紫外分光光度法测定维生素C的含量

紫外分光光度法测定维生素C的含量 江苏食品药品职业技术学院工业分析与检验技能大赛 仪器分析操作考核考 紫外分光光度法测定未知样 一、仪器与试剂 1.仪器 紫外分光光度计(瑞利1801型);配石英比色皿(1cm):2个; 容量瓶: 100mL 10个; 吸量管:10mL 6支(其中1支已校准)，5mL1支; 移液管: 25mL 1支; 量杯(筒):5mL、10mL各1只; 烧杯:500mL 1个，250mL 1个，100mL 6个; 2.试剂 三种标准溶液试剂，编号为A、B、C，浓度见试剂瓶标签，其中一种与未知试液是同一种物质。 待测液:未知试液(浓度范围标注) 以上所用试剂均用优级纯试剂配制，用水为去离子水。 二、实验操作 1(未知试液的定性分析 将A、B、C三种标准溶液试剂和未知试液配制成浓度合适的待测溶液(配制方法由选手自定，配制次数不限，要求所得吸收光谱曲线最大吸收波长处的吸光度小于1)，以蒸馏水为参比，在合适的波长范围内(选手自行选择)，测定四种溶液吸光度，并作吸收曲线(仪器绘制或自绘)。通过比对谱图确定未知试液的名称，从吸收曲线上确定最大吸收波长作为定量测定时的测量波长。 2(标准曲线的绘制及未知试液含量的测定 合理配制标准系列溶液，在最大吸收波长处，以蒸馏水为参比，测定标准系列溶液各自吸光度。以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 根据定性分析中未知试液的测定情况，合理确定待测液的稀释倍数，配制出合适的待测未知试液(平行测定三份)。 平行测定后以相对平均偏差衡量其精密度。 三、实验结果 (一)未知试剂的定性分析及测定波长选择 1、定性扫描溶液:标准溶液A的吸收光谱曲线 2、定性扫描溶液:标准溶液B的吸收光谱曲线 3、定性扫描溶液:标准溶液C的吸收光谱曲线 1 4、定性扫描溶液:未知试液的吸收光谱曲线 结论1:根据仪器分析操作，比对三种标准溶液和未知试液配制后溶液扫描得到的谱图，确定未知试液的名称为: 。 结论2:未知试液的的最大吸收波长: 。 (二)未知试样的定量测量 1(标准储备溶液的稀释情况 稀释次数 吸取溶液体积定容体积/mL 稀释次数 吸取溶液体积/mL 定容体积/mL /mL 第一次稀 第四次稀释 释 第二次稀 第五次稀释 释 第三次稀 第六次稀释 释 2(标准曲线的绘制 (测量波长:__________;标准使用溶液浓度:_________) 溶液代号 吸取标液体积，mL ρ，μg/mL A 0 1 2 3 4 5 6 3(未知试液的稀释情况 稀释次数 吸取溶液体积/mL 定容体积/mL 稀释次数 吸取溶液体积/mL 定容体积/mL 第一次稀释 第四次稀释 第二次稀释 第五次稀释 第三次稀释 第六次稀释 4(未知物含量的测定(未知试液的总稀释倍数:_________) 平行测定次数 1 2 3 吸光度，A 查得的浓度，µg/mL 原始试液浓度，µg/mL 2 (请在标准曲线上标注曲线名称、比色皿规格，打印后放于实验记录后面) 定量分析结果:原始未知试液浓度为__________________。 裁判签名: ________________ 注:所有待测液稀释过程、测定过程或结果数据均须经裁判员过目确认才算有效。 定量测定时，摇动前所有容量瓶的定容刻度均须裁判员确认才能进行下步操作。 3