茜草乙醇提取物对小菜蛾的活性作用方式

茜草乙醇提取物对小菜蛾的活性作用方式 第钾卷第12期 ‘0o8年l2月 农药 AGROCHEMICALS ,,o1.47.NO.12 Dec.2008 应用技术 茜草乙醇提取物对小菜蛾的活性作用方式 张亚军-,杨敏丽?,兰杰,郝凤霞 (1.宁夏大学能源化重点实验室,银川750021;2.宁夏彭阳县农业技术摊广中心,宁 夏固原7565O0) 摘要:研究了茜草乙醇提取物对小菜蛾的触杀,拒食和抑制生长作用.结果明: 茜草乙醇提取物对小菜蛾 3龄幼虫具有较高的触杀和拒食活性,浸渍法处理对小菜蛾3龄幼虫72h的致死 巾浓度(Lc)为4.869g,L,24, 48h的拒食中浓度(AFC,.)分别为5.956,6.011g儿;乙醇提取物对小菜蛾的生长发 育也有一定抑制作用,随施 药剂量的增加,生长抑制率增大,化蛹率和羽化率降低,处理剂量为50.00g/L时, 生长抑制率为98.96%,化 蛹率为42.51%,羽化率仅为12.50%. 关键词:茜草.,J,菜蛾;活性作用方式 中图分类号:S482.3文献标志码:A文章编号:1O06.O413(2O08112.0924.03 lnsecticidaIActiOnofR,,b『ac0厂/『aL.againstP/,,fe/『axDs//a ZHANG,,a-iun,,YANGMin-n1,LANJie,HAOFeng.xia (1.KeyLaboratory0fEne唱 ySources&ChemicalEngineering,NingxiaUniversity,Yinchuan75o02l,China;2.De velopingCenter0f AgricultureandechnoIogyofPengyangCountyofNingxia,Guyuan756500,NingxiaChi na) Abstract:C0ntacting,antifeedingandinhibiti0nofgrowthanddeVelopmentofR”扫以 o,d厂oZf口L.on3thinstar larVaeofPff已f1 日),ZDfffnweredetermined.Theresu1tsshowedthatethanolextractpossessedhighcontacti ng andantifeedingeffectsagainst3thinstarlarVaeofPZ叼,f.TheLC50ofcontactingactionwas4.869g,Lby dippingmethOdandtheAFC50OfcompleteantifeedingactiVitywere5.965and6.O11g,L in24and48h, respectiVely.EthanolextractsalsodisplayedstronginhibitiOnofgrowthanddevelopment on尸ZfPf日.y,D,Z. C0mparingwiththecontro11ed,thetreatedlarVaeshowedbigreductiononbodyweight,pu pationrate,adult emergingrateandre1atiVegrowthrate.ThehigherthecOncentrationOftheextractswas,th emOreseveretheeffect onthepestwas.Whentreatedwithconcentrationof50.OOg,L,growthinhibitionratewas9 8.96%,with pupatiOnrateandadultemergingratewere42.5l%andl2,50%. Keywords:RM扫co厂口fL_;PffDinsecticida1actj0n 茜草(R”易cDL_)为茜草科茜草属多年生攀援 草本植物,俗名血见愁,活血草,地血等,我国大部分地 区均有分布,其性味苦寒,归肝经,具有凉血止血,祛瘀 等功效….目前,对茜草的研究主要集中在化学成分.和 药理活性方面.