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当归饮子对慢性荨麻疹迟发相过敏反应的影响研究

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当归饮子对慢性荨麻疹迟发相过敏反应的影响研究 广州中医药大学 博士学位论文 当归饮子对慢性荨麻疹迟发相过敏反应的影响研究 姓名:肖红丽 申请学位级别:博士 专业:中医外科学 指导教师:崔学教 20060401 摘 要 1研究目的 针对既往对慢性荨麻疹的研究基本集中在速发相阶段的情况,尤其中药对慢性荨 麻疹迟发相阶段的影响研究基本为空白,本课题首次从抑制迟发相过敏反应的角度研 究中药复方治疗慢性荨麻疹的机理。研究当归饮子对慢性荨麻疹迟发相的影响及对迟 发相阶段最重要的炎性介质自三烯B4的抑制作用。从抗炎角度阐明当归饮子治疗慢 性荨麻疹的作用...
当归饮子对慢性荨麻疹迟发相过敏反应的影响研究
广州中医药大学 博士学位论文 当归饮子对慢性荨麻疹迟发相过敏反应的影响研究 姓名:肖红丽 申请学位级别:博士 专业:中医外科学 指导教师:崔学教 20060401 摘 要 1研究目的 针对既往对慢性荨麻疹的研究基本集中在速发相阶段的情况,尤其中药对慢性荨 麻疹迟发相阶段的影响研究基本为空白,本课题首次从抑制迟发相过敏反应的角度研 究中药复方治疗慢性荨麻疹的机理。研究当归饮子对慢性荨麻疹迟发相的影响及对迟 发相阶段最重要的炎性介质自三烯B4的抑制作用。从抗炎角度阐明当归饮子治疗慢 性荨麻疹的作用机制,从而在治疗慢性荨麻疹方面开拓新的治疗方法和研究思路。 2研究方法 2.1文献研究 文献,系统了解慢性荨麻疹的研究现状。确认中药治疗慢性荨麻疹的基础研 究偏少,尤其中药对慢性荨麻疹迟发相阶段的影响研究基本为空白。 2.2临床研究 采用单盲随机对照法,将合格的120个病例随机分为A、B、C、D四组。A组予当 归饮子,B组予咪唑斯汀,e组予孟鲁司特,D组予氯雷他定。比较各组治疗慢性荨麻 疹的近期、远期疗效、复发率,比较各组患者治疗前后血浆中白三烯B4的含量。 2.3实验研究 2.3.1小白鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验 采用随机对照法,将NIH小鼠致敏后,分为致敏对照组(A组)、当归饮子高剂量 组(B组)、当归饮子低剂量组(C组)、咪唑斯汀组(D组)、孟鲁司特组(E组)、氯雷他 定组(F组)、地塞米松组(G组),分别给药,再进行抗原攻击,30分钟后采血并处死 小白鼠。测定小白鼠血清中白三烯B4的含量。将小白鼠致敏皮片剪下,进行比色测 定。检测各组对小白鼠被动皮肤过敏反应的抑制率、血清中白三烯B4的含量,及二 者的相关性。 2.3.2致敏小鼠脾淋巴细胞释放白三烯B4的抑制实验 采用随机对照法,将BALB/c小白鼠分为正常对照组和致敏组。致敏组又分为致 敏对照组(A组)、二甲基亚砜(DMSO)组(B组)、当归饮子高剂量组(C组)、当归饮子低 剂量组(D组)、咪唑斯汀组(E组)、孟鲁司特组(F组)、氯雷他定组(G组)、地塞米松 组(H组)。分离致敏后小鼠的脾淋巴细胞,用IO%FCS一1640细胞培养液调整细胞浓度, 置于细胞培养板中。除当归饮子外,将其它各组药物分别溶于DMSO,稀释并过滤除菌, 分别加入各组小鼠脾淋巴细胞悬液中孵育作预处理。再加入致敏原进行刺激。离心, 收集上清液,以ELISA法检测细胞上清液中白三烯B4的含量。进行各组间比较。 3研究结果 3.1临床研究 慢性荨麻疹近期疗效的临床研究结果显示,当归饮子组、咪唑斯汀组、氯雷他定 组的近期疗效无显著性差异,均有很好的近期疗效(P>O.05);而孟鲁司特组的近期 疗效低于当归饮子组、咪唑斯汀组、氯雷他定组(PO.i0);氯雷他定组治疗结束后4周及8周时的复发例数与当归饮子组、 咪唑斯汀组、孟鲁司特组比较均有显著性差异,复发率相对较高(P 0.25);孟鲁司特也能降低患者LTB4水平(P 0.50)。 3.2实验研究 3.2.1小白鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验 实验结果显示,当归饮子高剂量组、当归饮子低剂量组、咪唑斯汀组、孟鲁司特 组、氯雷他定组、地塞米松组各组对小白鼠PCA均有明显的抑制作用(PO.50);当归饮子低剂量组和盂鲁司特组对小鼠PCA的抑制作用再次之(P< 0.01),二组间的抑制率无显著性差异(P>O.50)。 当归饮子高剂量组、当归饮子低剂量组、咪唑斯汀组、孟鲁司特组、地塞米松组 血清LTB4含量明显低于致敏对照组、氯雷他定组,经统计学分析有显著性差异(P< 0.05);当归饮子高剂量组血清中LTB4含量明显低于当归饮子低剂量组,经统计学分 析有显著性差异(PO.05)。 3.2.2致敏小鼠脾淋巴细胞释放白三烯B4的抑制实验 致敏对照组的小鼠脾淋巴细胞释放LTB4的水平明显高于正常对照组(PO.50): 当归饮子高剂量组、当归饮子低剂量组、眯唑斯汀组、地塞米松组与致敏对照组、二 甲基亚砜组比较均有显著性差异(P
