高压蒸汽灭菌锅的使用

毋 年第‘期 年 月出版 高压蒸汽灭菌锅的使用 王 芳 李 滨 郭恒俊 郭兴启 《山东农业大学生命科学学院 山东泰安 摘 要 针时高压蒸汽灭菌锅在使用 中常常遇到的情况 , 介绍 了装锅容量 、进汽速度 、 冷空气排除 等对灭菌效果的影响 。 并提出 对策和解决办法 , 以期延长高压 蒸汽灭菌锅的使用寿命 , 达到有效灭菌的 目的 。 关健词 高压蒸汽灭菌锅 装锅容量 灭菌效果 高压蒸汽灭菌锅是微生物实验中必不可少的 设备 , 离开了灭菌这一过程 , 微生物实验很难进行 。 我校微生物学实验室 目前使用的灭菌器为下排气 式蒸汽灭菌锅和脉动真空压力蒸汽灭菌器两种 , 在 操作过程中常常遇到灭菌失败的情况 , 其原因主要 是冷空气没有充分地从高压蒸汽灭菌器内排出 , 以 致影响热能的穿透 , 降低蒸汽的分压 , 使之不能升 到应有的温度 , 因而要掌握灭菌锅的正确使用 , 不 仅要了解灭菌锅的构造 , 而且使用经验也非常重 要 。 笔者多年从事微生物学实验准备工作并经常 使用高压锅 , 本文对高压蒸汽灭菌锅使用过程中的 注意事项以及影响因素作一归纳总结 , 并针对具体 情况具体分析 , 提出自己的对策和见解 , 为使用高 压锅的同行提供参考 , 提高实验教学质量 。 商压锅使用注意事项 装锅前的准备 将待灭菌物品放人锅内之前 , 一定先检查锅内 水位 , 观察控制面板上的工作灯和水位灯的显示情 况 , 显示低水位应先向锅内加水 , 当高水位灯亮时 应停止加水 , 当水位过多应开启下排水阀放去内胆 中的多余水量 。 另外 , 使用高压锅时特别应注意的 是锅盖的旋开 , 如果锅盖旋不到一定高度 , 当旋紧 锅盖时很容易将橡胶封闭圈摩擦变形 , 时间久了封 闭圈就会断裂 、漏气 , 高压锅暂时就没法使用 , 影响 实验进行 。 高压锅封闭圈一般都是专用的 , 不仅价 格贵而且还要向生产厂家订购 , 需要很长时间 , 影 响实验的准备 。 因此 , 为避免这种情况发生 , 必须 将锅盖旋至一定高度 , 减少对封闭圈的摩擦 , 延长 其使用寿命 。 灭菌物品大小适宜 , 布局合理 为了达到灭菌的目的 , 锅内待灭菌物品应不要 太紧太满 , 以利于蒸汽流通 。 体积过大蒸汽就不易 穿透物品 。 最下层物品摆放尽量稀疏 , 因下层蒸汽 量相对少 , 分压不够 , 往往造成灭菌不完全 。 因此 摆放时注意上下交错叠放 , 使留有较多空隙 , 利于 蒸汽穿透 。 如需要对较小物品灭菌时 , 应事先装在 容器中 , 所选容器也应尽量小且浅 , 且有通气孔 , 若 用过大 、过深及不带孔的容器 , 蒸汽不易穿透 。 同 时灭菌物品应尽量垂直放 , 不要平放 , 切勿挤压 。 掌握好装锅容量 , 正确调控进气速度 灭菌锅内装入物品的总量不能超过总容量的 , 否则不能达到灭菌的目的 , 物品和物品之间 应留有一定空隙 , 还要适当调控好蒸汽进入锅内的 速度 , 若往锅内过快输送蒸汽 , 极易形成湍流 , 致使 冷空气难于排出 , 如输送的速度过快时 , 虽然锅内 很快就达到所需的温度 , 但是蒸汽穿透灭菌物品需 要一定的时间 , 这样灭菌时间就相对减少 , 从而影 响了灭菌效果 , 故往锅内送气时 , 进气阀门不能完 全开大 , 必须逐渐开大 , 使之缓缓进气 。 但进气速 度也不能太慢 , 太慢锅内冷空气会长时间排不 出 去 , 空气的温度也随之增高 , 使之更难排出 。 因为 容器内的空气要依靠蒸汽的挤压而排除 , 所以送气 通讯作者 郭兴启 一 , 男 , 博士 , 教授 , 山东农业大学生命科学学院副院长 , 从事教学管理工作 , 主要研究方向 植物抗病毒 基因工程与分子生物学 。 一 一 。 年第 期 拿 脸 全 科 学 年 月出版 速度适宜 , 有利于热能对物品的穿透和冷空气的 排除 。 必须充分排除冷空气 压力蒸汽灭菌锅内蒸汽的温度不仅与压力有 关 , 而且与蒸汽的饱和度有关 。 灭菌锅内冷空气未 排尽时 , 即使蒸汽压力达到要求 , 温度也上不到相 应的高度 , 而且还影响高压蒸汽穿透被灭菌物品的 能力 。 