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gb5750-85 (2001年修订版)

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gb5750-85 (2001年修订版) Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 ��� � ሚ௚ᕎၵ� 35.1ອලૢၵࣚ 35.1.1 范围 本规范规定了生活饮用水及其水源水中细菌总数的测定方法 本规范适用于测定生活饮用水及其水源水中的细菌总数 35.1.2 原理 细菌总数是指水样在一定条件下培养后(培养基成分 培养温度和时间 pH 需氧 性质等)所得 l mL 水样所含菌落的总数 按本规范规定所得结果只包括一群能在营养 琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数 35.1...
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Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 ��� � ሚ௚ᕎၵ� 35.1ອලૢၵࣚ 35.1.1 范围 本规范规定了生活饮用水及其水源水中细菌总数的测定方法 本规范适用于测定生活饮用水及其水源水中的细菌总数 35.1.2 原理 细菌总数是指水样在一定条件下培养后(培养基成分 培养温度和时间 pH 需氧 性质等)所得 l mL 水样所含菌落的总数 按本规范规定所得结果只包括一群能在营养 琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数 35.1.3 培养基与试剂 35.1.3.1 营养琼脂 35.1.3.1.1 成分: A 蛋白胨 10 g B 牛肉膏 3 g C 氯化钠 5 g D 琼脂 10 20 g E 蒸馏水 1000 mL 35.1.3.1.2 制法 将上述成分混合后 加热溶解 调整 pH 为 7.4 7.6 分装于玻璃容 器中(如用国产含杂质较多的琼脂时 应先过滤) 经 121 灭菌 20min 储存于冷暗处 备用 35.1.4 仪器 35.1.4.1 高压蒸汽灭菌器 35.1.4.2 干热灭菌箱 35.1.4.3 培养箱 36 1 35.1.4.4 电炉 35.1.4.5 天平 35.1.4.6 冰箱 35.1.4.7 放大镜或菌落计数器 35.1.4.8 pH 计或精密 pH 试纸 35.1.4.9 灭菌试管 平皿(直径 9cm) 刻度吸管 采样瓶等 35.1.5 检验步骤 35.1.5.1 生活饮用水 35.1.5.1.1 以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 l mL 充分混匀的水样 注入灭菌平皿中 倾 注约 15 mL 已融化并冷却到 45 左右的营养琼脂培养基 并立即旋摇平皿 使水样与 培养基充分混匀 每次检验时应做一平行接种 同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培 养基作为空白对照 35.1.5.1.2 待冷却凝固后 翻转平皿 使底面向上 置于 36 1 培养箱内培养 24h 进 行菌落计数 即为水样 l mL 中的细菌总数 35.1.5.2 水源水 35.1.5.2.1 以无菌操作方法吸取 l mL 充分混匀的水样 注入盛有 9 mL 灭菌生理盐水的 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 试管中 混匀成 1:10 稀释液 35.1.5.2.2 吸取 1:10 的稀释液 l mL 注入盛有 9 mL 灭菌生理盐水的试管中 混匀成 1:100 稀释液 按同法依次稀释成 1:1000 1:10000 稀释液等备用 如此递增稀释一次 必 须更换一支 1 mL 灭菌吸管 35.1.5.2.3 用灭菌吸管取 2 3 个适宜稀释度的水样 l mL 分别注人灭菌平皿内 以下 操作同生活饮用水的检验步骤 35.1.6 菌落计数及方法 作平皿菌落计数时 可用眼睛直接观察 必要时用放大镜检查 以防遗漏 在记下 各平皿的菌落数后 