HPLC测定洁阴止痒洗液中蛇床子素的含量

HPLC测定洁阴止痒洗液中蛇床子素的含量 HPLC测定洁阴止痒洗液中蛇床子素的含 量 中华临床医学研究杂志2008年6旦茎垒叁茎!塑 图1B.供试品色谱图 ,?? 一 .. .... :,. , 图1C.阴性色谱图 图1,皮肤病血毒丸高效液相色谱图 2.5.2线性关系考察精密吸取上述对照品混合溶液4.0, 6.0,8.0,10.0,12.0,14.OixL分别注入液相色谱仪测定, 峰面积,以峰面积为纵座标,以进样量为横座标,绘制标准曲 线,芍药苷回归方程为:Y=4.969×10+1.329×10.Xr: 0.9999,芍药苷在0.21121~g一0.7392~g范围内呈良好的线 性关系. 2.5.3精密度试验按上述色谱条件,用同一供试品溶液 连续进样6次,每次lOixL,分别测得各次峰面积.芍药苷平 均峰面积为399539,RSD值为0.8%,明仪器精密度良好. 2.5.4稳定性试验取同一批供试品溶液,分别在0,2,4, 8,10,12h时进样1次,测定峰面积.结果的RSD为1.2%, 表明供试品溶液在12h内稳定. 2.5.5重现性试验取同一批样品,按供试品溶液制备方 法,平行制备6份,依法测定,芍药苷平均总量为1.438mg? g_.,RSD=1.1%,结果表明该方法的重复性好. 2.5.6加样回收试验精密称取本品(批号:04082144,含 1783 量:芍药苷1.438mg?g)0.5g,共6份,精密加入芍药苷对 照品(0.71mg?mL一)的对照品溶液0.8,0.8,1.0,1.0,1.2, 1.2mL,按供试品溶液制备方法制备供试液,依法进行含量测 定并计算回收率.结果见表1. 表1.芍药苷加样回收试验结果(n=6) 2.5.7样品含量测定取3批样品,按供试品溶液制备方 法制备,精密吸取lOixL,注入液相色谱仪测定,以外标法计 算样品中芍药苷的总量.测定结果见表2. 表2.样品含量测定结果(n=3) 厂名批号含量(mg?g) 北京同仁堂集团公司北京中药二厂04082144 北京同仁堂集团公司北京中药二厂08085027 广东国医堂制药有限公司20050401 1.438 1.526 1.371 3讨论 3.1对供试品溶液制备中超声提取时间进行了选择,曾采 用超声处理(功率300W,频率50kHz)30rain,45min,60rain进 行对比,结果显示30rain提取率与60rain的相同,因此确定提 取时间为30rain. 3.2分别比较了乙腈一0.1%磷酸溶液,甲醇一1%冰醋酸 溶液为流动相,以及多种不同比例的配比,结果选用乙腈而 不用甲醇是由于乙腈不但能改善色谱峰形状,增加对称性, 而且还能降低柱压.因此选用乙腈一0.1%磷酸溶液(15: 85)为流动相,芍药苷峰形良好,保留时间适宜,与其它组分 均能达到基线分离,理论板数为8552. 3.3用HPLC法测定皮肤病血毒丸中芍药苷的含量,快速, 简便,准确,使其质量标准更趋向科学化,化,可作为皮 肤病血毒丸质量标准的定量方法. 参考文献 1.国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第七 册.北京:人民卫生出版社,1990.55 2.国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).北京:化学工业出版 社,2005:518,附录33 HPLC测定洁阴止痒洗液中蛇床子素的含量 湖南省怀化市药品检验所(418000)周春菊 摘要目的:采用高效液相色谱法测定洁阴止痒洗液中蛇床子素的含量.方法:采用HPLC法,Diamonsil—C.8柱(250mm×4.6mm,5m)色谱柱,流动 相:甲醇一水一磷酸(70:30:O.1),流速为1.0mL/min,紫外检测波长为322nm,柱温:室温.结果:蛇床子素在0.03848,0.3848Ixg范围内线性良好,r = 0.99999,平均回收率98.49%,RSD=1.09%.结论:本方法准确,简便,快速,可作为洁阴止痒洗液中蛇床子素的含量测定. 关键词洁阴止痒洗液蛇床子素高效液相色谱含量测定 AbstractObjective:Toestablishthemethodfordeterml—nationofostholeinJieyinzhiyan gtion.Methods:HPLCmethodwasselecttodetermine thecontent.Diamonsil—Cl8(250ram×4.6mm,5I.tm);Mobilephase:methanol—water—phosphoricacid(70:30:0.1).Theflowratewasat1.0mL/ minandtiledectivewavelenthwasat322nm.Results:ThecalibratineCtlyYewas,linearwit hinarangeOf0.03848,0.3848gforosthole , theaverage recoverywas98.49%withRSD=1.()9%.Conclusion:Themethodsacc/lI’tewithagoodre producibilityandcanbeusedasaquantitativeanalvSisf0r preparation. 图, 谱一邑一 品, 照, 对一奇一药, 芍一 一 ?一 图, . . . ,....:._二 _-.. ,一 _;.,,. ,. 