国家正式标准2012.2.5执行清开灵注射液质量标准

清开灵注射液质量草案 清开灵注射液 Qingkailing Zhusheye 【处方】  胆酸        3.25g      珍珠母（粉）  50.0g 猪去氧胆酸   3.75g      栀子         25.0g 水牛角（粉） 25.0g       板蓝根      200.0g 黄芩苷        5.0g      金银花      60.0g    【制法】以上八味，板蓝根加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至200ml，加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。栀子加水煎煮二次，第一次1小时，第二次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至25ml，加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。金银花加水煎煮二次，每次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至60ml，加乙醇使含醇量达75%，滤过，滤液调节pH值至8.0，冷藏，回收乙醇，再加乙醇使含醇量达85%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。水牛角粉用氢氧化钡溶液，珍珠母粉用硫酸分别水解7～9小时，滤过，合并滤液，调节pH值至3.5～4.0，滤过，滤液加乙醇使含醇量达60%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。将栀子液、板蓝根液和水牛角、珍珠母水解混合液合并后，加到胆酸、猪去氧胆酸的75%乙醇溶液中，混匀，加乙醇使含醇量达75%，调节pH值至7.0，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。黄芩苷用注射用水溶解，调节pH值至7.5，加入金银花提取液，混匀，与上述各备用液合并，混匀，并加注射用水至1000ml，再经活性炭处理后，冷藏，灌封，灭菌，即得。 【性状】本品为棕黄色或棕红色的澄明液体。 【鉴别】（1）取本品10ml ，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇1ml 使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含4mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各 5μl ，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以乙酸乙酯－丙酮－甲酸－水（5：5：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （2）取本品1ml ，加乙醇2ml ，混匀，作为供试品溶液。另取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml 各含1mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B ）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以异辛烷－乙酸乙酯－冰醋酸（15：7：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （3）取黄芩苷对照品，加 70% 乙醇制成每 1ml 含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B ）试验，吸取【鉴别】（2）项下的供试品溶液及上述对照品溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 1％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【指纹图谱】照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适用性试验　以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱Phenomenex Luna C18 250mm×4.6mm，5μm）； 以乙腈为流动相A，以0.1％甲酸溶液为流动相B，按下中的规定进行梯度洗脱；流速为0.5 ml/min；检测波长为254 nm；柱温25℃。理论板数按栀子苷峰计算应不低于100000。 时间（分钟） 流动相A(%) 流动相B(%) 0～42 42～65 65～75 75～85 0→12 12→19 19→100 100→0 100→88 88→81 81→0 0→100 参照物溶液的制备　取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml中含0.2mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备　取本品，滤过，取续滤液，即得。 测定法　分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，记录65分钟内的色谱峰，即得。 本品指纹图谱中应呈现与栀子苷对照品保留时间一致的色谱峰，并应出现10个共有峰，以1、3、5、6、7、8、9、10（S）号峰为标记，经中药色谱指纹图谱相似度系统软件计算，与对照指纹图谱相比较，相似度不得低于0.80。 图S　 清开灵注射液对照指纹图谱 10（S） 栀子苷对照品 【检查】山银花：取本品20ml，加盐酸3滴，边加边搅拌，滤过，滤液加氢氧化钠试液调节pH值至7，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤两次，每次30ml，分取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（6:4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。 溶液的颜色  精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，与黄色10号标准比色液（中国药典2010年版二部附录IX A第一法）比较，应不得更深。 pH 值  应为 6.8～7.5 （中国药典2010年版一部附录Ⅶ G ）。 炽灼残渣  精密量取本品5ml，依法测定（中国药典2010年版一部附录Ⅸ J），每1ml应为3.0～ 8.5mg。 总固体　精密量取本品2ml，置105℃干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105℃干燥2小时，移至干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，每1ml遗留残渣应为30～60mg。 有关物质  除蛋白质、树脂、草酸盐外，照注射剂有关物质检查法（中国药典2010年版一部附录Ⅸ S）检查，应符合规定。 蛋白质  取本品1ml，加鞣酸试液1~3滴，不得出现浑浊。 