独活香豆素组分对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响_18799

独活香豆素组分对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响_18799 独活香豆素组分对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响 [标签:来源] 作者:王德才,李同德,徐晓燕 【摘要】 目的 观察独活香豆素组分(TCA)对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响。方法 将小鼠随机分为溶媒(5%吐温-80,20 mL/kg)、氯霉素(25 mg/kg)及TCA(50、100 mg/kg)组, 等容灌胃给药1 h后,再腹腔注射戊巴比妥钠40 mg/kg或巴比妥钠200 mg/kg,观察催眠潜伏 期和催眠时间。结果 氯霉素和高、低剂量的TCA使戊巴比妥钠的催眠时间延长249.8%、171.1% 和78.7%,均P<0.01;对巴比妥钠的催眠作用无明显影响。结论 TCA对小鼠肝微粒体细胞色 素P450具有一定的抑制作用。 【关键词】 独活香豆素;戊巴比妥钠;巴比妥钠;催眠作用;小鼠 Abstract:Objective To observe the influence of the coumarins from Radix Angelicae pubescentis (TCA) on the hypnotic effects of pentobarbital sodium and barbital sodium. Methods Mice were randomly divided into solvent (5% Tween-80, 20 mL/kg), chloromycetin (25 mg/kg) and TCA (50, 100 mg/kg) groups, which were administered orally with equivalent volume. One hour later, all the animals were given pentobarbital sodium (40 mg/kg, ip) or barbital sodium (200 mg/kg, ip), and then the latent period and duration of hypnosis were observed. Results Hypnotic duration of pentobarbital sodium was prolonged by 249.8%, 171.1% and 78.7% in chloromycetin and two TCA groups respectively (P<0.01), and yet hypnotic effect of barbital sodium was hardly influenced. Conclusion TCA is likely to inhibit liver microsomal cytochrome P450 activity in mice. Key words:coumarins from Radix Angelicae Pubescentis;pentobarbital sodium; barbital sodium;hypnotic effect;mice 独活中所含的主要成分香豆素类化合物具有抑制血小板聚集和抗血栓形成的作用,从而 产生活血通络之功效。有资料显示,来源于葡萄柚的5种香豆素类化合物可抑制肝微粒体细胞 色素P450(cytochrome P450,CYP),干扰许多药物的代谢, 提高血药浓度,诱发毒副反应,已格 外引人注目[1]。为了解独活中总香豆素组分(total coumarins from Radix Angelicae Pubescentis, TCA)对CYP活性的影响,本实验以戊巴比妥钠催眠时间作为CYP体内活性指标, 观察其对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响。现报道如下。 1 材料与方法 1.1 动物 昆明种小鼠,体重(20?2)g,雌雄各半,本院实验动物中心提供,合格证号:鲁动质字0030011。 1.2 独活及其香豆素组分的提取分离 独活药材购自安徽亳州药材市场,经本院中药学教研室鉴定为伞形科植物重齿毛当归的干燥根,属正品独活。取独活1.0 kg粉碎过40目筛,以甲醇浸泡24 h后,回流提取3次,每次2 h。