应求出同稀释度的平均菌落数 供下一步计算时应用 在求同稀 释度的平均数时 若其中一个平皿有较大片状菌落生长时 则不宜采用 而应以无片 状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数 若片状菌落不到平皿的一半 而其余 一半中菌落数分布又很均匀 则可将此半皿计数后乘 2 以代全皿菌落数 然后再求 该稀释度的平均菌落数 35.1.7 不同稀释度的选择及报告方法 35.1.7.1 首先选择平均菌落数在 30 300 之间者进行计算 若只有一个稀释度的平均菌 落数符合此范围时 则将该菌落数乘以稀释倍数报告之(见实例 1) 35.1.7.2 若有两个稀释度 其生长的菌落数均在 30 300 之间 则视二者之比值来决定 若其比值小于 2 应报告两者的平均数(如实例 2) 若大于 2 则报告其中稀释度较小的 菌落总数(如实例 3) 若等于 2 亦报告其中稀释度较小的菌落数(见实例 4) 35.1.7.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于 300 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以 稀释倍数报告之(见实例 5) 35.1.7.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于 30 则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以 稀释倍数报告之(见实例 6) 35.1.7.5 若所有稀释度的平均茵落数均不在 30 300 之间 则应以最接近 30 或 300 的平 均菌落数乘以稀释倍数报告之 (见实例 7) 35.1.7.6 若所有稀释度的均无菌落生长 则以 1乘以稀释倍数报告之 35.1.7.7 菌落计数的报告:菌落数在 100 以内时按实有数报告 大于 100 时 采用二位有 效数字 在二位有效数字后面的数值 以四舍五入方法计算 为了缩短数字后面的零 数也可用 10 的指数来表示(见表 35-1 报告方式 栏) 表 35-1 稀释度选择及菌落总数报告方式 不同稀释度的平均菌落数 实例 10 1 10 2 10 3 两个稀释度 菌落数之比 菌落总数 (CFU/mL) 报告方式 (CFU/mL) 1 1365 164 20 16400 16000 或 1.6 104 2 2760 295 46 1.6 37750 38000 或 3.8 104 3 2890 271 60 2.2 27100 27000 或 2.7 104 4 150 30 8 2 1500 1500 或 1.5 103 5 多不可计 1650 513 513000 510000 或 5.1 105 6 27 11 5 270 270 或 2.7 102 7 多不可计 305 12 30500 31000 或 3.1 104 8 0 0 0 < l l0 < l l0 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 ��� � ᕎ߿ݐ௚཮� 36.1 ࢰ৒ࣔୋࣚ 36.1.1 范围 本规范规定了生活饮用水中及其水源水中总大肠菌群的多管发酵测定方法 本规范适用于生活饮用水及其水源水中总大肠菌群的测定 36.1.2 原理 总大肠菌群系指一群在 37 培养 24h 能发酵乳糖 产酸产气 需氧和兼性厌氧的 革兰氏阴性无芽胞杆菌 该菌群主要来源于人畜粪便 具有指示菌的一般特征 故以 此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量 水中总大肠菌群数系以 100 mL 水样中污染的总大肠菌群最可能数(MPN)表示 36.1.3 培养基与试剂 36.1.3.1 乳糖蛋白胨培养液 36.1.3.1.1 成份 A 蛋白胨 10 g B 牛肉膏 3 g C 乳糖 5 g D 氯化钠 5 g E 溴甲酚紫乙醇溶液(16g/L) 1 mL F 蒸馏水 1000 mL 36.1.3.1.2 制法 将蛋白胨 牛肉膏 乳糖及氯化钠溶于蒸馏水中 调整 pH 为 7.2 7.4 再加入 1 mL 溴甲酚紫乙醇溶液(16g L) 充分混匀 分装于装有倒管的试管中 