维生素c测定方法

维生素c测定方法 维生素C的测定方法 郑世豪 {摘要}: 维生素C亦称抗坏血酸，具有氧化还原功能，广泛参与细胞间质的合成及解毒过程等作用，它能帮助减低臭氧、二氧化碳等空气污染毒性抑制膳食中有致癌作用的亚硝胺的合成，还具有降低血铅浓度的作用，既能保持皮肤弹性，延缓衰老，又有助于消除人体不可缺少的营养素之一，故许多人把它作为防病治病的灵丹妙药，殊不知应用合理与否，会产生不同的作用。 {关键词}:维生素C 测定原理、检测方法 引言 维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定，维生素C开始氧化为脱氢型抗坏血酸(有生理作用)。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。本文总结近年来的文献报道维生素C测定方法主要有滴定法、荧光法、光度分析法、高效液相色谱法。 滴定法测定维生素C 1.1测定原理 2，6一二氯靛酚法和碘量法是较常见的滴定测定维生素C的方法。还原型抗坏血酸还原染料2，6一二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6一二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原2， 6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。 碘量法的原理:维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种，当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂(淀粉)的溶液产生蓝色，即为滴定终点。 1.2测定操作 2，6一二氯靛酚法:取适量的样品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，制成匀浆。取同一样品匀浆10g，加入1%草酸溶液20 mL，摇匀，用滤纸过滤，取5mL过滤液于锥形瓶中，用2，6一二氯靛酚钠盐溶液滴定(1 mL?0.02 mgVitC)，以淡红色存在30 s内不褪色为滴定终点。记录2，6-二氯酚靛酚钠盐溶液的消耗量，根据结果计算出样品中维生素C含量(mg/100 g)。 碘量法的原理:维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种，当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂(淀粉)的溶液产生蓝色，即为滴定终点。 荧光法测定维生素C 1.1测定原理: Deutsch和Weeks曾经报道过一种检测维生素C的荧光分析法(OPDA)，并被指定为维生素C的经典荧光分析法。在该方法中，维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物，通过对该荧光产物的检测实现对维生素C的定量分析。孙振艳等[1]提出了一种新的测定维生素C的荧光分析方法。基于维生素C被Cu2+氧化为DHAA，DHAA进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用，通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。 1.2测定操作: 荧光分析法(OPDA)的测定方法:称取一定量样品，研磨后用水浸泡，取清液加入适量1%草酸溶液，振摇约3min，加入0.2g已处理好的活性炭再充分振摇约3min后过滤，滤液加于两个25mL比色管再加入5.0mL缓冲溶液,，其中一管加入2.0mL硼酸溶液(即空白)摇匀，放置15min后，两管均加入邻苯二胺溶液10mL，避光放置30min待测。样品荧光强度减去空白荧光强度值即为样品相对荧光强度值。 孙振艳等的荧光分析法:在25 mL比色管中依次加入0. 6 mL CuSO4溶液，2. 0 mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，2. 0 mL苯甲酸溶液，一定体积的维生素C标准溶液，，5. 0 mLNaOH-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，用蒸馏水定容，摇匀。在35?恒温水浴中加热30 min，将溶液流水冷却至室温，激发波长为308 nm，在发射波长408nm处，测量荧光强度F，以不含维生素C的试剂空白为F0，计算ΔF=F-F。 光度分析法测定维生素C 1.1测定原理 2，4-二硝基苯肼法和钼蓝比色法是常见测定维生素C的一种光度分析法。2，4-二硝基苯肼法的原理是总维生素C包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。钼蓝比色法是测定果蔬中还原型维生素C含量的一种常用方法，因偏磷酸和钼酸铵反应生成的磷钼酸铵经还原型的维生素C还原后生成亮蓝色的络合物，通过分光比色可以测定样品中还原型维生素C的含量。 1.2测定操作 2，4-二硝基苯肼法:取适量的样品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，制成匀浆。取匀浆20 g (含1~2 mg抗坏血酸)置入100 mL容量瓶中，用1%草酸溶液定容，混匀后过滤。取25 mL过滤液放入有2 g活性炭的25 mL比色管中，振摇1 min，过滤。然后取10 mL此氧化提取液，加入10 mL 2%硫脲溶液，混匀。按照GB12392-90中呈色反应方法，用分光光度计进行比色，根据结果计算出样品中抗坏血酸含量。按下式计算样品中Vc的含量:X=c?Vm×F×1001000。 X—样品中总抗坏血酸含量，mg/100g; c—由标准曲线查得或回归方程算得“样品氧化液”总抗坏血酸的浓度，μg/mL; V—试样用1%草酸溶液定容的体积，mL; F—样品氧化处理过程中稀释倍数; m—试样质量，g。 钼蓝比色法:准确称取 100 g 样品， 加入草酸,EDTA 溶液， 经捣碎后移入 100 mL 容量瓶，定容，过滤，吸取 2 mL 上清液于 50 mL 容量瓶中，加入 1 mL 的偏磷酸,醋酸溶液，5,的硫酸 2(0 mL，摇匀，加入 4 mL 钼酸铵，以去离子水定容至 50 mL，20 min 后测定吸光度。 参考文献: [1]. 陈晓红, 碘量法测定维生素C含量微型实验研究. 广东微量元素科学, 2007(03). [2]. 肖彦春等, 测定蔬菜中还原型维生素C两种方法的比较. 湖北农业科学, 2011(05). [3]. 刘军凯等, 常见蔬菜中维生素C含量的研究. 广东微量元素科学, 2006(04). [4]. 张冬梅等, 对新鲜果蔬中维生素C的测定结果影响因素研究. 江西化工, 2010(01). [5]. 张秀梅等, 高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C含量. 福建果树, 2007(01). [6]. 薛萍, 果蔬中维生素C测定方法的比较研究. 广东轻工职业技术学院学报, 2009(04). [7]. 刘荣森与刘建超, 果蔬中维生素C含量的测定方法. 河南农业, 2012(02). [8]. 刘绍俊等, 钼蓝比色法测定沙田柚果肉中还原型维生素C含量的研究. 北方园艺, 2011(01). [9]. 孙振艳等, 荧光分析法测定维生素C. 化学分析计量, 2006(04). [10]. 陈昌云, 李小华与刘莉莉, 高效液相色谱法测定蜜柚中维生素C的含量. 化工时刊, 2007(08). [11]. 王爱月, 张向兵与李发生, 高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素C含量的研究. 中国卫生检验杂志, 2006(10). [12]. 凌育赵与刘经亮, 猕猴桃果酱中维生素C测定方法的比较研究. 中国调味品, 2009(02). [13]. 刘长建, 青椒中维生素C的高效液相色谱分析. 大连轻工业学院学报, 2004(03). [14]. 吴春艳, 水果中维生素C含量的测定及比较. 武汉理工大学学报, 2007(03). [15]. 李秋菊, 王亚红与刘秀萍, 维生素C的测定方法. 太原师范学院学报(自然科学版), 2005(01). [16]. 崔香与寇雪玲, 荧光分析法测定枸杞中维生素C. 青海师范大学学报(自然科学版), 2009(02). [17]. 张捷莉, 高雨与侯冬岩, 紫外分光光度法测定维多康中维生素C的含量. 食品科学, 2004(11). [18]. 王云霞, 张会轻与郭磊, 滴定法测定维生素C含量. 河北化工, 2008(08). [19]. 杨新斌, 维生素C含量的测定. 四川化工与腐蚀控制, 2001(02). [20]. 谢志方, 氢氧化钠两点电位滴定法测定维生素C含量. 广州化工, 2011(15).