1784中华临床医学研究杂志2008年6月第14卷第12期June2008.Vol14.No.12 KeywordsJieyinzhiyangLotionostholeHPLCquantit—afivedetermination 洁阴止痒洗液由苦参,蛇床子,百部,徐长卿,土茯苓,千由上述色谱图可见,在本实验条件下,蛇床子素的保留 里光,黄柏等十二味中药制成的外用喷雾剂,具有清热解毒,时间约为21.5rain;蛇床子素与相邻峰达到基线分离且分离 祛风止痒之功效,用于阴道炎因湿热下注所致带下增多,外度达到9.9;按蛇床子素计理论塔板数大于3000,阴性样品溶 阴瘙痒等症.蛇床子作为该制剂主药之一,其有效成分为蛇液无干扰. 床子素,为有效控制药品质量,本实验采用高效液相色谱法2.4标准曲线的制备精密吸取浓度为19.25Ixg/mL的蛇 测定该制剂中蛇床子素的含量,现报道如下.床子素对照品溶液.分别进样2.0,5.0,10.0,15.0,20.Op.L, 1仪器与试药岛津高效液相色谱仪,包括LC一20AT输液测定峰面积,以进样量(,x)为横坐标,峰面积(Y)为纵坐 泵,SPD—M20AVP检测器(日本),LCsolution工作站;蛇床子标,进行线性回归(n=5),得回归方程:Y=3.3304×10X一 素对照品(批号:0822—200204,来源于中国生物制品检定3.922×103,r=0.99999. 结果表明蛇床子素在0.03848一 所);洁阴止痒洗液(怀化正好制药有限公司,批号070408,0.3848p.g范围内线性关系良好. 070731,071018);甲醇,磷酸为色谱纯,水为超纯水,其它试2.5精密度试验精密吸取浓度为l9.25p.g/mL的蛇床子 剂均为分析纯.素对照品溶液5L,重复进样5次.测得蛇床子素峰面积平 2方法与结果均值为315612,RSD值为0.68%. 2.1色谱条件色谱柱:Diamonsil—C18柱(250mm×2.6重复性试验取同一批样品(070731)5份,分别按供试 4,6mm,51xm);流动相:甲醇一水一磷酸(7O:30:0.1);流速:品溶液制备方法制备供试品溶液,按样品含量测定方法测 1.0mL/min;柱温:室温;紫外检测波长322nm;进样量:定,结果蛇床子素的平均含量为23.1p.g/mL,RSD值为 5IxL[1l.0.98%. 2.2溶液的制备2.7稳定性试验取同一样品(070731)溶液,在O,2,4,6, 2.2.1对照品溶液的制备精密称取蛇床子素对照品8,10,12h,分别进样51xL,依法测定.结果蛇床子素峰面积 12.03mg,置25mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,平均值为378734,RSD值为1.12%,12h内稳定性良好. 再精密吸取1mL至25mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,2.8回收率试验精密吸取已知含量为23.1p.g/mL的样品 制成每1mL含蛇床子素19.25p.g的对照品溶液.(批号为070731)的溶液5mL,共9份,分别精密加入浓度为 2.2.2供试品溶液制备精密量取本品10mL,用乙醚提取l9.25p.g/mL的蛇床子素对照品溶液(4.8,4.8,4.8,6.0, ,每次30mL合并乙醚液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移6.0,6.0,7.2,7.2,7.2mL) 3次 按上述方法制备供试液,测定,并 至10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45ixrn)计算回收率,结果见表1. 滤过,取续滤液,即得L.表1.蛇床子素回收率(n--9) 2.2.3阴性样品溶液按处方比例称取除蛇床子外的各 药,并按标准工艺制备缺蛇床子的阴性样品溶液,按上述供 试品溶液制备方法制成阴性样品溶液. 2.3系统适应性试验在以上色谱条件下,取对照品溶液, 供试品溶液,阴性样品溶液分别进样51xL,所得色谱图见图 1.. aD-..finIe23.atn 图1A.蛇床子素对照品 ;….=一..…’:…………. 4…...…………………… 2.9样品含量测定取3批样品,依法制备供试品溶液,分 别精密吸取对照品溶液和供试品溶液51xL,注入高效液相色 谱仪,测定,按外标法计算,结果见表2. 表2.洁阴止痒洗液中蛇床子素的含量(n=3) 3讨论 3.1用HPLC法测定蛇床子素含量,文献中有多种流动 相[,2_,比较了多种比例的甲醇一水一磷酸的分离效果,以 甲醇一水一磷酸(70:30:0.1)为优,其与杂质峰分离度为 9.9,保留时间适中. 3.2用乙醚提取3次(每次30mL)后的供试品与提取4次 (每次30mL)后的供试品,同法测定比较,结果基本一致,表 明3次可提取完全,无需复杂的提取方法. 参考文献 中华临床医学研究杂志2008年6月第14卷第12期June2008,Vol14,No.12 1.国家药品中药标准(外科妇科分册).345,346,457,4582.中国药典2005版一 部.北京:化学工业出版社,2005.219,220 气相色谱法测定磺啶冰黄片中冰片的含量 湖南省怀化市药品检验所(418000)唐勇周春菊 1785 摘要目的:建立气相色谱法测定磺啶冰黄片中冰片含量方法.