),而特异性达到100%.结论脂多糖抗原检测血清结核抗体显示出较强的特异性,可望成为结
核病血清学的诊断组合抗原之一.
关键词:分枝杆菌,结核;脂多糖;抗原
TheextractionofMycobacteriumtuberculosislipopolysaccharideandthedetectionof
anti-lipopolysaccharideantibodyinsera
ZhouLirong,LuoYongai,WangGuozhi
GeneralHospitaloftheChonggang,Chongqing400080,China
Abstract:ObjectiveToobtainthelip0polysaccharideofMycobacteriumtuberculosistodetectTBreffer
-
encesera,andtoevaluateitspotentialvalueforserodiagnosisoftuberculosis.MethodsLyseMycobacter
ium
指标,还需要更大样本的临床观察结果和更深入的
基础理论机制的研究作为依据.但鉴于CSF中
PPD.IgG在TBM发病中特异性产生,对TBM诊断的
特异性是不容忽视的.以往文献研究显示,在TBM
早期PPD.IgG检出的阳性率并不理想且存在5%左
右的假阳性,故也限制了其在TBM早期确切诊断中
的力度.因此认为将CSF中ADA活性和PPD.I
检测协同起来,既体现了ADA早期检出敏感性高的
特点,又反应了PPD.IgG特异性强的特性,两者取长
补短,相辅相成,共同作为TBM早期诊断的方法可
行,其临床应用将有利于TBM的早期诊断和鉴别诊
断,减少漏诊和误诊,降低由于早期诊断不利而导致
的危重病情的几率,改善TBM患者的预后.
联合检测脑脊液中腺苷脱氨酶的活性明显升高
和结核抗体阳性可作为结脑早期诊断的重要依据.
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(收稿日期:2006—11—02)