瑞美科皮肤黏膜抗菌护理喷剂杀菌性能的实验研究

瑞美科皮肤黏膜抗菌护理喷剂杀菌性能的实验研究 瑞美科皮肤黏膜抗菌护理喷剂杀菌性能的 实验研究 江苏卫生保健2011年5月第l3卷第3期 【疾病防治】 瑞美科皮肤黏膜抗菌护理喷剂杀菌性能的实验研究 冒华?吴晓JCz~~石根勇?徐燕? (?苏州瑞美科生物技术有限公司,江苏苏州225513?江苏省疾病预防控制中心,南京210009) 【摘要】目的i观察瑞美科皮肤黏膜抗茵护理喷剂杀茵性能.方法:采用悬液定量杀菌试验, 对该喷剂进行实验效果观察.结果:喷剂原液作用2min,对悬液内金黄色葡萄球菌,大肠杆菌的 杀灭率分别为99.75%,99.00%;作用5min,对铜绿假单胞茵,白色念珠茵的杀灭率分别为 96.35%,96.97%.雌雄小鼠经口LD50值均>5000mg/kg,属实际无毒级.雌雄大鼠急性经呼 吸道LC50值均>10000mg/m,属实际无毒级.对家兔皮肤刺激反应积分均值为0,为无刺激 性.对家兔眼刺激性反应分级为无刺激性.对家兔阴道黏膜刺激指数为0.56,阴道黏膜刺激强 度为无刺激性.对豚鼠未见皮肤变态反应.结论:该喷剂对微生物有较好的杀灭效果,属实际无 毒级,对家兔皮肤,眼,阴道黏膜无刺激性. 【关键词】抗茵护理喷剂;壳寡糖;聚六亚甲基单胍;杀菌率;毒性4激性 【中图分类号】R73.31【文献标识码】B【文章编号】1008—7338(2011)03—0001—03 瑞美科牌皮肤黏膜抗菌护理喷剂是一种天然多 糖类产品,主要成分为壳寡糖6.0%,聚六亚甲基单胍 0.30%,主要用于皮肤黏膜的护理和抗菌.为了解其 杀菌性能,观察其对微生物的杀菌效果及安全性能, 进行了专题实验观察,现将观察结果如下. 1材料与方法 1.1试验材料 1.1.1试验菌株金黄色葡萄球菌(ATCC6538), 大肠杆菌(8099),铜绿假单胞菌(ATCC15442),白色 念珠菌(ATCC10231)均为第5代,由军事医学科学 院提供. 1.1.2试验动物健康白色豚鼠由无锡市惠山江南 实验动物场提供;健康无皮疾新西兰白兔由金陵种兔 场提供;健康ICR小鼠由南京医科大学实验动物中心 提供;健康SD大鼠由南京医科大学实验动物中心 提供. 1.1.3消毒剂皮肤黏膜抗菌护理喷剂由壳寡糖 6.O%,聚六亚甲基单胍0.30%复配而成,由苏州瑞 美科生物技术有限公司提供. 1.2试验方法 1.2.1茵悬液的制备试验菌为金黄色葡萄球菌 (ATCC6538),大肠杆菌(8099),铜绿假单胞菌 (ATCC15442),白色念珠菌(ATCC10231),由军事 医学科学院消毒检测中心提供.将各试验菌进行增 菌培养,分离培养单个菌落,取典型菌落接种于琼脂 培养基斜面,培养24h.将新鲜斜面培养物用胰蛋白 胨生理盐水洗下,混合均匀稀释制备成菌悬液 (TPS). 1.2.2中和剂鉴定试验试验菌为铜绿假单胞菌和 白色念珠菌,试验8组,按悬液定量杀菌试验程 序进行中和剂鉴定试验.试验结果,第1组无试验菌 或仅有极少数试验菌菌落生长;第2组有且较第l组 为多,较第3,4,5组为少的试验菌菌落生长;第3,4,5 组间菌落数误差率不超过15%;第6组无菌生长.重 复3次试验,每次试验结果一致,表明所选择中和剂 符合要求. 1.2.3悬液定量杀茵试验参照GB15982—2002, 将试验菌24h斜面培养物,用磷酸盐缓冲液(PBS)洗 下,制成菌悬液(要求的浓度为:回收菌数为1×10, 9×10efu/mL).取0.1mL上述菌悬液加入5mL样品 (对照采用5mLPBS),混匀,分别作用2,5,l0, 20min后,用吸管吸取0.5mL投入含4.5mL相应中和 剂的试管内,充分混匀,作适当稀释,然后取其中2—3 个稀释度,分别吸取0.5mL,置于两个平皿,用凉至 40~C一45?的营养琼脂培养基(细菌)或沙氏琼脂培 养基(酵母菌)15mL作倾注,转动平皿,使其充分均 匀,琼脂凝固后翻转平板,(35?2)cI=培养48h(细 菌)或72h(酵母菌),作活菌菌落计数.