现出一定的 剂量依赖性。综上所述,当归饮子可以抑制慢性荨麻疹的迟发相过敏反应,当归饮子 对LTB4的抑制作用是其临床疗效的基础之一。 关键词:慢性荨麻疹 迟发相 白三烯 当归饮子 lll EffectofChineseAngeIicaDecoctionon Late—phasereactionofchronicurticaria ABSTRACT SpeciaIity:SurgeryofTradjtionalOh}Des8Medlcine Author:XiaoHongIi Tutor:CuiXuejiao 1 Objective Sincetheresearchaboutchronicurticaria(cu)mainlyconcentratedonthe early-phasereaction(EPR)ofitandthestudyabouttheeffectofChineseherb onthelate—phasereaction(LPR)ofCUwasalmostblankinthepast,thistopic researchthefunctionalmechanismofChineseherbonCUinrespectto inhibitingthelate—phasereaction(LPR)forthefirsttime.Thistopic researchtheinhibitoryeffectofChineseAngelicaDecoction(CAD)onLPRof CUandleukotrieneB4whichisaveryimportantinflammatorymediatorinthe LPRofCU.Thistopicwili expandnewtreatmentandresearchmethodforCU attheangleofanti—inflammation. 2 Method 2.1Literatureinvestigation Theliteratureonchronicurticaria(CU)wassummarizedinorderto systematicallyfathomthecurrentsituationofCU.The1iterature investigationindicatesthatthefoundationalresearchofChineseherbonCU isscarce,andespeciallytheresearchaboutChineseherbonlate~phase reactionofCUisalmostblank. 2.2C1inicalstudy Adoptingtheruleofsingleblind,randomandcontrast,120caseswere dividedintofourgroups,groupAtakingChineseangelicadecoction,groupB takingMizolastine,groupCtakingMontelukast,andgroupDtakingloratadine- Comparetheearlycurativeeffect,prostecdtiveefficacy,relapserateand theserflm]evelof1eukotrieneB4inthefourgroups. 2.3Experimentalstudy 2.3.1Micepassivecutaneousanaphylaxistest(PCA) Adoptingtheruleofrandomandcontrast,sensitizedNIHmiceweredivided intosevengroups。thesensitizedcontrolgroup(groupA),high—dosegroupof CAD(groupB),low—dosegroupofCAD(groupC),mizolastinegroup(group D),montelukastgroup(groupE),loratadinegroup(groupF),dexamethasone group(groupG).PCAwasinducedbyintraperitonealantiseruminjection.And themiceweretreatedwithgastricinfusionsimultaneously.30minutesLater afterthelastfeeding,antigenattackwasconducted.Thenthesemicewere executed,theirbloodwascolleeted,andthesensitizedsectionofskinWaS cutted.InhibitoryrateofPCAinsevengroupsweremeasuredbycolorimetric determination.TheserumlevelofLTB4wasdetectedbyELISAmethod. CorrelationbetweeninhibitoryrateofPCAandserumlevelofleukotriene B4wasmeasured. 