115 高压灭菌 20min 储存于冷暗处备用 36.1.3.2 二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液 按上述乳糖蛋白胨培养液(36.1.3.1)除蒸馏水外 其它成份量加倍 36.1.3.3 伊红美蓝培养基 36.1.3.3.1 成份 A 蛋白胨 10 g B 乳糖 10 g C 磷酸氢二钾 2 g D 琼脂 20 30 g E 蒸馏水 1000 mL F 伊红水溶液(20g/L) 20 mL G 美蓝水溶液(5g/L) 13 mL 36.1.3.3.2 制法 将蛋白胨 磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中 校正 pH 为 7.2 加入乳糖 混匀后分装 以 115 高压灭菌 20min 临用时加热熔化琼脂 冷至 50 55 加入伊红 和美蓝溶液 混匀 倾注平皿 36.1.3.4 革兰氏染色液 36.1.3.4.1 结晶紫染色液 A 成份 a 结晶紫 1 g b 乙醇[ϕ(C2H5OH)=95 ] 20 mL 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 c 草酸铵水溶液(10 g/L) 80 mL B 制法 将结晶紫溶于乙醇[ϕ(C2H5OH)=95 ]中 然后与草酸铵溶液混合 注:结晶紫不可用龙胆紫代替 前者是纯晶 后者不是单一成份 易出现假阳性 结晶紫溶液放置过久会产生沉淀 不能再用 36.1.3.4.2 革兰氏碘液 A 成份 碘片 1 g 碘化钾 2 g 蒸馏水 300 mL B 制法 将碘和碘化钾先进行混合 加入蒸馏水少许 充分振摇 待完全溶解后 再 加蒸馏水 36.1.3.4.3 脱色剂:乙醇[ϕ(C2H5OH)=95 ] 36.1.3.4.4 沙黄复染液 A 成分 a 沙黄 0.25 g b 乙醇[ϕ(C2H5OH)=95 ] 10 mL c 蒸馏水 90 mL B 制法 将沙黄溶解于乙醇中 待完全溶解后加入蒸馏水 注:如沙黄买不到 可用苯酚复红染色液(1+10) 作复染液 复染时间为 10s 36.1.3.4.5 染色法 A 将培养 18 24h 的培养物涂片 B 将涂片在火焰上固定 滴加结晶紫染色液 染 1 min 水洗 C 滴加革兰氏碘液 作用 1 min 水洗 D 滴加脱色剂 摇动玻片 直至无紫色脱落为止 约 30s 水洗 E 滴加复染剂 复染 1min 水洗 待干 镜检 36.1.4 仪器 36.1.4.1 培养箱 36 1 36.1.4.2 冰箱 0 4 36.1.4.3 天平 36.1.4.4 显微镜 36.1.4.5 平皿:直径为 9 cm 36.1.4.6 试管 36.1.4.7 分度吸管 1 mL 10 mL 36.1.4.8 锥形瓶 36.1.4.9 小倒管 36.1.4.10 载玻片 36.1.5 检验步骤 36.1.5.1 乳糖发酵试验 36.1.5.1.1 检验生活饮用水时 取 10 mL 水样接种到 10 mL 料乳糖蛋白胨培养液中 取 1 mL 水样接种到 10 mL 单料乳糖蛋白胨培养液中 另取 1 mL 水样注入到 9 mL 灭菌生 理盐水中 混匀后吸取 1 mL(即 0.1 mL 水样)注入到 10 mL 单料乳糖蛋白胨培养液中 每一稀释度共接种 5 管 对已处理过的出厂自来水 需经常检验或每天检验一次的 可直接种 5 份 10 mL 双料培养基 每份接种 10 mL 水样 36.1.5.1.2 检验水源水时 如污染较严重 应加大稀释度 可接种 1 0.1 0.01 mL 甚 至 0.1 0.01 0.001 mL 每个稀释度接种 5 管 每个水样接种 15 管 接种 1 mL 以 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 下水样时 必须作 10 倍递增稀释后 取 1 mL 接种 每递增稀释一次 换用 1支 1 mL 灭菌分度吸管 36.1.5.1.3 将接种管置 36 1 培养箱内 培养 24 2h 如所有乳糖蛋白胨培养管都不 产气产酸 则可报告为总大肠菌群阴性 如有产酸产气者 则按下列步骤进行 36.1.5.2 分离培养 将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上 