试验重复3 次,计算杀菌率:X,=(A—B)/A×100%(A:对照样 品平均菌落数;B:被试样品平均菌落数),杀菌率? ? 2? 90%,样品有杀菌作用. 1.2.4急性经口毒性试验(小鼠)参照《消毒技术 》急性经口毒性试验,测定方法为:一次最大限度 试验.动物禁食过夜后,取受试物以5000mg/kg,经 口一次灌胃,灌胃容量均为20mL/kg,给药后4h给 食.观察期14d. 1.2.5急性吸入毒性试验(大鼠)参照《消毒技术 规范》急性吸人毒性试验,测定方法为:一次最大限度 试验.1m染毒柜静式染毒,雌雄分批染毒,每只鼠 染毒空间50L/h.将样品置于喷雾器中直接喷人染 毒柜中染毒,同时开启染毒柜搅拌系统,使受试物均 匀散布,用减重法求得染毒浓度.2h后取出动物,观 察2W.观察并记录动物的中毒表现,恢复时间.试 验结束时人道处死动物,立即进行大体解剖检查. 1.2.6皮肤变态反应试验动物随机分入受试动物 组与阴性对照组,每组16只.每次涂皮前24h背部 去毛备皮3cm×3cm.致敏接触:取O.5mL受试物滴 在2em×2em的二层纱布上,并敷贴于受试物组左侧 去毛区,以一层油纸覆盖,并用胶布封闭固定6h.第 7d,第14d以同样方法重复1次.激发接触:末次致 敏后14d,受试物组与阴性对照组脊柱右侧去毛备皮 3em×3em,次日取0.5mL受试物同致敏接触方法敷 贴在备皮区,一层油纸覆盖,胶布封闭固定6h,6h后 将敷贴的受试物洗去,激发接触后24h~'1148h皮肤反 应.阳性对照物为2,4一二硝基氯苄,丙酮:麻油 (1:1v/v)溶液作为溶剂,诱导浓度和激发浓度分别 为2.5%(w/v),1.0%(w/v)步骤同试验组. 1.2.7一次皮肤刺激试验动物试验前24h脊柱两 侧剪毛备皮各约3em×3cm,次日取受试物0.5mL, 滴于面积为2.5em×2.5em的2层纱布上,并敷贴在 一 侧去毛完整皮肤上,用1层油纸覆盖,然后以无刺 激胶布固定,另一侧不处理作空白对照,敷用4h后以 温水洗去残余受试物,于1,24,48h后观察并记录皮 肤反应. 1.2.8多次完整皮肤刺激试验动物试验前24h脊 柱两侧剪毛备皮各约3cm×3em,次日取受试物 0.5mL,涂抹在一侧去毛皮肤上,另一侧涂蒸馏水作 为对照,涂抹面积为2.5emx2.5cm,每天涂抹一次, 连续涂抹14d.涂抹后4h,用温水清洗,除去残余 物,24h后观察结果. 1.2.9多次阴道黏膜刺激试验动物仰面固定,暴 露出会阴和阴道口.将小号消毒导尿管与2mL注射 器连接,导管用受试物湿润后轻柔地插入动物阴道内 5cm),并用注射器缓慢注入2mL受试物,抽出 (4— 导管,完成染毒.每隔24h重复染毒一次,连续5d. HealthCare.May.2011,Vot13,—3 对照组动物用生理盐水作同样处理.末次染毒后 24h采用气栓法处死动物,剖腹取出完整的阴道,纵 向切开,肉眼观察有无充血,水肿等表现,供病理取材 时参考.将阴道放入10%福尔马林中固定24h以上, 选取阴道的两端和中央3个部位的组织制片,HE染 色后进行组织病理学检查. 1.2.10急性眼刺激试验取受试物0.1mL直接置 人家兔一侧眼结膜囊内,被动闭合眼睑4S,30s后用 生理盐水冲洗,另一眼滴以生理盐水作为对照.于滴 眼后1,24,48,72h观察记录眼刺激反应. 1.2.11稳定性试验将原包装样品置54?一57? 恒温箱内14d,保持相对湿度>75%,进行杀菌性能 测试. 2结果 2.1中和剂鉴定试验结果用2%皂基,4%卵磷脂, 6%吐温80的PBS作为中和剂,可有效中和皮肤黏膜 上抗菌护理喷剂原液对试验菌的残留作用,对试验菌 株均无不良影响.见表l. 表1中和剂鉴定试验结果 不同试验菌株回收菌量(efu/mL) 铜绿假单胞菌白色念珠菌 2.2对微生物的杀灭效果皮肤黏膜抗菌护理喷剂 原液作用2min对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌的杀灭 率分别为99.75%,99.oo%,作用5min对铜绿假单胞 菌,白色念珠菌的杀灭率分别为96.35%,96.97%,且 随作用时间的延长杀灭效果随之增强.