先天性双侧输精管缺如患者睾丸超微结构的改变

先天性双侧输精管缺如患者睾丸超微结构的改变 先天性双侧输精管缺如患者睾丸超微结构 的改变 中华泌尿外科杂志2001年l2月第22卷第l2期chinJUrol,December2001.Vo]22.No12 先天性双侧输精管缺如患者 睾丸超微结构的改变 曾国华梅骅吴开俊 【摘要】目的了解先天性双侧输精管缺如 (Congenitalbilateralabsenceofvasdeferens,CBAVD) 患者睾丸超微结构的改变,以预测单精子卵胞浆内注射(IcsI)治疗效果.对I3倒光镜下睾 丸组织形态学正常的CBAVD患者睾丸组织进行电镜观察.结果盟细精管界膜改变现为睾丸 瞌细精管基膜增厚,分层,向管腔形成不同程度的指状突起基膜外胶原纤维呈不同程度增多,增粗, 排列紊乱,极性消失.生精上皮表现为精子细胞头部畸形,胞核染色质呈现明显颗粒状结构,出现核 内空泡;精子细胞中段线粒体鞘部分或完全缺失.顶体内陷,顶体囊增大,内有电子密度不高的片层 结构(5例).支持细胞表现数日增多,胞浆内脂质颗粒及降解小体明显 增多,有时可见支持细胞之间 的紧密连接消失(2例).结论CBAVD患者睾丸组织超微结构异常主 要表现为界膜与精子细胞 的改变,CBAVD所致的无精子症除了梗阻因素外,同时舍并了睾丸 性因素 【关键词】先天性;输精管缺如;睾丸;显微镜检查,电子 Stu曲 oi”testicularultrastructureincm~nitalbilateralabsenceofvdeferemZENGG”如m,MEI Hm,帆 KaijunDeparpmentofUrology,t;aeFirstAllagedlJaspitalo2(SuangJmuMedicalCollege, Guang~tmu510120.China 【AbstractJObjectiveTostudythetesticularultrastructureinCIKAVDpatients.MethodsUI一 ~tmctureoftesticulartissuewasstudiedin13CBAVDpatientswithamwhereastherestieul~ morphologyunderlightmicroscopywnormalResultspresenceofthickening.multilayered.fin ger-shepedprotuborenttoseminiferoustubulesinvariabledegreesinbasementmembranewasconfirmedat u[trastructura]levelin13CBAVDpatientsCollagenfibresrevealedanincreaseinnumber,pmtiferation,dis turbanceinvaeiab[edegree~andElopolarityinalLthe13MaLformedhea&~,metachromaticgranulmnuclei withabundentbulta.f1l11orpartialabsenoeofmidd[emitc~hondriasheathw’efeseeninmostofspermatceoa of5c.as~.invagirmtionandtowetectronicdensity. 1ayeredmaterialswerepresentedinacrosor/leandacru~o— malcystrespectively-Mostofsertolicellspresentedabundanttipiddropletsanddegradativetx:diesintheir cytoplasminallcasesIn2ca+ti+bt;unctionsbetweensertolicellswerenotfound.ConclusionsMi— c~strucmra]a]terafionofteatieu[artissue,especiallyeonspicmousinspermatozoaandinthelimitinglaminaof testis,mightheacontributorycauseofamsr~niainadditiontotheclinicalabsenceofvasdderens 【KeyWOlMSJCongenital;Ab? ceofmdeferens;Testis;Microscopy,electron 目前普遍认为先天性双侧输精管缺如(congeni— talbilateralabsenceofvasdeferens,既}AvI])患者睾 丸组织形态学为正常或仅有轻微改变.