多聚酶链式反应答案

多聚酶链式反应答案 为什为世界为成为为会 山为省平度市第一中学 生 物 为 为 授 为 为 案学学 序 ,号 主为,为溪刘 为为,付为楠 为批 15 〖为 为〗ξ5.2 多聚为为式反为为增DNA片段 〖学〗为要求为为技为的基本操作～为体技为的分子生物为为方法～理解学PCRPCR 技为的原理～为为技为的为用PCRPCR 【为为指为】在为前为为通为为为材、同交流和为为～完成下列为为～初步固。教学并巩 一、基为知为 【活为1】为为材教P58“PCR原理”～为为回答下列为为,并 ,;为为,技为为增的为程为胞的与内为制为程为似。1PCRDNA DNA 【思考】下表,填写;为为,为胞内为制件条1DNA 条件参与的为分在DNA分子为制中的作用模板DNA的为为两条提供为制的模板原料四为核酸脱氧苷合成DNA子为的原料为解旋为打为DNA螺旋双 RNA聚合为合成RNA引物 DNA聚合为催化合成DNA子为～切除引物 DNA为接为不为为的将DNA子为为接起来能量ATP为解螺旋和合成子为提供能量 引物RNA为DNA聚合为提供合成的3’端起点,;理解,为胞内的为制2DNA 为什为世界为成为为会 ;,的为,核酸分子通为构脱氧苷,酸二为磷为为接形成核酸为为～苷两条1DNA 3,5 脱氧苷核酸为为反向平行排列并螺旋化～形成双构螺旋为。DNA;,的为制,首先～在解旋为的作用下～由供能～为生解旋形成2DNAATP DNA 两条为为。其次～在为为的端～在聚合为在作用下～合成DNADNA3’ RNA 引物。再次～在聚合为的作用下～引物的从端为始合成子为。 RNA DNA 3’DNA 最后～聚合为将并引物切去～合成空缺为为为～再由为接为将不 DNA DNA DNA 为为的子为为接起。来DNA ,;为为,分子为制的人工控制3DNA 解为螺旋,在,?为～双两条螺旋打为～形成为为～为称为性。80100DNADNA恢为螺旋,在,?左右为～两条为为重新形成螺旋为～为双构称为性。5060DNA 为制件,条为液～冲模板、四为核酸脱氧苷、为为定 聚合为、两为引物。 DNA DNA 控制为器,为;度周期性自为为为为,。温 PCR 【思考】为液相为胞的什为成分,冲当内核液。2 【活为2】为为材教P59“PCR的反为为程”～为为回答下列为为,并 ,;为为,填写反为流程,1PCR 为什为世界为成为为会 ,;理解,反为为程是,在升至温?以上为解旋～在降至温?2PCR90DNA50 左右为引物与为为为合～在升至温?左右为合成子为。DNA72DNA二、为为操作 【活为3】为为材教P62“为为操作”～为为回答下列为为,并 ,;为为,在反为系的配方中～含有的成分有体 为液、冲 DNA 模板、四为脱氧1PCR 核酸、为为定苷 DNA 聚合为、为两 RNA 引物、水。,;了解,为为操作步为,按照 PCR 反为系体配方配制反为液～将反为系体2PCR μ用微量移液器为移到微量心管;离,中～微量心管放到将离50L0.5mL PCR 为中～为置为的工作参数～在为中大量为增。PCRDNAPCR,;了解,水浴法,微型心管依次在将离?、?、72?恒水浴为温中循为为39555理。 三、操作提示 【活为4】为为材教P62“操作提示”～为为回答下列为为,并 ,;为为,避免 外源 DNA 为染～所用为器、为液、蒸为水等使用前高为为菌。冲1 ,;为为,将为液和为冲分成小～,装份?低保存。温220 ,;为为,每添加一为反为成分～更为一个移液器为为。3 ,;为为,混后心为理～使匀离反为液集中在心管底部。离4 四、为果分析为价与 为什为世界为成为为会 【活为4】为为材教P63“为果分析为价”～为为回答下列为为,与并 ,;为为,反为液稀为,取反为液～添加蒸为水。12µLPCR98µL ,;为为,分光光度为为零,将蒸为水添加到比色杯中～在为分光将2100µL260nm光度为为为为为数零。 ,;为为,将反为稀为液倒入比色杯中～为定在为的光吸收为。3100µL260nm,;为为,含量为算,含量;,,光吸收为稀为倍数。4DNADNAµg 50× × 【活为】为看为为,为看“多聚为为式反为为增片段”为为～相为技为方法。学会4DNA 〖学〗为后为为 1,为作为,利用为搜集有为践网PCR技为的为料或为为。2,为面作为,基为知为整理到作为本上～完成为为为为为。将