于 36 1 培养箱内培养 18 24h 观察菌落形态 挑取符合下列特征的菌落 深紫黑色 具有金属光泽的菌落 紫黑色 不带或略带金属光泽的菌落 淡紫红色 中心较深的菌落 作革兰氏染色 镜检和证实试验 36.1.5.3 证实试验 经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽胞杆菌 同时接种乳糖蛋白胨培养液 置 36 1 培养箱中培养 24 2h 有产酸产气者 即证实有总大肠菌群存在 36.1.5.4 结果报告 根据证实为总大肠菌群阳性的管数 查 MPN 检索表 报告每 l00 mL 水样中的总大 肠菌群 MPN 值 如所有乳糖发酵管均阴性时 可报告未检出总大肠菌群 表 36-1 用 5 份 10 mL 水样时 各种阳性和阴性结果组合时的 MPN 5 个 10mL 管中阳性管数 MPN 0 0 1 2.2 2 5.1 3 9.2 4 16.0 5 >16 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 表 36-2 用 5 管 10mL 5 管 1mL 5 管 0.1mL 时 阳性及阴性结果不同组合的 MPN 其中阳性管数 其中阳性管数 5 个管每 管 10mL 5 个管每 管 1mL 5 个管每 管 0.1mL MPN 5 个管每 管 10mL 5 个管每 管 1mL 5 个管每 管 0.1mL MPN 0 0 0 <2 4 2 1 26 0 0 1 2 4 3 0 27 0 1 0 2 4 3 1 33 0 2 0 4 4 4 0 34 1 0 0 2 5 0 0 23 1 0 1 4 5 0 1 31 1 1 0 4 5 0 2 43 1 1 1 6 5 1 0 33 1 2 0 6 5 1 1 46 2 0 0 5 5 1 2 63 2 0 1 7 5 2 0 49 2 1 0 7 5 2 1 70 2 1 1 9 5 2 2 94 2 2 0 9 5 3 0 79 2 3 0 12 5 3 1 109 3 0 0 8 5 3 2 140 3 0 1 11 5 3 3 180 3 1 0 11 5 4 0 130 3 1 1 14 5 4 1 172 3 2 0 14 5 4 2 220 3 2 1 17 5 4 3 200 3 3 0 17 5 4 4 350 4 0 0 13 5 5 0 240 4 0 1 17 5 5 1 350 4 1 0 17 5 5 2 540 4 1 1 21 5 5 3 920 4 1 2 26 5 5 4 1600 4 2 0 22 5 5 5 >1600 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 36.2 ളැࣚ 36.2.1 范围 本规范规定了生活饮用水及其水源水中大肠菌群的滤膜测定方法 本规范适用于生活饮用水和低浊度的水源水中总大肠菌群数的测定 36.2.2 原理 用孔径为 0.45 m 的微孔滤膜过滤水样 细菌被截留在滤膜上 将滤膜贴在选择性 培养基上 经培养后 计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数 36.2.3 培养基与试剂 36.2.3.1 品红亚硫酸钠培养基 36.2.3.1.1 成份 A 蛋白胨 10 g B 酵母浸膏 5 g C 牛肉膏 5 g D 乳糖 10 g E 琼脂 15 20 g F 磷酸氢二钾 3.5 g G 无水亚硫酸钠 5 g H 碱性品红乙醇溶液(50g/L) 20 mL I 蒸馏水 1000 mL 36.2.3.1.2 储备培养基的制备 先将琼脂加到 500 mL 蒸馏水中 煮沸溶解 于另 500 mL 蒸馏水中加入磷酸氢二钾 蛋白胨 酵母浸膏和牛肉膏 加热溶解 倒人已溶解的琼脂 补足蒸馏水至 1000 mL 混匀后调 pH 为 7.2 7.4 再加入乳糖 分装 115 高压灭菌 20min 储存于冷暗处 备用 36.2.3.1.3 平皿培养基的配制 将上法制备的储备培养基加热融化 用灭菌吸管按比例吸取一定量的碱性晶红乙醇 溶液(36.2.3.1.1.H)置于灭菌空试管中 再按比例称取所需的无水亚硫酸钠置于另一 灭菌试管中 加灭菌水少许 使其溶解后 置沸水浴中煮沸 