但CBAV1) 患者在行单精子卵泡浆内注射(ICSI)治疗时,卵裂 率,妊娠率却低于后天原因者,可能原因为睾丸组织 存在光镜下未能观察到的形态学改变.为此,我们 作者单位:510120广州医学院第一附属医院泌屎外科(曾国华 吴开位);中山医科大学附属第一医院泌尿外科(梅骅) ? 论着? 对光镜下组织形态学正常的CBAVD患者睾丸组织 超微结构进行了观察. 材料与方法 一 ,病例选择 确诊为CBAVD无精子症患者32例.局麻下 行睾丸活检,一份标本以波恩液固定,HE染色,光 镜观察.另一份标本以2.5%戊二醛+2%多聚甲 醛预固定,4?保存用于电镜观察.5例正常志愿 2001年12月第22卷第12期Chin 者的睾丸组织处理同前 二,电镜检查 选择13例光镜下睾丸组织形态学正常的 CBAVD患者及5例正常志愿者睾丸组织进行锇酸 固定,脱水处理,浸透包埋,超薄切片,片厚50,10(I nrn,300目铜网捞片.染色机双重电子染色,醋酸 双氧铀15rain,柠檬酸铅3min.PhilipsCM10型透 射电镜下进行观察,采用不同放大倍率摄片. 结果 13例CBAVD患者光镜观察睾丸曲细精管界 膜及生精上皮均正常,偶见生精上皮轻度排列紊乱. 电镜观察:5例正常对照者在电镜下可见正常界膜 与精子细胞.CBAVD患者睾丸曲细精管超微结构 主要异常表现为界膜与精子细胞的改变.生精上皮 主要表现精子细胞头部畸形,胞核染色质呈现明显 颗粒状结构,出现核内空泡.精子细胞中段线粒体 鞘部分或完全缺失(图1).5例可见顶体内陷,顶体 囊增大,内有电子密度不高的片层结构(图2)患 者睾丸曲细精管界膜改变主要表现为基膜增厚,分 层,向管腔形成不同程度的指状突起.基膜外胶原 纤维不同程度增多,增粗,排列紊乱,极性消失(图 3).2例界膜中有基膜样物质沉积,但没有发现肥 大细胞浸润.支持细胞改变主要表现为数目增多, 胞浆内脂质颗粒及降解小体明显增多,其中2例可 见支持细胞之间的紧密连接消失 讨论 临床诊断梗阻性无精子症主要依据睾丸体积, 性激素测定,第二性征发育状况等,但确诊需通过睾 丸活检.传统观点认为CBAVD患者睾丸组织形态 在光镜下有轻度变化,甚至无变化.范嘉俊等_l对 26例CBAVD患者睾丸括组织检查,均为正常或基 本正常,建议jAvD患者不必作睾丸活检.但本 研究发现CBAvI]患者光镜下基本正常的睾丸组织 形态超微结构并非正常,主要表现界膜与精子细胞 的改变. 人睾丸曲细精管界膜由基膜,内细胞层,外非细 胞层,外细胞层组成.本组CBAVD患者睾丸曲细 精管光镜下界膜及生精上皮均正常,偶见生精上皮 轻度排列紊乱.电镜下可见精子细胞头部畸形,胞 核染色质成密集的小颗粒,表示精细胞成熟障碍. Hammadeh等_2认为精子头部染色质凝集是精子损 围lCBAVD患者睾丸曲细精管电镜卜u”精于细胞 中段线粒体鞘部分或完全缺失(×2950) 田2C~&VD患者睾丸曲细精管电镜下可见精子胞桩染色质 呈现明显颗粒状结构,出现棱内空泡.顶体囊增大.其内 有电子密度高的片层结构(x2950) 圈3CBAVD患者睾丸曲细精管电镜下可见基膜向管腔 形成同程度的指状突起.基膜外的腔原纤维 呈布同程度增多,增粗,排列紊乱.极性消失(x8900) 伤的敏感指标之一,可能影响ICSI结果.同时可见 顶体内陷,顶体囊增大,内有电子密度不高的片层结 中华泌尿外科杂志20001年l2月第22卷笫12期 ChinJUml,December2001.Vct22.No.12 构.顶体中存在顶体酶,在受精过程中起着关键性 作用,有人认为顶体缺失与遗传有关.Oo-e~wa等J 认为顶体缺失与ICSI成功率无关,因为顶体在自然 受精过程中的作用已被ICSI所替代.有时可见精 子细胞中段线粒体鞘部分或完全缺失,如果中段线 粒体鞘缺失或变性,可影响精子供能与精子活力. 曲细精管界膜是血睾屏障的重要组成部分,也 是生精上皮与问质进行物质交换的必经之路.界膜 内的肌样细胞还能分泌一种旁分泌因子,调节支持 细胞功能.曲细精管小室内生精细胞的营养必须 经支持细胞运送.界膜增厚,变性可改变曲细精管 上皮细胞生长,发育和分化的内环境.影响精子生 成,促使生精上皮细胞变性,坏死,脱落及精子输送 能力减弱,从而导致睾丸生精障碍.本组患者睾丸 曲细精管界膜几乎均见不同程度的病变.曲细精管 界膜主要表现为:(1)曲细精管基膜分层和折叠增 加;(2)胶原纤维层增厚,胶原纤维数量增加;(3)胶 原纤维间基膜样物质;(4)胶原纤维排序不规则,可 见胶原纤维的纵,横,斜切面,提示极性消失.