本课题组在研究中发现,茜草对几种 常见农业害虫,尤其是小菜蛾有较高的活性.为了进一 步探索其作用方式和作用机理,采用不同的活性测试方 法,分别研究了茜草乙醇提取物对小菜蛾的触杀,拒食和 抑制生长发育作用,结果表明茜草乙醇提取物对小菜蛾3龄 幼虫不仅具有较高的触杀,拒食活性,而且能很好抑制其 生长发育.研究结果将为茜草的进一步开发和应用以及 新型植物源农药的研究提供一定的参考. 1材料与方法 1.1材料 1.1.1供试植物 茜草采自宁夏彭阳县境内.将其全草阴干,放入恒温 箱烘干(40—45?).磨碎,过425m筛,装入保鲜袋密封 贮于冰箱中备用. 1.1.2供试昆虫 小菜蛾(尸胁L.)由宁夏大学能源化lT重点实 验室提供,羽化后的成虫喂蜜糖水,产卵材料为盆栽油菜 苗,幼虫用油菜苗饲喂,选择健康均匀3龄幼虫供试(养虫 室温度:18,23?,湿度75%,80%,光照L:D=l2h:l2h). 1.2提取方法 称80g茜草全草粉末,装入1O00mL锥形瓶中,加10倍 量95%乙醇,室温浸泡24h后超声提取40min,过滤,重复 提取3次,合并滤液减压浓缩后得乙醇提取物.将乙醇提取 物用50%丙酮稀释成系列质量浓度,置于4?冰箱中备用. 1.3生物活性测定 1.3.1触杀作用测定 采用浸渍法”:将小菜蛾3龄幼虫放入陨l桶状滤网中, 浸于不同质量浓度乙醇粗提物处理液,10s后迅速取,用 滤纸吸干多余药液,置于有新鲜甘蓝叶并垫有保湿滤纸 的培养皿(直径为9cm)中,每处理30头,重复3次,对照 收稿日期:20O8一O8—25 基金项目:同家自然科学基金资助项目(20565003);宁夏自然科学基金资助项目 (NzO719);宁夏大学科学研究基金项目(2R2O0706) 作者简介:张亚军(1982,).男,硕士研究生,从事天然产物和农药化学研究 E—ma|1:yajun5O288@163.com: .博十.Te1:0951.2O6286l,E.maI1:yml@nxu.edu.cn. 通讯作者:杨敏丽,教授 第l2期张亚军,等:茜草乙醇提取物对小菜娥的活性作用方式925 用50%丙酮做同样处理.将培养皿置于24?的智能人工 气候培养箱内观察,于24,48,72h后观察试虫的死亡情 况,并计算死亡率,校正死亡率和致死中浓度(LC.). 死亡率(%)=×l00 校正死亡率(%):丝圭奎二墨圭空l00 1一对照组死亡率 1.3_2拒食作用测定 采用浸叶法:将新鲜甘蓝叶用打孔器打成叶碟(直径 1.6cm),放入供试样品内浸渍5s,取出晾干放入滤纸保 湿培养皿中,每皿一片叶碟,接入饥饿6h的3龄小菜蛾 幼虫l头,每处理l0头试虫,重复4次,对照用50%丙酮 将培养皿置于24?智能人工气候培养箱内 做同样处理. 观察,于24h后用坐标纸测定取食面积,更换新鲜处理叶 碟,48h后再次观察取食面积.根据平均取食面积计算 拒食率和拒食中浓度(AFc.). 拒食率(%)=对照组平均取食面积一处理组平均取食面积×100 对照组平均取贫面积 1.3.3生长发育抑制作用测定 采用饲喂称重法”?:叶片处理同拒食作用,每皿2片叶 碟,接入1头已饥饿6h的3龄小菜蛾幼虫,每处理10头试 虫,重复4次,对照用50%丙酮做同样处理.处理后0,24, 48h分别称虫体质量(每天更换新鲜处理叶碟).连续饲 喂48h后换新鲜无毒甘蓝叶继续饲养至幼虫化蛹,羽化. 处理前和处理后每隔24h记录虫重,死亡个数,蛹数及蛾 数,计算生长抑制率,累计死亡率,化蛹率和羽化率. 抵制率(%)=对照组平均体重加量一处理组平均体重增加量 ×10o 对照组平均体重增加量 2结果与分析 2.1触杀作用 用1.3.1方法测定不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的触 杀作用,结果见表1.由表1可以看出乙醇提取物对小菜蛾 有较好触杀作用:随着质量浓度的增大和时间的延长,小 菜蛾校正死亡率都在升高;质量浓度为5O.0Og/L,其72h校 正死亡率可达96.67%,毒力回归方程为y=1.8465+3.7305, Lc0=4.869g/L,0.9971.