10min 以灭菌 用灭菌吸 管吸取已灭菌的亚硫酸钠溶液 滴加于碱性品红乙醇溶液至深红色退成淡粉色为止 将此亚硫酸钠与碱性品红的混合液全部加到已融化的储备培养基内 并充分混匀(防止 产生气泡) 立即将此种培养基 15 mL 倾人已灭菌的空平皿内 待冷却凝固后置冰箱内 备用 此种已制成的培养基于冰箱内保存不宜超过二周 如培养基已由淡粉色变成深 红色 则不能再用 36.2.3.2 乳糖蛋白胨培养液 同 36.1.3 36.2.4 仪器 36.2.4.1 滤器 36.2.4.2 滤膜 孔径 0.45 0.65 m 直径根据滤器规格 目前常用的有 3.5cm 和 4.7cm 两种 36.2.4.3 抽滤设备 36.2.4.4 无齿镊子 36.2.4.5 其他仪器同 36.1.4 36.2.5 检验步骤 36.2.5.1 准备工作 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 36.2.5.1.1 滤膜灭菌 将滤膜放人烧杯中 加入蒸馏水 置于沸水浴中煮沸灭菌三次 每次 15min 前两次煮沸后需更换水洗涤 2 3 次 以除去残留溶剂 36.2.5.1.2 滤器灭菌 用点燃的酒精棉球 火焰灭菌 也可用 121 高压灭菌 20min 36.2.5.2 过滤水样 用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分 将粗糙面向上 贴放在已灭菌的滤床上 固定 好滤器 将 100 mL 水样(如水样含菌数较多 可减少过滤水样量 或将水样稀释)注入 滤器中 打开滤器阀门 在-0.5 大气压下抽滤 36.2.5.3 培养 水样滤完后 再抽气约 5s 关上滤器阀门 取下滤器 用灭菌镊子夹取滤膜边缘 部分 移放在品红亚硫酸钠培养基(36.2.3.1)上 滤膜截留细菌面向上 滤膜应与培 养基完全贴紧 两者间不得留有气泡 然后将平皿倒置 放入 37 恒温箱内培养 22 24h 36.2.6 观察结果 36.2.6.1 挑出符合下列特征菌落进行革兰氏染色 镜检 紫红色 具有金属光泽的菌落 深红色 不带或略带金属光泽的菌落 淡红色 中心色较深的菌落 36.2.6.1.1 凡革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌 再接种乳糖蛋白胨培养液 于 37 培养 24h 有产酸产气者 则判定为总大肠菌群阳性 36.2.6.1.2 计算滤膜上生长的总大肠菌群数 以每 100 mL 水样中的总大肠菌群数报告之 (CFU/100 mL) ( ) ( ) ( )136mL 100 100 −…………×= 过滤的水样体积 数数出的总大肠菌群菌落总大肠菌群菌落数 mLCFU 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 ��� � ऒ߿ݐ௚཮� 37.1 ࢰ৒ࣔୋࣚ 37.1.1 范围 本规范规定了生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群的多管发酵测定方法 本规范适用于生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群的测定 37.1.2 原理 用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分开 在 44.5 仍能生长的大肠菌群 称为粪大肠菌群 37.1.3 培养基与试剂 37.1.3.1 EC 培养基 37.1.3.1.1 成分 A 胰蛋白胨 20 g B 乳糖 5 g C3 号胆盐或混合胆盐 1.5 g D 磷酸氢二钾 4 g E 磷酸二氢钾 1.5 g F 氯化钠 5 g G 蒸馏水 1000 mL 37.1.3.1.2 制法 将上述成分溶解于蒸馏水中 分装到带有倒管的试管中 115 高压灭 菌 20min 最终 pH 为 6.9 0.2 37.1.3.2 伊红美蓝琼脂(同 36.1.3.3) 37.1.4 仪器 37.1.4.1 恒温水浴:44.5 0.2 或隔水式恒温培养箱 37.1.4.2 其他同总大肠菌多管发酵法(36.1.4.1 36.1.4.9) 37.1.5 检验步骤 37.1.5.1 自总大肠菌乳糖发酵试验中的阳性管(产酸产气)中取 