吴明 章等l发现界膜除上述异常外,尚有肌样细胞异常 与界膜内肥大细胞增多现象.Maseki等l5报道不 育症患者睾丸间质内有肥大细胞存在,有些肥大细 胞有分泌现象.Hashimoto等-发现原发性不育症 患者睾丸曲细精管界膜中有较多的肥大细胞,认为 可能与过敏性疾病有关.于国等对20例不育症 睾丸进行超微结构及甲苯胺蓝组化研究,发现界膜 中有较多肥大细胞,推测它们是一种刺激性损伤因 素,导致界膜增生变厚.才秀莲等_8一发现,随着界 膜增厚,血清FSH,LH增高,T,T/LH下降,睾丸生 精障碍逐渐加重. 本研究中可发现界膜四种超微结构的变化,但 没有见到肌样细胞异常与界膜内肥大细胞增多.分 析可能的原因:(1)钳取法行睾丸活检,曲细精管外 层有可能被撕脱(2)界膜内肥大细胞增多常见于 睾丸性不育,界膜病变机制与睾丸后性不育可能不 同,前者可能与免疫有关,后者可能与长期梗阻导致 界膜代偿性增生或供血不足有关.Patrizio等J发 现CBAVD患者血清及精浆中很少存在抗精子抗 体.周生建等[103发现15例CBAVD病人血清及精 浆中抗精子抗体检测全部阴性,可能与 CBAVD长期梗阻所引起附睾管壁增生,肥厚以及 精道未发生损伤,精子抗原物质没有机会与免疫系 统接触,检测方法敏感度低等因素有关. 参考文献 1范嘉俊.欧阳武.李长华,等先天性双恻输精管缺如34倒 云南医药,19915.17:3031 2HamtmdehME,AskariAS,GeorgT,etatEffectnffre~thewmg procedureOI2chronmtinstaNlity,morplx~logiealalterationandml~aTl braheintegrityo{humanspermatozoainleftlieandsuNemi~rn帆 lntJAn&e1.1999.22:155.162 3OsawaY.SoeokaK.twataS.etalAssessmencofthedelllil’lea3tab. normalfoanisusefulforpredictingthe0u怔on忙ofintra~ytop1.a~nlic Spod”//1i】1iectioninthecaseofS,e,Vel-~terat.??p?JAs.~istRe— prodG,1999.16:436442 4吴明章.谢文荚.顾红斌.等.男性不育症患者睾丸超徽结构的病 理学研究生殖与避孕,1983.3:3336 5MasekiY,KropfJM白sb0cbsoccuringinthetestfrcrapa tientswithidiopathicmaleinfertilityF’erti【Steril1981.36:814— 817 6HashlmotoJ.GressinerAM.N~,werA.etalIncreasedmastcelts iatlimitingmembraneseneroustulxde~int蚓d龃. dearswithidiopathicLrLfertitityUr0【hat,1988.43:129-132 7于国.于明波.李维华.等.不育症卑丸的超微结构和组织化学研 究解放军医学杂志,1995.200:1008.1100 8才秀莲,李蔼祥,李正非.男性不育症睾丸曲细精管界膜厚度分 析生殖与谱孕,1998,18:242—243 9Potrizio,etLowincidenceofsperman00bodies【nmenwthcongen italabsenceotthev硝deferer~Ferti【Ste,1989,52:1000181021 l0周建生.魏莎莉.宋隆明.等.先天性双侧输精管缺如自身免疫观 察男性学杂志.1992,6:229230 (收稿日期:200012-28) 江西省泌尿外科学术会议召开 江西省泌尿外科学术会议于2001年9月22,24日在鹰潭市召开.马永江,顾方六,梅骅,鲁功成等教授进行了专题讲 座.中华医学会肖梓仁副会长到会祝贺.200余名省内及部分省外和国外工作的江西省籍泌尿外科同道到会,会议收到论文 225篇,涉及泌尿生殖系疾病的基础研究及临床诊治进展,腔内泌尿外科学及体外冲击波碎石微电新技术,男科学和女性泌尿 外科的新发展等.在相继成立江西省泌屎外科学会腔内泌尿外科学与体外冲击波碎石学组和男科学学组的基础上,此 次会议上成~_TdqL泌尿外科学学组.与会代表一致认为,这是一次内容丰富,交流踊跃,组织周密,会风严谨,共叙友情团 结奋进的学术会议.必将有力促进江西省泌尿外科事业的向前发展. (胡峰王共先)