虫体接触药剂屙,先是经历短时 间剧烈摆动,然后虫体瘫痪,麻痹,部分虫体不能恢复, 直接死亡,死亡状态成c型或V型;部分虫体虽经历一段时 间后还可以恢复,但取食量明显减少或不吃直至死亡. 2.2拒食作用 用1.3.2的方法测定不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的 拒食作用,结果见表2.由表2可看出乙醇提取物对小菜蛾 有较好拒食作用:随着质量浓度的增大其拒食率增加,小 菜蛾幼虫在处理叶片上的取食面积比在对照叶片上显着减 少,在高质量浓度的处理叶片又比低质量浓度的处理叶上 显着减少,24,48h的AFc.值分别为5.956,6.011g,L;不同 处理时问的拒食率不一样,24h的拒食活性明显高于48h 的拒食活性. 2.3生长发育抑制作用 用1.3.3方法测定了不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾 的生长发育抑制作用,结果见表3,4. 表1不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的触杀作用 注:每处理30头,重复3次;同列数据后标不同字母者表示经Duncan’s新复极差测验差异显着(P<0.O5);同列数据后字母相同者表示经DMRT法差异不 着(P<0.05). 表2不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的拒食作用 质量浓度/24 (g?L)取食面积,mm拒食率,%取食面积,mm拒食率,% 1.464?1.53a94.086.240?1.68e83.8O 4.120?2.89b83.371O.99?4.39de71.46 5.1OO?5.2Oc79.4112.98?6.82d66.29 l0.72?6.02d56.72l8.72?9.42c51.39 18.55?8.47d25.1l30.4O?5.69b21.05 24.77?2.15d38.5l?4.59a v=1.7493.65O9,r:0.9767v=1-366+3.7412,0.9618 注:每处理l0头,重复4次;衷巾数据为平均数?误差,同列数据后标不 同字母者表示经Duncan’s新复极差测验差异显着(P<0.05),下同. 表3不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的 生长发育抑制作用(1) 5O.0o 25.00 12.5O 6.25O 3.125 对照 2.88?O.2la2.89?O.49d3.19?O.41d98.9679.O5 2.88?0.1Oa3.00?O.24cd3.45?O.53cd87.5O61.49 3.O5?0.24a3.31?O.19bc3.72?O.28bc72.9254.73 2.98?0.13a3.40?0.22b3.86?0.5Obc56.254O.54 2.83?0.14a3.53?0.29b4.OO?0.35b27.0820.9 3.02?0.37a3.98?O.63a4.5O?0.80a ????瑕一一一一一棚蜘 926农’药AGR0cHEMICALs第47卷 表4不同质量浓度乙醇提取物对小菜蛾的 生长发育抑制作用(2) 堕堇鎏里::墨主垩堑皇塑奎 5O.O057.53?5.33a42.51?5.26d12.50?5.O0f 25.0045.17?5.77b55.00?5.77c25.00?5.77e l2.5032.50?5.00c62.54?5.O0bc42.52?5.73d 6.25027.52?5.12c70.O0?8.17b55.33?5.77c 3.125l7.58?5.43d82.59?5_43a67.56?5.13b 堕璺:兰圭:!!:圭:!!:: 由表3,4可以看乙醇提取物对小菜蛾幼虫具有较好 的生长抑制作用:随处理药液质量浓度的增大.24,48h 生长抑制率增大,化蛹率降低,羽化率降低;在质量浓度 为50.o0g,L时,24h时生长抑制率达到98.96%,化蛹率为 42.51%,羽化率仅为12.50%;随处理时间的不同,生长抑 制率不一样,24h的生长抑制作用明显高于48h的生长抑 制作用.