毛细管区带电泳法测定霍香正气胶囊中和厚朴酚的含量

毛细管区带电泳法测定霍香正气胶囊中和厚朴酚的含量 毛细管区带电泳法测定霍香正气胶囊中和 厚朴酚的含量 《激第啶霍香黼勰蔗.6. 毛细管区带电泳法测定霍香正气胶囊中和厚朴酚的含量 梅林,付雪,刘凌云,程正学,石开云 ,,1.后勤学院,重庆400016; f2.重庆科技学院,重庆400060; I3.重庆市光学机械研究所,重庆 4.重庆大学生物工程学院,重庆 提要:日的:建立霍香正气胶囊中和厚朴酚含量测定的毛细管区带电泳(CZE)法.方 法:采用甲醇溶解样品超声制备供试液;运行缓冲液 为40mmol/L硼砂溶液,检测波长254nm.结果:和厚朴酚线性范围0.013— 0.20mg/n,L,r=0.9917(n=5),厚霍香正气胶囊中和厚朴酚的含量为 0.1479m粒.结论:此方法快速简便,可用于评价霍香正气胶囊的质量. 关键词:厚朴;和厚朴酚;毛细管电泳 中图分类号:R965.1文献标识码:A文章编号:0253—2743(2007)06—0090一O1 Determinationofhonokiolinhuoxiangzhengqicapsulebymeansofcapillaryelectrophoresis MEILinj,FUXuc2,LIUUng—vun3,CHENGZheng—xu,SHIKai—yun4 /1.DepartmentofMilitanvOjlApplicatimandManagementEngineering,, II,o~isticalEngineeringUniversity,PIJA,Chongqing400016,China;l I2.ChongqingUniversityofscienceandTechnology,Chongqing4OOO6O,China;l I3.InstituteofChongqingOpticalandMechanism,Chongqing400039,China;I 4.CollegeofBio—Engineering,ChongqingUniversity,Chongqing4OOO44,China;/ Abstract:Objective:DeterminationofhonokiolinHuoxiangzhengqicapsulewasestablishedbycapillaryzoneelectrophoresis.Method:Samplesolutionwas preparedbymethanoldis~lvingsampleandanalytewasmanufacturedbynleansofultrasonic waveextractingmethod.Effecttoseparationwasmeasuredbymeans oftheconcentrationofrunningbuffer40retoolborax.254nmofdeterminationwavelength.R esult:Agoodlinearresponsetowardshonokiolwasattainedfrom0,013 m#mIto0.20mg/mL(r=0.9917,n=5).ThecontentofhonokiolinHuoxiangzhengqicapsule was0.1479rag/granule,whilethenleancontentofhonokiolin Huoxiangzhengqicapsulewas0.1479mg/granule.(;onelusion:Themethodissimple,conve nientandrapid,whichwi11behelpfultoqualityassessmentofHui— Keywords:codexmagnoliaeotticinalis;honokiol;capillaryeletrophoresis 霍香正气胶囊由厚朴,苍术,陈皮,白芷,茯苓,大腹皮等精制而 .HRl = 1a厚朴酚与和厚朴酚的1b霍香正气胶囊的电泳谱图 R1=OH;R2=H厚朴酚; R1=H;R2=OH,和厚朴酚 该文采用毛细管区带电泳法测定霍香正气胶囊中的和 厚朴酚,方法简便,可靠. l实验部分 1.1仪器和试药 毛细管电泳仪P/ACErMMDQ(Beckman公司);未涂敷石 英毛细管(65cm×75/~ani.d.),L=56.0cm(河北永年锐沣色 谱器件有限公司);和厚朴酚对照品(中国药品生物制品检定 所):藿香正气胶囊(太极集团);硼砂,甲醇,氢氧化钠为 纯.实验用水为二次重蒸水. 1.2实验条件 运行缓冲液为40~mnol/L硼砂溶液(0.0lmol/LNa0H调 至pH值l0.50);电泳分离电压15kV(正向电泳):电迁移进 样,l5kV×5s,检测波长为254nm. 毛细管使用前用0.1moL/LNaOH冲洗30min,再用蒸馏 水冲洗10min.每次进样前再用蒸馏水和缓冲液依次冲洗 2min. 1.3对照品及样品供试液制备 精密称定和厚朴酚对照品适量于容量瓶中,用甲醇溶解 后定容.和厚朴酚的浓度为0.40rnL;藿香正气胶囊的处 理:取lmI藿香正气胶囊,加入50%甲醇溶解超声30min,挥 去水分后加入jrnL甲醇溶解,离心后备用. 1,4阴性对照试验 取除厚朴外的其他处方药物,按相同的制剂工艺制成阴 性对照品,取适量按供试品溶液的制备方法,制成阴性对照 品溶液,进样测定,结果表明阴性对照品溶液在和厚朴酚保 留时问位置无干扰. 收稿日期:21307—07—05 (CE】 2结果与讨论 2.1工作曲线的建立 将和厚朴酚对照品溶液稀释到0.20,0.10,0.05,0.025, 0.013mg/mL,在优化条件下电泳,记录和厚朴酚的峰面积,每 个浓度重复运行3次.和厚朴酚的工作曲线:Y=898.37x一 3.15,r=0.9917(n=3).可见,和厚朴酚在0.013—0.20ms/ mL的浓度范围内线性关系良好.和厚朴酚的检测限0.01 mg/ml~(S/N=3:1). 2.2藿香正气胶囊中和厚朴酚的测定 通过加对照品定性,获得和厚朴酚的峰如图lb中标识 峰(峰1)所示.和厚朴酚与相邻峰的分离度R>1.5,满足定 量要求.和厚朴酚的拖尾因子T=1.05,基本符合要求.根 据标准曲线计算出藿香正气胶囊中和厚朴酚的含量为0. 1479m粒. 2.3方法学考察 2.3.1精密度试验取对照品溶液(0.10rag/mE)重复进样5 次,测定和厚朴酚含量,具RSD为3.95%(n=5). 2.3.2稳定性试验取同一批号样品在0h,4h,8h,16h,24h, 48h进样测定和厚朴酚含量,其RSD为4.86%(n:3).结果 表明样品在48h内基本稳定. 2.3.3重复性试验取同一批号样品5份,分别按供试品溶 液制备,同前操作,测定和厚朴酚含量,其RSD为5.6l%(n= 5) 2.3.4加样回收率测定在已知和厚朴酚含量的胶囊中精 密加入一定量的和厚朴酚对照品,然后按1.3项下冲剂提取 液的制备方法进行制备供试品,并按2.2项进行和厚朴酚含 量检测,每个浓度重复运行3次,其结果如表1所示. 表1霍香正气胶囊加样回收率试验(n=3j 总之建立起了藿香正气胶囊中和厚朴酚含量测定的毛细管区带 电泳分析方法.为进一步研究厚朴制剂的质量控制提供了,一种行之 有效的分析方法. 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[s].(2005版第一部) [M].北京:化学工I出版社,2005,662—663.