合并滤液,回收甲醇,所得的甲醇浸膏用乙醚萃取,适宜浓缩,反复冰室过夜,共得淡黄色结晶物2.33 g,即为TCA。经异羟肟酸铁反应证实为香豆素类化合物。参考文献[2-3]方法,以欧前胡素(中国药品生物制品检定所,批号0836-9401)为对照品,用紫外分光光度法测得TCA含量为68.4%。实验前以吐温-80为助溶助悬剂,配成0.5%和1.0%的混悬液供实验用。 1.3 药物与试剂 氯霉素,南京第二制药厂,批号020615;巴比妥钠,山东淄博化学试剂厂,批号950503;戊巴比妥钠,中国医药(集团)上海化学试剂公司,批号F20020405。 2 实验方法 2.1 TCA对戊巴比妥钠催眠作用的影响 取小鼠60只,随机分为4组,每组15只,分别给予5%吐温-80(溶媒对照组)、0.125%氯霉素、0.5%和1.0%TCA混悬液20 mL/kg灌胃。给药后1 h再分别腹腔注射戊巴比妥钠40 mg/kg。室温23,25 ?,腹腔注射戊巴比妥钠时间均在上午9时左右。以小鼠翻正反射消失和恢复作为“入睡”和“苏醒”的指标,计算戊巴比妥钠对小鼠的催眠潜伏期(从ip戊巴比妥钠至翻正反射消失的间隔时间)和催眠时间(从翻正反射消失至恢复的间隔时间)。 2.2 TCA对巴比妥钠催眠作用的影响 取小鼠60只,随机分为4组,每组15只,实验条件、给药剂量和方法同“2.1”项。给药1 h后,腹腔注射巴比妥钠200 mg/kg。同上法观察巴比妥钠对小鼠的催眠潜伏期和催眠时间。 2.3 统计学方法 用SPSS10.0软件进行统计,数据以x?s示,组间比较采用q检验。 3 结果 (见表1、表2)表1 TCA对戊巴比妥钠催眠作用的影响(略注:与溶媒对照组比较,*P<0.01; 与氯霉素组比较,?P<0.01。表2 TCA对巴比妥钠催眠作用的影响((略) 4 讨论 肝微粒体CYP酶系统是药物代谢的关键酶,也俗称肝药酶。药物对CYP活性的影响是药物间相互作用最重要的机制。戊巴比妥钠主要由CYP代谢而灭活,仅1%左右以药物原型经肾排泄,故催眠时间的长短反映了戊巴比妥钠在体内代谢速度的慢或快,对其催眠作用的影响可以间接地反映对CYP活性的影响[4]。但是,药物的中枢抑制或兴奋效应也可能延长或缩短戊巴比妥钠的催眠时间。巴比妥钠脂溶性低,主要以原形经肾排泄,仅3%左右经CYP代谢而灭活[5],其催眠时间的长短受药物中枢作用的影响,基本不受CYP抑制或诱导的影响[6]。实验发现,50、100 mg/kg的TCA对巴比妥钠的催眠潜伏期和催眠时间影响不显著,提示其中枢兴奋或抑制作用不明显;对戊巴比妥钠的催眠潜伏期影响不明显,但使其催眠时间延长,与溶媒对照组比较具有极其显著的差异,提示TCA对小鼠CYP有抑制作用。因CYP的抑制,致使戊巴比妥钠在小鼠体内代谢灭活减慢,血药浓度降低变慢,呈现催眠时间的显著延长。 CYP同工酶种类繁多,本实验采用的阳性对照药氯霉素对参与临床常用药物代谢的7,8种CYP同工酶均有很强的抑制作用,选择性不明显[7]。本实验结果表明,独活中香豆素组分能明显抑制CYP活性,其作用强度虽弱于氯霉素,但仍可能干扰许多临床药物的代谢。独活中香豆素类成分达数十种,以蛇床子素(osthole)、二氢欧山芹素(columbianadin)、二氢欧山芹醇(columbianetin)、欧前胡素(imperatorin)、异欧前胡素(isoimperatorin)等含量较高,但是何种单体成分发挥主要作用,以及对CYP主要同工酶有无选择性,还有待于进一步探讨。 【参考文献】 [1] Tassaneyakul W,Guo L-Q, Fukuda K,et al.Inhibition selectivity of grapefruit juice components on human cytochrome P450[J].Arch Biochem Biophys,2000,378(2):356,363. [2] 马逾英,钟世红,贾敏如,等.紫外分光光度法测定川白芷中总香豆素类成分的含量[J].华西药学杂志,2005,20(2):159,160. [3] 邢 婕,胡晓静,赵春杰,等.RP-HPLC法测定独活中蛇床子素和异欧前胡素含量[J].沈阳药科大学学报,2006,23(2):93,96. [4] 徐淑云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,1991.488,497. [5] 杨藻宸.药理学和药物治疗学[M].北京:人民卫生出版社,2000.169. [6] 叶少梅,黄天来,欧卫平,等.补骨脂内酯对戊巴比妥钠及巴比妥钠所致小鼠催眠时间的影响[J].新中医,1998,30(10):39,40. [7] 汪 辉,彭仁琇.P450特异性化学抑制剂在外源化合物代谢中的作用[J].药学学报,1999,34(11):877,880.