1滴转种于 EC 培养基中 置 44.5 水浴箱内(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面) 培养 24 2h 如所有管 均不产气 则可报告为阴性 如有产气者 则转种于伊红美兰琼脂平板上 置 44.5 培养 18 24h 凡平板上有典型菌落者 则证实为粪大肠菌群阳性 37.1.5.2 如检测未经氯化消毒的水 且只想检测粪大肠菌群时 或调查水源水的粪大肠 菌群污染时 可用直接多管粪大肠菌群方法 即在第一步乳糖发酵试验时按 36.1.5.1 接种放在 44.5 0.5 水浴中培养 以下步骤同 37.1.5.1 37.1.5.3 结果报告 根据证实为粪大肠菌群的阳性管数 查 MPN 检索表 报告每 100 mL 水样中粪大肠 菌群的 MPN 值 37.2 ളැࣚ 37.2.1 范围 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载 Daoister 书库 生活饮用水检验规范 GB 5750-85 修订版 卫生部 2001.6 本规范规定了生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群的滤膜测定方法 本规范适用于生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群数的测定 37.2.2 原理 将水样通过孔径为 0.45 m 的滤膜过滤 细菌被阻留在膜上 将滤膜贴在 MFC 培养 基上 44.5 培养后 计数典型菌落 37.2.3 培养基与试剂 37.2.3.1 MFC 培养基 37.2.3.1.1 成分 A 胰胨 10 g B 多胨 5 g C 酵母浸膏 3 g D 氯化钠 5 g E 乳糖 12.5 g F 胆盐 3 号(Bile salt No.3)或混合胆盐 1.5 g G 琼脂 15 g H 苯胺蓝 0.2 g I 蒸馏水 1000 mL 37.2.3.1.2 制法 在 1000 mL 蒸馏水中先加入玫红酸(10g/L)的氢氧化钠溶液 [c(NaOH)=0.2mol/L]10 mL 混匀后 取 500 mL 加入琼脂煮沸溶解 于另外 500 mL 蒸 馏水中 加入除苯胺蓝以外的其他试剂 加热溶解 倒人已溶解的琼脂 混匀调 pH 为 7.4 加入苯胺蓝煮沸 迅速离开热源 待冷却至 60 左右 制成平板 不可高压灭菌 制好的培养基应存放于 2 10 不超过 96h 本培养基也可不加琼脂 制成液体培养基 使用时加 2 mL 于灭菌吸收垫上 再将 滤膜置于培养垫上培养 37.2.3.2 EC 培养基(见 37.1.3.1) 37.2.4 仪器 37.2.4.1 隔水式恒温培养箱或恒温水浴 37.2.4.2 塑料培养皿:60mm 15mm 或 50mm 12mm 37.2.4.3 其他仪器同总大肠菌群滤膜法(36.2.4) 37.2.5 分析步骤 37.2.5.1 准备工作(同 36.2.5.1 或 36.2.5.1.2) 37.2.5.2 过滤水样(同 36.2.5.2) 37.2.5.3 培养:水样滤完后 再抽气约 5s 关上滤器阀门 取下滤器 用灭菌镊子夹取 滤膜边缘部分 移放在 M FC 培养基上 滤膜截留细菌面向上 滤膜应与培养基完全 贴紧 两者间不得留有气泡 然后将平皿倒置 放入 44.5 隔水式培养箱内培养 22 24h 如使用恒温水浴 则需用塑料平皿 将皿盖紧 或用防水胶带贴封每个平皿 将 培养皿成叠封入塑料袋内 浸到 44.5 恒温水浴里 培养 24 2h 粪大肠菌群在此培 养基上菌落为蓝色 非粪性大肠菌群菌落为灰色至奶油色 37.2.5.4 对可疑菌落转种 EC 培养基 44.5 培养 24 2h 如产气则证实为粪大肠菌群 37.2.5.5 计数被证实的粪大肠菌落数 计算每 100 mL 水中的粪大肠菌密度 ( ) ( ) ( )137mL 100 100 −…………×= 过滤的水样体积 数所计得的粪大肠菌菌落粪大肠菌菌落数 mLCFU 免费标准网(www.freebz.net) 标准最全面 免费标准网(www.freebz.net) 无需注册 即可下载
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