2.3.2InhibitiontestonreleaseofleukotrieneB4fromspleenlymphocytes ofsensitizedmice Adoptingtheruleofrandomandcontrast,BALB/cmiceweredividedinto normalcontrolgroupandsensitizedcontrolgroup.Thesensitizedgroupwas dividedintoeightgroups,thesensitizedcontrolgroup(groupA),DMSO group(groupB),high—dosegroupofCAD(groupC),low—dosegroupofCAD(group D),mizolastinegroup(groupE),montelukastgroup(groupF),loratadine group(groupG),dexamethasonegroup(groupH).Miceweresensitizedby intraperitonealinjectionsofOVA.Thespleenlymphocyteswereisolatedand lymphocytesconcentrationwasregulatedwithcellculturesolution.Thenthe spleenlymphocyteswereincubatedwithdrugsolutionabove—mentionedprior toantigenre—attackwithOVA.ELISAwasappliedtodetectthelevelofLTB4 incellculturesupernateineverygroup. 3ResuIts 3.1CIinicalstudy Statisticanalysisindicatedthatnodifferenceofearlycurativeeffect wasfoundamongChineseangelicadecoction(A),mizolastine(B)and V loratadine(D)(P>0.05).Theearlycurativeeffectofmontelukast(C)waslower thanotherthreegroups(PO.10).TheprostecdtiveefficacyofgroupDwaslowerandthe relapserateofgroupDwashigherthangroupA,B,C(P<0.05).Therelapse intervalofgroupA,BandCwasobviouslylongerthangroupD(PO.25)andwassignificantly lowerthanprior—treatment(PO.50). 3.2Experimentalstudy 3.2.1MicepassiveCUtaneousanaphylaxiStest(PCA) GroupB,C,D,E,FandG couldsignificantlyinhibitPCAin mice(P<0.001).Theinhibitoryrateofdexamethasone(groupG)wasstrongest amonga11groups(P0.50).TheinhibitoryeffectofgroupC,Ewas statisticallysimilar(P>O.50)andinferiortogroupB,D,F(P<0.001). TheserumlevelofLTB4ingroupB,C,D,E,GwassignificantlYlowerthan thatofgroupA(sensitizedcontrolgroup)andgroupF(PO.50).GroupC,D,E,HcouldsignificantlyinhibitthereleaseofLTB4from spleenlymphocytes.ThereleaselevelofLTB4ingroupC,D,E,Hdiffered statisticallYfromgroupA,B(P<0.01).TheinhibitoryeffectofgroupHwas strongerthangroupC,D,E(P0.50四组性别构成无显著性差异 lO 当归饮子对慢性荨麻疹迟发相过敏反应的影响研究 表2荨麻疹患者年龄构成比较(岁) P>O.50四组年龄构成无显著性差异 2.1.7处理措施:A组予当归饮子,每日一剂,水煎二次合汁,分二次口服;B组予 眯唑斯汀,每日lOmg口服;C组予孟鲁司特,每日lOmg口RE;D组予氯雷他定,每 日lOmg口服。均阻4周为一疗程,第4周结束时停药,进行近期疗效评定。并分别 于治疗结束后4周及8周时随访,进行远期疗效及复发率的评定。 2.1.8症状和体征评分标准:采用4级评分法,评分内容包括皮肤瘙痒、风团数量和 风团大小 皮肤瘙痒 风团数量 风团大小 0分为无瘁感,1分为轻度瘙痒,2分为中度瘙痒,3分为严重瘙痒。 0分为无风团,1分为l~6个,2分为7~12个,3分为>12个。 O分为无风团,1分为直径20mm。 2.1.9疗效判断标准治疗前后症状和体征评分的总和为总评分。 下降指数=(治疗前总评分一治疗后总评分)/治疗前总评分×100%。 疗效标准:①痊愈,下降指数=100%;②显效,60%4下降指数<100%;③有效,20%4 下降指数<60%;④无效,下降指数<20%。以痊愈与显效之和计算有效率。 2.1.10复发标准:对各组中痊愈的病例追踪观察8周,每4周随访1次,统计复发 率。 2.1.11辅助观察指标:设正常对照组30例,均为健康志愿者,无慢性疾病及过敏性 疾病史。检测
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