猪圆环病毒病3

猪圆环病毒病3 核心提示:4.2.3 病毒学 在病猪的淋巴和其他组织病变内存在中度到大量的PV-2。 这个没有把与PS一起混合感染的其他疾病排除在外;也意味着可能是PS，但没有临床现或没有大体病变不能足以诊断为 4.2.3 病毒学 在病猪的淋巴和其他组织病变内存在中度到大量的PV-2。 这个标准没有把与PS一起混合感染的其他疾病排除在外;也意味着可能是PS，但没有临床表现或没有大体病变不能足以诊断为PS。然而，存在临床症状时，PS的大体病变和高水平的PV-2被不同的方法(免疫细胞化学，定量抗原或定量PR)所证实，也可在缺乏组织病理学的专门技术情况下做出诊断。 群体定义为个体诊断符合以上标准的群体就认为是PS群，包括临床过程、特征性消瘦和死亡率超过预期或历史上的水平。但是对群体PS/PVD的诊断标准存在争议，即在群体中偶然的个体死亡，符合诊断标准，这种情形无容置疑的类似于20世纪90年代中期前的全世界出现的PS，那时在一些猪场只有PS个别病例出现，而且被误诊。为此，研究PVD的欧盟多学科联盟提出了建议标准，主要内容是: 与历史水平相比，群体发生PS的死亡率和断奶后消瘦过度增加。这个增加有两个选项，其中只要可能就选用:?如果猪群有死亡率，这样死亡率的增加可以下列两种方法计算识别:目前的死亡率等于以前的水平，1.66X(标准偏差，SD2)，或者通过卡方检验目前的死亡率是否高于以前的水平，这里的死亡率是在一个特定时期死猪的流行率，目前的时期是1个月或2个月，历史上的时期必须是至少3个月的统计数据。?如果没有猪群的死亡率记录，下列方法可以应用:死亡率超过全国或地区水平50%以上，就可认为可能是PS。 PS病理学诊断。每群剖检必须5头以上，其中至少1头同时出现以下病理学变化，则该群被认为是PS阳性群。?生长停滞和消瘦，腹股沟淋巴结肿大，呼吸困难，腹泻和黄疸的症状可能出现;?淋巴组织出现特征性的病理组织学变化，淋巴细胞消失，同时出现组织细胞浸润、包涵体和巨大细胞;?在发病猪淋巴组织病变中用IH或ISH方法检测到中等或大量的PV-2。 这个定义不是很完美，预测的问也不明确(国家/地区死亡率水平和一群中5头猪是否都满足个体发病的标准等)。然而，这是北美和欧盟对PS诊断和研究具有丰富实践经验的研究团队的观点，为进一步争论提供了一个平台，因为在一个猪场，饲养管理的改变也可能引发死亡率的增加，通过减少饲养管理的改变和用抗生素控制细菌感染的方法不应该形成一个猪场或国家没有PS的基本论点。 4.3 PDNS的诊断 PDNS的诊断标准相对简单，主要包括[18]:?存在出血和坏死性皮肤病变，主要位于后肢和会阴部位，肾脏水肿、苍白，广泛的皮质淤斑;?存在系统性的坏死性脉管炎，及坏死性和纤维蛋白性血管球性肾炎。 从诊断的观点看，检测PV-2目前还没有列入PDNS的诊断标准中。 4.4 繁殖型PVD的诊断 目前有关这种PVD的病例定义还没有正式确定，应该包括3条主要标准[19]:?妊娠后期流产和死产，有时见胎儿心脏肥大;?心脏病变以大量纤维素性和坏死性心肌炎为特征;?在胎儿心脏和其他组织中出现大量PV-2。 4.5 实验室诊断确认方法 4.5.1 病毒检测方法 检测组织中PV-2的几种方法都是与检测其在PVD病变中的存在相关联，其中，原位杂交和免疫组织化学方法应用的最广泛。PVD病猪中PV-2的核酸或抗原一般在组织细胞、多核巨细胞和其他单核细胞/巨噬细胞系如肺泡巨噬细胞、肝窦星形细胞和淋巴组织的滤泡细胞检测到。也有可能在肾和呼吸道上皮细胞、血管内皮细胞、胰腺腺泡细 胞、腺管细胞质和单核-巨噬系统细胞、平滑肌细胞、肝脏细胞、肠道细胞、胰腺腺泡细胞和腺管细胞核内检测到病毒核酸或抗原。 PS的显微淋巴组织病变的严重程度与PV-2核酸或抗原的数量紧密相关。从临床健康猪或没有临床症状和眼观病变的病猪检出PV-2抗原或核酸时必须谨慎解释说明，因为PV-2的亚临床感染毒血症几乎发生在所有的猪场。PS病猪和PV-2亚临床感染猪的主要区别是病变组织样品中的PV-2含量，所以对组织/血清中病毒的定量PR、抗原捕捉ELISA和免疫细胞化学，冰冻切片是有用的诊断方法[20-21]。 非定量的、琼脂胶观察的PR技术也对检测PV-2非常敏感，但与ISH相比较，不能协同一致的检测出典型PVD显微病变明显的血清或腹股沟淋巴结中PV-2核酸，以及其不定量，因此不适宜检测诊断PVD。 4.5.2 抗体检测方法 基于细胞培养感染的PV-2的方法有免疫过氧化物酶细胞单层( iunperxidase nlayer assays IPA)、间接免疫荧光试验(IFA)及ELISA方法 (用PV-2感染的细胞单层或杆状病毒表达的PV-2壳粒蛋白包板)，研究机构用来检查PV-2的感染情况，但PV-2无处不在的事实和血清学阳转在PS病猪和非发病猪群没有太大差异， 使用血清学技术只能表明PV-2的感染，不能用于诊断临床是否发病，因此，血清学检测的价值十分有限，任何猪群都有PV-2抗体，无论发病或不发病，到20周龄时100%的猪都可能有PV-2的抗体[22]。