果蔬产品维生素C测定

果蔬产品中维生素 C 的分析检测 （4 学时） 【原理】 维生素 C 又称抗坏血酸，其纯品为白色无臭结晶，熔点为 190~192℃，溶于水或乙醇中， 在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件下较稳定。 维生素 C总量包括还原型 Vc、脱氢型 Vc 和 2,3-二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经 活性炭氧化为脱氧坏血酸，进一步水解为二酮古乐糖酸。二酮古乐糖酸与 2,4-二硝基苯肼偶联 生成红色的脎。其呈色的强度与二酮古乐糖酸浓度成正比，可以比色定量。 本法可用于蔬菜. 水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 活性炭 -----→ 2,4-二硝基苯肼 ---→ 红色脎 【试剂】 硫酸:C(1/2H2SO4)=4.5mol/L,小心加入 250mL 硫酸于 700mL 水中，冷却后稀释至 1000mL. 硫酸：9+1。900mL 硫酸（相对密度 1.84）加入 100mL 水中. 2,4-二硝基苯肼溶液: 20g/L。溶解 2g 2，4-二硝基苯肼于 100mL4.5mol/L 硫酸内，过滤。 不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。 草酸溶液；20 g/L。溶解 20g 草酸（H2C2O2）于 70mL 水中，稀释至 1000mL。 草酸溶液：稀释 500 mL20 g/L 草酸溶液到 1000mL。 硫脲溶液：10 g/L。溶解 5g 硫脲于 500 mL10 g/L 草酸溶液中。 硫脲溶液：20 g/L。溶解 10g 硫脲于 500 mL10 g/L 草酸溶液中。 盐酸：1mol/L.取 100 mL盐酸，加入水中，并稀释至 1200 mL。 抗坏血酸溶液：溶解 100mg纯抗坏血酸于 100 mL 10 g/L 草酸中，配成每毫升相当于 1mg 抗坏血酸。 活性炭：将 100g 活性炭加到 750 mL1mol/LHCl 中，回流 1~2h，过滤，用水洗数次，至滤 液中无铁离子（Fe3+）为止，然后置于 110℃烘箱中烘干。 【实验步骤】 1、样品的制备 称 20g鲜样和 20mL 20 g/L 草酸溶液，倒入研钵后打成均匀，倒入 100 mL 容量瓶中。用 10 g/L 草酸溶液稀释至刻度，混匀。将样液过滤，滤液备用。 （或: 称 100g 鲜样和 100mL 20 g/L 草酸溶液，倒入捣碎机中打成均匀，取 10~40g 匀将 （含 1~2mg 抗坏血酸）倒入 100 mL 容量瓶中。用 10 g/L 草酸溶液稀释至刻度，混匀。将样 液过滤，滤液备用。不易过滤的样品竟离心沉淀，将上层清夜过滤，备用。） 2、氧化处理（氧化液的制备） 取 25 mL 上述滤，加入 2 g 活性炭，振摇 1min，过滤，弃去最初数毫升滤液。取 10 mL 此 氧化提取液，加入 10 mL 10 g/L 硫脲溶液，混匀。 3、标准溶液的配制 加 2g 活性炭于 50mL标准溶液中，摇动 1min，过滤，取 1mL滤液于 50mL 容量瓶中，加 0.5 g 硫脲，用 10g/L 草酸溶液稀释至刻度，抗坏血酸浓度为 20ug/mL。 取试管 5 支，利用 20ug/mL 标准液配制成 1~10 ug/mL 标准溶液。 试管 20ug/mL 标准液（mL） 10g/L 硫脲溶液（mL） 维生素 C 浓度（ug/mL ） 1 1.0 9.0 2 2 2.0 8.0 4 3 3.0 7.0 6 4 4.0 6.0 8 5 5.0 5.0 10 3、呈色反应 处理过程 试管 0（空白） 试管 1~5（标准溶液） 试管 6（样品） 氧化液 4 mL 4 mL 4 mL 20g/L 2,4-二硝基苯肼溶液 0 1 mL 1 mL 保温（37+0.5℃） 3 h 冷却与否 X 是（凉水冷却） 是（凉水冷却） 20g/L 2,4-二硝基苯肼溶液 1 mL 0 0 放置 10~15min 冷却与否 是（凉水冷却） X X 硫酸（9+1）：（边冷却边滴边摇 试管，防止溶液温度上升，溶液 中糖炭化而转黑色，需要 1min） 5 mL 5 mL 5 mL 比色（λ：500nm） 调零 30min 后，测吸光度 【结果计算】 式中 c—从标准曲线查出或从回归方程算出样品氧化液总抗坏血酸的浓度，ug/mL; V—试样用 10g/L 草酸溶液定溶的体积，mL; m—试样质量，g; 1000—分别代 1000g样品中总 Vc 的含量和将 ug换算成 mg; F—样品氧化处理过程中的稀释倍数。