方法:以水杨酸甲酯 为内标,色谱柱为INNOWAX毛细管柱(30m×0.25mm× 0.25m),FID检测器,色谱条件;柱温135~C,进样口温度为180~C,检测器温度为 250~C;载气为高纯度氮气;流速为50mL?min_..结果:冰片浓度 在0.5018,5.0184mg?mL范围内呈良好线性关系(r=0.9992),平均加佯回收率为 98.60%,RSD为0.81%.结论:方法简便,灵敏,结果准确,可 . 用于该药品中冰片的定量测定 关键词冰片磺啶冰黄片GC法含量测定 AbstractObjective:ToestablishaGCme~odfordeterminingthecontentsofborneolinHua ngdingbinghuangTablets.Method:Applyinginternal standardmethodwithmethyl~”~,alieylateasinternalstandardsubstance.TheGCmethed wasusedwithINNOWAXcolum(30m×0.25mm×0.25Ixm). andFIDdetectorthefollowingchromatographyeodition:columntemperaturewas135~C. Theinjectionsitetemperaturewas180~C,thedetectortemper- aturewas250?,t}lecarriergaswasnitrogenofhighpurity,theflowralewas50mL?rain_.. Result:Thecomponentsexhibitanexcellentseparability andtheborneolhaveangoodlinearityintherangof0.5018, 5.0184mg?mL,;withameanrecoveryofborneolashighas98.60%(RSD= 0.81%).Conclusion:Theresultsshowthatthismethodishandy,steady,rapid,precise,pract icalandcouldbeusedfordeterminingtheborneolin HuangdingbinghuangTablets. KeywordsBomeolHuangdingbinghuangTabletsGCDetermination 磺啶冰黄片是由磺胺甲嗯唑,甲氧苄啶,人工牛黄,冰片 等4味药制成的复方制剂,为抗菌药,被收载于《国家药品西 药标准(化学药品地标升国标第八册)》.冰片为易挥发成 分,为更好的控制本品的质量,将冰片含量作为检测指标很 有必要.笔者参考有关文献l卜,采用气相色谱法测定了 处方中冰片的含量,现报道如下. 1仪器与试药 1.1仪器气相色谱仪Agilent6820,氢火焰离子化检测器 (FID),Certify色谱工作站.INNOWAX毛细管柱(30m× 0.25mm×0.25I~m)(Agilent). 1.2试药乙酸乙酯为分析纯;水杨酸甲酯(中国药品生物 制品检定所,批号707—9003);冰片对照品(中国药品生物制 品检定所,批号110743—200303);磺啶冰黄片(张家界市长 康制药有限公司,批号20071008,20071204,20080106, 每片含冰片5mg). 2方法与结果 2.1色谱条件INNOWAX毛细管柱(30m×0.25mm× 0.251~m),柱温135?,进样口温度为180?,检测器温度为 250?;载气为高纯度氮气50kPa,;流速为50mL?min,;检 测器:氢火焰离子化检测器,进样量2L.在该色谱条件下, 冰片与内标物水杨酸甲酯可得到基线分离,分离度为19.色 谱柱理论塔板数按水杨酸甲酯计算,不低于2500.阴性对照 液无干扰.取冰片的2种成分龙脑和异龙脑的峰面积之和 计算含量.色谱图见图1(A,B,c). 2.2溶液的制备 2.2.1内标溶液的制备精密称取水杨酸甲酯589.38mg, 置lOOmL量瓶中,用乙酸乙酯溶解并稀释至刻度,摇匀,再精 密吸取50mL至lOOmL量瓶中,用乙酸乙酯释至刻度,摇匀, 制成每1mL含水杨酸甲酯2.9469mg的内标溶液. 2.2.2对照品溶液的制备精密称取冰片对照品22.90mg, 置lOmL量瓶中,加入内标溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,制 成每1mL含冰片2.290mg的对照品溶液. 2.2.3供试品溶液的制备取本品2O片,研细,取适量(约 相当于冰片25mg),精密称定,精密加入内标溶液lOmL,称 定重量,超声20min,放冷,称定重量,用乙酸乙酯补足减失重 量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液. ‘:. i.:.::..’..j ‘ . 0.’.:. . 一’’一 . 一:’?’’:’?一?…一一?! 图1A.阴性样品溶液 ‘‘‘‘_l_一’’’?J’’?’ .?_..….L.:……:…i.…. . .-.?: 图1.气相色谱图 2.4精密度试验精密吸取浓度为2.290mg?mLI1的冰片 对照品溶液2L,连续进样6次,测定冰片峰面积与内标峰 面积比值的RSD为0.83%,表明方法的精密度良好. 2.5重复性试验取同一批样品(批号:20071204)5份,分