同时不同质量浓度的乙醇提取物对小菜蛾3龄幼 虫也有一定的胃毒作用. 3讨论 试验结果表明:茜草乙醇提取物对小菜蛾幼虫具有较 为明显的触杀,拒食和抑制生长发育作用.72h触杀活性 的Lc.值为4.869g,L,部分试虫虽未死亡,但取食量明显 较对照少,过早进入蛹期,而且不能正常羽化.在拒食 和生长发育抑制试验中,24h的拒食和生长发育抑制效果 都略高于48h,可能是由于小菜蛾持续地暴露于乙醇提取 物的环境后感受器对乙醇提取物的敏感性下降的缘故;也 有可能是由于小菜蛾因极度饥饿而取食乙醇提取物处理过 的叶碟所致.在生长发育抑制试验中,处理组试虫体重 的增加量均小于对照组,处理组试虫累计死亡率均大于对 照组,而且处理组试虫的化蛹率,羽化率均小于对照组, 可能是因为拒食作用而引起体内代谢失调而使生长发育受 抑制.导致化蛹和羽化受阻. 本文通过茜草乙醇提取物对小菜蛾不同作用方式的研 究,发现茜草乙醇提取物对小菜蛾幼虫具有较为明显的触 杀,拒食和抑制生长发育作用.这为进一步研究和利用 茜草,从中寻找出高活性的杀虫物质,将其开发成新型的 植物源农药提供一定的参考价值. 参考文献: 【1】樊中心.茜草中的抗癌成分….国外医学中医中药分册,l997, 19(4):3—5. [2]王素贤,华会明,吴立军,等.茜草中葸醌类成分的研究[JJl药 学学报,1992,27(1O):743—747. [3]华会明,王素贤,吴立军,等.茜草中萘酸酯类成分的研究…. 药学学报,1992,27(4):279.282. [4]张振英,黄峰.茜草药理作用研究进展[J1_现代中西医结合 杂志,2O07,16(15):2172.2173. [5]杨念云,田丽娟.茜草属植物的化学成分和药理作用【J1.国外 医药植物药分册,2【)(】5,20(2):5355. 【6】杨连荣,周庆华,张哲锋,等.茜草的化学成分与药理作用研 究进展【J1l中医信息,2007,24(1):2l一23. [7]谢红英,蒋红云,王国平,等.石菖蒲根茎提取物对黏虫的生 物活性【J].农药,2OO4,43(8):367—369. [8]薛超文,王海迎,孙强,等.五种杀虫剂对小菜蛾的室内生物 活性研究[J1.农药研究与腹用,2O06,l0(3):2528. [9]周琳,马志卿,冯俊涛,等.雷公藤生物碱制品对小菜蛾和菜 青虫的控制效果[J】_西北农林科技大学学报,2O06,34(12): 169.173. 【10】徐向荣,蒋红云,张燕宁,等.牵牛子提取物对小菜蛾的生物 活性[J].农药,2006,45(2):125—128. 【l1]秦小萍,赵红艳,杨美林.坡柳种子提取物对菜青虫取食和 生长发育的影响【J】.农药,2OO7,46(7):494—496. 责任编辑:赵平 农药口近,Q年首祆负长|I|毫|jj 近日,国家发改委,海关总署分别公布了前三季度主要工业行业运行和进出口情况表明,我国出口农药3O.8万吨, 价值8亿美元.分别比20O7年同期(下昂)下降3.5%和24.2%;进口3.1万吨,同比增长13.3%.这是自l997年以来,中国农 药出口总量及总价值首次出现负增长.业内权威人士提醒,农药进出口增减量显示出中国农药面临的产业升级压力. 业内人士分析,2OO8年农药出口量减少有政策因素:中国政府在2OO7年底降低部分农药出口退税比例.今年9月 取消对已列入PIc,POPs公约的农药品种的出口退税政策.商务部,海关总署和环保总局近日又拟定了新一批加工贸 易禁止类商品目录,目录中农药产品所占比重很大,对农药品种的出口也有影响.但更主要的是农药产业正面临从低 质量,低资本,劳动投入比的产品向高质量,高资本,劳动投入比的转移.在总量下降的背景下,农药出口企业的构成 和贸易方式也发生了一定的变化. 农药出口贸易数字变化所显示的产业升级压力已经为业内人士所重视.他们提出,中国农药出口贸易存在四个问 题需要关注. 一 是农药出口缺乏品牌,市场意识,出口产品技术含量低.二是农药进出口企业数量众多,规模小,缺乏有效的 行业协调.三是农药国际市场开拓难度加大.四是由于加工贸易方式出口量增加迅速,导致环保问题凸显.(zP)