树脂  取本品5ml，加三氯甲烷10ml，振摇提取，分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣加冰醋酸 2ml 使溶解，置具塞试管中，加水3ml ，混匀，放置 30分钟，可有轻微浑浊，不得出现絮状物或沉淀。 草酸盐 取本品5ml ，置离心管中，滴加6mol/L 盐酸溶液5滴，搅匀，离心，吸取上清液，滤过，取滤液2ml，调节pH 值至5～6 ，加3%氯化钙溶液2～3滴，放置10 分钟，不得出现沉淀。 热原 取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII A），剂量按家兔体重每1kg注射5ml，应符合规定。 异常毒性  取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII E）,按静脉注射给药，应符合规定。 过敏反应 取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII G），应符合规定。 溶血与凝聚  取本品，依法检查（中国药典2010年版一部附录XIII H），应符合规定。 其他　应符合注射剂项下有关的各项规定（中国药典2010年版一部附录Ⅰ U ）。 【 含量测定 】胆酸、猪去氧胆酸 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。 色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0.1%甲酸溶液(68:17:15)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按胆酸峰计算应不低于4000。     对照品溶液的制备  取胆酸对照品、猪去氧胆酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含胆酸0.2mg和猪去氧胆酸0.1mg的混合溶液，即得。     供试品溶液的制备  精密量取本品1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。     测定法  分别精密吸取对照品溶液5µl、15µl，供试品溶液10µl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。 本品每1ml含胆酸（C 24 H 40 O5）应为1.50~3.25mg；含猪去氧胆酸（ C 24 H 40 O4）应为1.00~3.20 mg。 栀子 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈–水（10：90）为流动相；检测波长为238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于 3000。 对照品溶液的制备  取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 含 30 μ g 的溶液，即得。 供试品溶液的制备  精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每 1ml 含栀子以栀子苷（C 17 H 24 O 10）计，不得少于0.10 mg。 黄芩苷 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇–水– 磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为276nm 。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备  取黄芩苷对照品适量，精密称定，置100ml量瓶中，加70% 乙醇适量使溶解，加流动相1ml，再加70%乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置10ml量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，取稀释至刻度，摇匀，_____________________________________________________________________________________________________________________即得（每1ml 中含黄芩苷50 μ g ）。 供试品溶液的制备 精密量取本品1ml ，置100ml量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每1ml含黄芩苷（C 21 H 18 O 11），应为3.5～5.5mg 。 总氮量 精密量取本品0.5ml ，照氮测定法（中国药典2010年版一部附录Ⅸ L 第二法）测定，即得。 本品每1ml含总氮（N）应为2.2～3.0mg。 【功能与主治】 清热解毒，化痰通络，醒神开窍。用于热病，神昏，中风偏瘫，神志不清；急性肝炎、上呼吸道感染、肺炎、脑血栓形成、脑出血见上述证候者。 【用法与用量】 肌内注射，一日2～4ml。 重症患者静脉滴注，一日20～40ml，以10% 葡萄糖注射液200ml 或氯化钠注射液100ml稀释后使用。 【注意】 (1) 有表证恶寒发热者、药物过敏史者慎用。 (2) 如出现过敏反应应及时停药并做脱敏处理。 (3) 本品如产生沉淀或浑浊时不得使用。如经 10% 葡萄糖或氯化钠注射液稀释后，出现浑浊亦不得使用。 (4) 药物配伍：到目前为止，已确认清开灵注射液不能与硫酸庆大霉素、青霉素 G 钾、肾上腺素、阿拉明、乳糖酸红霉素、多巴胺、山梗菜碱、硫酸美芬丁胺等药物配伍使用。 (5) 清开灵注射液稀释以后，必须在4小时以内使用。 (6) 输液速度：注意滴速勿快，儿童以20～40滴/分为宜，成年人以40～60滴/分为宜。 (7) 除按[ 用法与用量 ]中说明使用以外，还可用5% 葡萄糖注射液、氯化钠注射液按每10ml 药液加入100ml 溶液稀释后使用。 【规格】（1）每支装2ml （2）每支装10ml 【贮藏】密闭。 注：1. 胆酸 取本品20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，照清开灵注射液【含量测定】胆酸、猪去氧胆酸项下方法，依法测定。 本品含胆酸（C 24 H 40 O5 ）不得少于80.0％。 2. 猪去氧胆酸 取本品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，照清开灵注射液【含量测定】胆酸、猪去氧胆酸项下方法，依法测定。 本品含猪去氧胆酸（ C 24 H 40 O4）不得少于80.0％。 3．黄芩苷 取本品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加70% 乙醇适量使溶解，加流动相1ml，再加70%乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置10ml量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，照清开灵注射液【含量测定】黄芩苷项下方法，依法测定。 本品含黄芩苷（C21H18O11）不得少于90.0％。