故首先要打开进气阀门 , 引导外源蒸汽进人 夹层 , 冷空气与冷凝水由夹层的阻气器排出 , 大约 需要 后 , 再打开进气阀 , 蒸汽即进人锅内 , 如 此充分的时间即可排除冷空气 。 冷空气的排出是 灭菌效果可靠的保障 , 排气时间不能超过 。 如何判断冷空气是否排尽 , 可观察排气 口 的气体 , 若排气口气体呈白色雾状 或在排气口出口处连接 一橡皮管 , 将另一端插入冷水盆中 , 若管内排出气 体在冷水中产生气泡 , 示锅内空气尚未排尽 , 需 要继续排气 。 若不产生气泡 , 表示锅内空气已基本 排尽 。 当压力表显示锅内达到所需温度时 , 应尽量 关小排气阀以防蒸汽损失 , 造成锅内缺水 , 但注意 关闭不能太紧 , 应稍有气体排出 , 保持温度压力相 匹配 。 影响灭菌效果的因素 水 水温极大地影响灭菌锅真空系统的 性能 , 水温过高可能会导致预定的真空水平改变 , 因此水温应尽量低 。 灭菌锅使用的水应符合应用 水质量 , 并且温度不超过 巧 ℃ 。 水的硬度值在 一 之间 , 超出该范围的硬度值可能会引 起水垢和腐蚀等问题 , 从而缩短灭菌锅的使用寿 命 。 因此 , 使用的水需经过过滤和处理 , 并且应保 持锅体清洁 。 蒸汽的干燥程度 灭菌锅应使用干燥程 度不小于 的饱和蒸汽 , 即蒸汽含水量不超过 金属负载状态下 , 干燥程度不小于 , 以 保持温度与压力符合线性关系 。 灭菌时间 灭菌时间是指灭菌过程中灭 菌室内达到温度后灭菌所需时间 。 它包括 热 穿透时间 、热死亡时间 、 安全时间 。 使用真空压力 蒸汽灭菌锅 , 由于灭菌锅内负压较大 , 热穿透时间 仅为 。 操作中 , 应注意观察蒸汽的进汽速度 和压力 , 一般保持压力和温度同步上升 。 液态物质灭菌时常发生的现象 在实际工作中常常需要对液体进行灭菌 , 高压 灭菌锅说明书中 , 也表明能够对瓶状的液体进行灭 菌处理 , 但在实验中却遇到了意外的情况 用敞口 的玻璃瓶灭菌 , 其结果是玻璃瓶 中的液体减少 了 乃 用塑料薄膜紧紧封住瓶 口 , 其结果封 口塑料薄 膜中间破裂 , 玻璃瓶中的液体仍然减少了 。 造成此现象的原因是在较长的加热和保压过 程中 , 灭菌锅和瓶作为一个系统 , 处于相对平衡状 态 , 当蒸汽灭菌锅的压力达到 , 瓶内液体 的压力也为 , 当限压阀开启后 , 灭菌锅的 压力在短时间降到 , 但玻璃瓶中液体压力 仍为 , 与玻璃瓶外的压 力差 为 △尸 二 一 二 , 即液体内部的 压力大于液体表面的压力 , 符合液体沸腾的条件 , 从而发生沸腾现象 , 液体溢出。 当 尸 大到一定数 量值时 , 容器中的液体产生喷射现象 。 在对液态物质进行灭菌时 , 当灭菌结束注意卸 压不能过快 , 尽量将排气阀关小 , 保持自然降压 , 保 持系统原有 的平衡 , 以防产生 液体减少或喷溅 现象 。 压力蒸汽灭菌器灭菌效果的验证方法 高压灭菌锅属于强检仪器 , 必须进行灭菌效果 的验证 。 高压灭菌锅使物品灭菌后达到无菌要求 , 这是微生物实验成功的一个基本保证 。 将嗜热芽 抱杆菌纸片用无菌镊子放人封闭试管中 , 化学指示 卡和留点温度计放人敞口的试管中 , 以上两种试管 各准备 一 支 , 分别放置在高压灭菌锅蒸汽 口 处 、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间 处 。 留点温度计标化合格后可用于验证试验 。 检 测前 , 需将温度计的水银柱甩至 ℃以下 。 每次监测后留点温度计的温差应在 ℃之间 , 则说明灭菌锅内的温度分布是均匀的 。 灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放人 灭菌后 的澳甲酚紫陈水培养基内 , 一 ℃培养 一 小时 , 观察颜色变化 。 如培养基变为黄色 , 说明菌片中的嗜热芽抱杆菌尚未完全灭活 , 细菌仍 可在培养基中生长 , 分解葡萄糖产酸变为黄色 。 