血清总胆汁酸

血清总胆汁酸 血清总胆汁酸(TBA)测定 1 目的 总胆汁酸(TBA)是胆甾醇在肝内分解以及在肠—循环中胆汁酸代谢产物的总称。又称为初级胆汁酸和二级胆汁酸。 血清胆汁酸水平反应肝实质性损伤，尤其在急性肝炎，慢活肝，酒精性肝损伤和肝硬 化时有较灵敏的改变，是肝病实验室诊断的一项重要指标。 2 测定方法 循环酶速率法 3 原理 胆汁酸被3α—羟基类固醇脱氢酶及Thio—NAD特异性氧化，生成3—酮类固醇及Thio—NADH。此外，生成的3—酮类固醇在3α—羟基类固醇脱氢酶及NADH存在下,生成胆汁酸和NAD。如上述，循环往复从而放大微量的胆汁酸量，测定生成的Thio—NADH吸光度的变化，以求得胆汁酸值。 4 标本 4.1 静脉抽取病人空腹血，置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。 4.2 采血后应立即送到检验科生化室。 04.3 样品收到后立即分离血清，不能及时测定的血清应于2-8C保存。 4.4 严重溶血或脂血的标本不能测定。 5 设备及试剂 5.1 日立7600全自动生化仪。 5.2 美康总胆汁酸试剂。 5.3 总胆汁酸试剂应贮存于2—8?冰箱。 6 操作步骤 6.1样本的准备:将编好号的样品离心，取血清加入样品杯放到样品盘的规定位置，再把 样品盘放到仪器中相应位置。 6.2试剂的检查:每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标等情况，认无误后方可 进行测定。 6.3 操作方法:详见7600生化仪操作手册。 7 校准程序 7.1 校准品的准备和储存 我室使用的校准品是朗道混合校准品，浓度为一定值校准品，根据批号浓度有一定的差异。使用时从冰箱中拿出，室温放置一段时间后放入编辑好的架子位置上，根据校准程序进行操作。 7.2 校准条件 在室内质控失控，更换仪器主要零配件，进行仪器大保养后和定期校准时均需校准。 7.3 校准程序 将液体校准品恢复室温后放置在编辑好的架子位置上。在calibration界面中选择TBA校准，选择校准方法，再放上校准架子，再点击Start，开始进行校准。 8 质量控制程序 8.1 控制品的准备和储存 将分装的朗道混合质控从保存负30度冰箱启用前取出，室温放置30分钟待完全融化后使用。 8.2 质控品水平和分析批长度 每24H至少进行1次质控，根据我室情况，进行1个中值质控。待质控在控后方可进行常规样本的操作。 8.3 质控操作程序 将复溶后的质控品放置在编辑好架子位置上的，选择QC界面下的待测项目TBA,放上质控架子，点击Start，即开始质控操作。 9 干扰因素 9.1 重度黄疸，溶血，VitC含量过高对测定有影响。 9.2 尽量使用新鲜标本，标本中任何细菌生长都会改变胆汁酸浓 度。 9.3 应采取空腹血测定。 10 参考区间 0—9.67μmol/L 11 检验结果的解释 本法对TBA的检测范围为0-180UMOL/L,当样品测定值超过上限，应将样品用生理盐水进性稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。 12 检验方法的局限性 12.1.当样品中甘油三脂浓度>20mmol/l,抗坏血酸浓度>2540umol/l,胆红素浓度>342Umol/l,血红蛋白浓度>5.0g/l时对测定结果有干扰。 12.2.TBA测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者体征，病史及其它诊断项目、诊断手段进行综合判断。 13 产品性能指标 13.1 线性范围:0-180 UMOL/L 13.2 重复性:测量精密度<=4%,批间差<=8% 13.3 准确度:相对偏差<=10% 14 实验室解释 血清总胆汁酸是肝实质性损伤及消化系统疾病的一个较灵敏的诊断指标。在急、慢性 肝炎，肝硬化，酒精性肝病，胆汁淤积等情况，血清TBA均有不同程度升高，其变化早 于胆红素，此外也有助于估计预后及提示病情复发，其生高早于转氨酶活性变化，甚至 早于肝活检组织学所见。 15 异常结果处理 实验结果应与临床诊断相符，不符的重新测定。 16 安全防护措施 一切标本均应视为传染源，故操作过程中应戴手套、口罩。不小心接触了标本时，立即 消毒液浸泡，擦拭被污染区域并进行消毒处理。所有检查过的血液样本及有关用清水冲洗， 废弃物，都存在潜在危险，应统一集中由医院环境卫生部门处理。 17 检验项目的校准周期表:见项目SOP后附的生化项目校准周期表。 18 试剂使用的加载程序及注意事项:见项目SOP后附的试剂加载程序 19 危急值提示:该项目无危急值。 20 室内质控使用频率表:见项目SOP后附的生化项目质控安排表。 21 参考文献 [1]叶应妩、王毓三主编，全国临床检验操作规程，中华人民共和国卫生部医政司、南京、第二版、1997。 [2]管正大主编，医学检验临床意义手册，人民军医出版社，北京、第一版、1994。 [3]王淑娟、周惠平、夏铁安主编，现代实验诊断学手册，北京医科大学、 协和医科大 。 学联合出版社，北京、第一版、1995