长寿花的组培快繁
2001年第4期云南农业科技21
长寿花的组培快繁
吴丽芳,屈云慧,杨春梅(云南管农宴L阮虽艺所,足胡6.502,05
1材料和
11取材
取幼嫩叶片或t岫的节段作为外殖体
I2外殖体灭菌
将外殖体放人稀的洗衣糟水中漂洗35分钟,然后用清水冲洗干净,再放^0I%,O,2%的Hg— c中灭菌10,20分钟,取出用无菌水漂}先3次. 接种于诱导培养基上
I3培养基
?H=58 用~Is作为基本培养基,
诱导培养基:BA05,2mg/L+AO1,1L 增殖培养基:BA0I,IinI+NA&Olmg/L
GA0.2mw'L
生根培养蕈:1/2MS+NAA0I,IrL
1.4培养条件
光照强度:1000—2000IX培养温度:25, 28?光照时间:8—10小时
2结果与讨论
2I外殖体灭菌及l上菌系的建IL
在试验中,不同的外殖体灭菌时间和浓度而 同.叶片在0.J%的HgcI2中消毒J0分钟获得最佳 效果.成活率在50%以J,而茎段由于组织较老, 在述浓度F.几乎全部污染.而在O2%的Hl2
中灭菌20分钟,教果最佳,无污染且成活的外殖 体在305:~以而叶片在02%的Hb中,90% 以上的吖片死亡.可见l埘不同的外殖体虚采用相应 的菌方法,只有在适宜的灭菌条件下,既杀死了 各种微牛物,而对材料义损伤最小时才呵能在外源 激素的作用下.迅速恢复分化及生长:外殖体灭 菌,是组织快繁体系建立的第步,也是非常关键 的,步,它直接关系组培技术的成败
22不定芽及愈伤组织的诱导
将灭菌后的外殖体接种在不诱导培养基l一, 在13,41.5r~~./I+NAAO.4me_/L时.如天后,叶片基 部开始膨大并c?出愈伤组织,也有部份叶片在坷[_『 处直接产生不定芽,当将BA浓度降至0.3, 05mg/L时,町从愈伤组织再分化出不定丛芽. 收稿日:2【瑚一10—15
茎段外殖体在接种后IO天,腋芽开始萌芽,1个月 后,叶腋处会继续长出不定丛芽,而随BA浓度 增高丛芽数增加,当BA为2mg/L时,定芽出 现明显的变异,茎秆变扁,叶片莲座状,在BA05 ,
1..ng/L时,革段产生的不定芽最好.
2.3愈伤组织及定芽的快速扩繁
将在诱导中产生的愈伤组织继续在BAI.5mg/L +NAA0.4mL下培养可使愈伤组织不断增殖, 较难分化出不定芽,在BAO3,05mg/L时,愈 伤蛆纲则可很陕分化出不定芽.将不定芽继代于增 殖培养基结果在BAO5mg/L+N/L~.0.1mg/L+
GAO.2nWL时,不定芽的增殖速度很快,月增殖率 达6,8倍且正常,无变异,长势良好,在继代
增殖阶段,加人适量GA,对不定芽的生长有明显 促进作用.但对愈伤组织l及不定茅的分化有一定抑 制作用通过愈伤组织及不定芽增殖,可明显提高 增殖速度缩短组培生产时间:
24组培苗生根
将在继代或诱导中直接产生的高1,1.5cm的 不定芽切下,转人N&~t01,ImL的生根培养基 中,结果均会长根只是长根时间及数量不尽相 ?通过比较,AO5total时7天即可生根, 根快,根数及粗度适量,根系良好.出苗成活率 高,长势陕
25生根苗的过渡
将长根且苗高2呻左右的苗从培养基中取出, 轻轻洗去基部琼脂,注意不要伤根,并在0.5%, I%的多菌灵或甲基托布津溶液中消毒片刻,然后 移栽于珍珠岩红土:腐殖土=1:1:1的混合基质中 在移栽初期,注意遮阴,保湿;1周后可适当减少 遮阴增加光照2周后可揭去遮盖物,但要注意避 免阳光直射以免弓f起叶片枯_北或萎蔫,在此期间, 要加强叶面喷水,增加空气湿度,同时5,7天喷 施一次氮肥1个月后,苗高4,5cm,有4,5对 叶时,移八小盆定植.并加强肥水管理,注意摘 心整形,'年后即r成形并开花.
参考文献:
[【谭文澄.蛾策刚观赏植物组织培养技术[M] 北京:中国林业出版杜.1991