如 培养基颜色不变化仍为紫色 , 则说明芽抱杆菌已灭 活 。 同时要用未经灭菌的纸片放人培养基内作为 阳性对照 , 不加纸片的空白培养基作为阴性对照 。 化学指示卡上 的指示色块 , 在高压蒸汽灭菌 时 , 由淡黄色变为黑色 。 随着颜色变化的深浅 , 并 与对照色相比 , 可判断灭菌效果是否达到要求 。 化 学指示卡应在干燥处保存 。 遇潮会变色 , 影响灭菌 一 一 赦 必 , 年第 期 的 年 月出版 浅谈电子天平使用中的误区 史济月 王桂燕 赵 翔 王绍宁 兰 阳 《沈阳药科大学制药工程学院 辽宁沈阳 摘 要 归纳总结 了电子天平在使用过程中经常出现的几大误 区 , 在使用 中避免陷入误 区 , 使电子 天平更好地为教学和科研服务 。 关健词 电子天平 使用 误区 用电磁力平衡称物体重力的天平称为电子天 平 。 电子天平按其精度可分为超微量电子天平 、微 量电子天平 、半微量电子天平 、常量电子天平等 。 电子天平具有称量准确可靠 、显示快速清晰 , 并具 有自动检测系统 、简便的自动校准装置以及超载保 护装置等优点 。 因而被广泛应用于质量传递 、化学 分析等科技领域 。 电子天平作为一种计量工具 , 因其操作简单 、 使用方便 , 在医药 、化工等领域的科研和教学中被 广泛使用 。 但是 , 我们在使用电子天平的过程中会 忽视一些细节问题 , 陷人使用误区而不 自知 。 鉴于 电子天平在使用中容易出现的误区 , 现归纳总结几 点供参考 。 天平开机后是否即可直接进行称 在日常实验教学中发现 , 有很多学生将电子天 平接通电源后即直接进行称量 , 这样是不能获得准 确的称量结果的 。 正确的操作是 在称量前 , 应先调整天平的水 平调节脚 , 使水泡位于水准器的中心位置 , 保证天 平处于水平状态 。 然后 , 按说明书的要求将天平接 通电源进行预热 。 不同精度的电子天平所需的预 热时间是不同的 , 一般情况下 , 天平的精度越高 , 所 需的预热时间就越长 。 例如 , 使用精度为 的电子天平时 , 预热时间通常应达到 分钟才能 获得准确的称量结果 。 天平回零是否可直接称 , 峨二, 》 》 《 , 《 嘴二知 》 《 ‘二》 ‘ 卜 ‘二 , 》 创乙》 月二 , , ‘忿 , 《 》 《 《二》 嘴 《 ‘ 《二》 》 二 心 ‘ 》 《 》 ‘二卜 ‘ 司 记 《忿卜 效果的观测 。 高压蒸汽灭菌必须使蒸汽顺利进人灭菌锅内 , 与灭菌物品接触 , 并将原有的冷空气排出方可达到 灭菌的效果 。 要进行空载热分布和满载热穿透力 验证 满载时不超过总体积的 乃 。 两种验证各 重复三次 。 个点六次试验表明温度均在 ℃ , 化学指 示卡变黑 程度与对照色一致 培养基均未改变颜 色 , 说明高压蒸汽灭菌效果合格 。 结束语 为了提高灭菌效果 、防止事故发生并延长高压 锅的使用寿命 , 从灭菌开始到结束每一步都要严格 按要求进行操作 。 提高对灭菌工作的认识 , 加强灭 菌知识学习 。 同时要加强灭菌质量检查工作 , 对灭 菌锅的装载 、检测等指标严格检查 , 把好灭菌质量 关 , 根据实际操作中存在的问题 , 有针对性地采取措 施 , 消除隐患 , 保证消毒灭菌效果 , 使微生物实验准 一 一 备工作再上一个新台阶。 收稿 日期 , , 参考文献 【 顾德鸿 如何正确进行高压蒸汽灭菌锅灭菌 消毒与灭菌 , , 一 【 」 赵杨 压力蒸汽灭菌锅使用中存在的问题与对策【 中国 公共卫生 , 仪幻 , 一 〔 〕 宋玉君 压力蒸汽灭菌技术应用中的问题及对策〔 〕中华 医院感染学杂志 , , 【 〕 潘红梅 、王云彩 、常鸿雁 压力蒸汽灭菌物品包扎方式与灭 菌效果的分析〔〕中华医院感染学杂志 , , 一 〔 」 于瑞英 、张文俊 、 陈伟 脉动真空与下排气压力蒸汽灭菌柜 灭菌效果比较【 中国消毒学杂志 , , 。 【 」 熊海元 嗜热脂肪芽抱杆菌在四种介质中的耐热性【 」国 医药工业杂志 , , 一 第一作者简介 王芳 一 , 女 , 硕士 , 实验师 。