见表2. 表2抗菌护理喷剂作用不同时间的杀菌率(%) 注:试验温度为(20.4-1)?,阳性对照菌量2.55×10一7.60 ×10efia/mL,阴性对照无菌生长. 2.3急性经口毒性试验(小鼠)2O只实验动物(雌 雄各半),染毒后未见明显中毒表现,观察期内无死 亡,大体解剖未见明显异常.雌雄小鼠经口LD?值均 大于5000mg/kg,抗菌护理喷剂属实际无毒级. 江苏卫生保健2o11年5月第13卷第3期 常州市武进区乙肝流行趋势分析 ? 3? 【疾病防治】 臧民德?朱洪鸣? (?常州市武进区礼河卫生院,江苏武进213145?常州市武进区疾病预防控制中 心,江苏武进213164) 【摘要】目的:了解常州市武进区2004--2010年乙肝发病情况,为今后的防治工作 提供依 据.方法:采用描述性流行病学方法对2004--2010年武进区乙肝疫情监测资料进行 统计分析. 结果:2Oo4_2Ol0年武进区共报告乙肝2950例,年平均发病率为28.30/10万,总体 上乙肝发病 率呈下降趋势,高发年龄为20,39岁组,职业以农民,民工和工人为主.结论:常州市 武进区乙 肝发病率呈逐年下降趋势,但仍应加大预防控制力度. 【关键词】乙肝;疫情;趋势预测 【中图分类号】R512.62【文献标识码】B【文章编号】1008—7338(2011)03—0003 —02 常州市武进区于1992年起将新生儿乙肝疫苗接 种纳入免疫,乙肝发病率逐年下降.为探讨流行 --2010 规律,制定相应的防制对策,现将武进区2004年乙肝疫情进行流行病学分析,并对其发病率变动趋 势进行预测,为今后的乙肝防治提供科学依据. 1资料与方法 1.1资料来源乙肝病例资料来自常州市武进区 2004--2010年国家疾病监侧信息报告管理系统,人 口资料来自武进区公安局. 1.2统计方法对乙肝病例的分布进行流行病学分 析,并且利用灰色系统模型分别预测2011_2Ol5年 武进区乙肝发病趋势,模型参数估计采用SPSS软件 包完成. 2.4急性吸入毒性试验(大鼠)2O只实验动物(雌 雄各半),染毒后未见明显中毒表现,观察期内动物无 死亡,大体解剖未见明显异常.雌雄大鼠急性经呼吸 道LC?值均大于10000mg/m,抗菌护理喷剂属实际 无毒级. 2.5皮肤变态反应试验20只实验动物接触抗菌护 理喷剂,未见任何皮肤反应,受试物致敏率为0,根据致 敏强度分级标准未见皮肤变态反应.见表3. 表3豚鼠皮肤变态反应(致敏)试验结果 … 24h48h 注:阳性对照组致敏率为100%,为极强度致敏物. 2.6皮肤刺激试验抗菌护理喷剂对家兔进行一次 性皮肤刺激反应,积分均值为0,刺激强度为无刺激 性.经14d抗菌护理喷剂对4只家兔多次完整皮肤 刺激,反应积分均值为0,刺激强度为无刺激性. 2.7多次阴道黏膜刺激试验肉眼观察试验组动物 阴道黏膜正常.抗菌护理喷剂对家兔阴道黏膜刺激指 数为0.56(阴道黏膜刺激指数=X试验组一X对照组= 1.56一1.O0=0.56).阴道黏膜刺激强度为无刺激性. 2.9急性眼刺激试验抗菌护理喷剂对家兔急性眼刺 激f生为无刺激性.未见刺激陛以外的其他毒性作用. 2.1O稳定性试验抗菌护理喷剂对铜绿假单胞菌 作用20min杀灭率为99.95%;54c【=存放14d后,为 93.63%.见表4. 表4抗菌护理喷剂作用不同时间对铜绿 假单胞菌的杀灭率(%) 注:试验温度为(20?I)?,阴性对照均无菌生长. 3讨论 本研究结果证明,以壳寡糖,聚六亚甲基单胍复 配而成的皮肤黏膜抗菌护理喷剂,对细菌繁殖体,医 院感染常见致病菌,酵母菌有较好的杀灭效果,对家 兔皮肤,阴道黏膜,眼无刺激性,对豚鼠未见皮肤变态 反应,小鼠急性经口毒性试验和大鼠急性吸人毒性试 验结果表明该喷剂属实际无毒级,可广泛用于皮肤黏 膜的护理,抗菌. (2010—04—10收稿)