第07章 胺类药物的分析

null第七章 胺类药物的分析第七章 胺类药物的分析第一节 芳胺类药物的分析常见的芳胺类药物 常见的芳胺类药物 对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构null苯佐卡因null盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因胺null酰胺类药物的基本结构null非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）对乙酰氨基酚（扑热息痛）null醋氨苯砜null盐酸利多卡因null盐酸布比卡因一、结构与性质一、结构与性质 （一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。 （二） 酯键或酰胺键易水解 null （三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。 （四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。 null（六） UV （七） IR （五） 某些特征取代基（如酚羟基）的反应 二、鉴别试验 二、鉴别试验 （一）重氮化—偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 null 直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠 、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺null盐酸普鲁卡因 ChP（2000） [鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ） 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。 null 间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯 null对乙酰氨基酚 ChP（2000） [鉴别] （2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。 null  null（二）三氯化铁反应 对乙酰氨基酚 null（三）与重金属离子反应 1. 与铜和钴离子反应   null2．羟肟酸铁盐反应   3．与汞离子的反应 null（四）水解产物的反应 1. 盐酸普鲁卡因 ChP（2000）[鉴别] （2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。 nullnull2. 苯佐卡因 ChP（2000）[鉴别] （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。 null （五）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因 ChP（2000） [鉴别] 取本品0.2g，加水20ml溶解。 （1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。 盐酸布比卡因 ChP（2000）null2. 硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因 ChP（2000） [鉴别] （1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。null 盐酸布比卡因 ChP（2000） [鉴别] （2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。（六）UV null（七）IR 盐酸布比卡因 ChP（2000） [鉴别] （3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。三、杂质检查三、杂质检查（一）对乙酰氨基酚 1. 有关物质 杂质来源 中间体、副产物及分解产物 对氯乙酰苯胺 杂质对照品法 检查 TLC 其他杂质 参比杂质对照品法 null2. 对氨基酚 杂质来源 中间体、水解产物 反应原理 null检查方法 对照法 取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005％）。   null 2. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 检查方法 TLC 杂质对照品法 杂质来源 水解产生 null 精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各10 l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1 ∶ 1 ∶ 4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2％对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。 null（一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的药物四、含量测定 null 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。 nullnull2. 主要测定条件 （1）加入适量KBr加速反应 KBr为催化剂NaNO2+HCl→HNO2+NaCl HNO2+HCl→NOCl+H2O 在盐酸存在下，重氮化反应的机理为： nullnull（1）K1（2）K2 ∵ K1 ≈ 300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度null（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为： HBr＞HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3null盐酸 1:2.5～6； 加入盐酸： ① 重氮化反应速度加快； ② 重氮盐在酸性溶液中稳定； ③ 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果nullnull（3）室温条件下滴定 10～30℃ （4）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定 null3. 指示终点的方法 （1）永停滴定法 ChP（2000）、BP（1998）null永停滴定法（附录ⅦA） 用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（1→2）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂—铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。null（2）电位法 USP（24）（3）外指示剂法 KI—淀粉糊剂或试纸 2NaNO2+2KI+4HCl→ 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）内指示剂法 中性红 不可逆指示剂null4. 测定方法 盐酸普鲁卡因 ChP（2000） 取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HClnull（三）紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。 （二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性 null对乙酰氨基酚 ChP（2000） 取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数 为715 计算，即得。null原料药 吸收系数法 USP（24） 对照法 null（四）比色法 中性条件下的重氮化反应null（五）荧光法——荧光探针技术 使荧光衍生化试剂与本身无荧光或荧光效率低的化合物反应，其产物具有强荧光，从而使检测灵敏度大大提高。 λex400nm（激发波长）、 λem485nm（发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。null（六）HPLC法 盐酸普鲁卡因注射液 ChP（2000） 可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸 离子抑制色谱法 内标法定量null98：133．盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（ ） A. 重氮化—偶合反应 B. 羟肟酸铁盐反应 C. 氧化反应 D. 磺化反应 E. 碘化反应 null97：137．采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（ ） A. 苯巴比妥 B. 盐酸丁卡因 C．苯佐卡因 D. 醋氨苯砜 E. 盐酸去氧肾上腺素 null95：85．下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（ ） A. 乙酰水杨酸 B. 对氨基水杨酸钠 C. 对乙酰氨基酚 D. 普鲁卡因 E. 苯佐卡因 null96：81（99：72）. 亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（ ） A. 添加Br B. 生成NO+·Br C．生成HBr D. 生成Br2 E. 抑制反应进行 null95：75．中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（ ） A. 电位法 B. 永停法 C. 外指示剂法 D. 内指示剂法 E. 自身指示剂法 null96：127．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（ ） A. 自身指示剂法 B. 内指示剂法 C. 永停法 D. 外指示剂法 E. 电位法 null例1. ChP（2000）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（ ） A. 自身指示终点法 B. 电位法指示终点 C. 永停滴定法 D. 氧化还原指示剂法 E. 酸碱指示剂法 null例2. 以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（ ） A. 盐酸普鲁卡因 B. 盐酸普鲁卡因胺 C. 注射用盐酸普鲁卡因 D. 盐酸普鲁卡因胺片 E. 盐酸普鲁卡因注射液 null例3. 盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（ ） A. 强酸 B. 加入适量溴化钾 C. 室温（10～30℃）下滴定 D. 滴定管尖端深入液面 E. 永停法指示终点 第二节 苯乙胺类药物的分析 第二节 苯乙胺类药物的分析 null苯乙胺类药物的基本结构*null常见的苯乙胺类药物nullnullnullnull盐酸克仑特罗null硫酸沙丁胺醇一、结构与性质 一、结构与性质 1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性 2. 酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应 3. 具手性碳原子，具旋光性null 4. 溶解性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水 5. UV 6. IR 7. 取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。 二、鉴别试验二、鉴别试验1. 三氯化铁反应 2. 氧化反应 3. 与甲醛—硫酸反应 4. UV与IR null5. 与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应） 脂肪族伯胺的专属反应三、杂质检查三、杂质检查 杂质来源 原料残存 检查方法 比较法（含量测定法） （一）酮体的检查null 检查原理 利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。 null（二）有关物质检查 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物 检查方法：TLC中高低浓度对比法 配制两种浓度对照溶液null（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 检查方法：纸色谱法（PC）分离后，洗脱，照分光光度法于232nm波长处测定吸收度，控制吸收度以控制有关双胍的量 四、含量测定四、含量测定 （一）非水溶液滴定法 原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性 null（二）溴量法 盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺 反应摩尔比为1∶6 null（三）比色法 盐酸克仑特罗栓 具芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应对照法定量null 偶合剂N-（1-萘基）-乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂N-（1-萘基）-乙二胺。 null（四）提取酸碱滴定法 硫酸苯丙胺及其制剂盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质null碱化有机溶剂提取null（五）荧光分光光度法 λex410nm、λem520nm处测定荧光强度，对照法定量。null（六）HPLC法 重酒石酸去甲肾上腺素注射液 离子对反相高效液相色谱法 内标法定量 调节溶液pH为3.8，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠null例1. 能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为（ ） A. 浓硫酸 B. 甲醛试液 C. 氨试液 D. 甲醛—硫酸试液 E. 茚三酮试液 null例2. 盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（ ） A. 有关物质 B. 二苯酮 C. 盐酸 D. 醛 E. 酮体 第三节 氨基醚衍生物类药物的分析 第三节 氨基醚衍生物类药物的分析 null茶苯海明一、结构与性质一、结构与性质1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性 2. UV和IR 3. 茶苯海明含卤素 二、鉴别试验二、鉴别试验1. 与硫酸反应呈色 2. 制备三硝基苯酚衍生物测熔点 2. 水解反应 3. 与AgNO3反应形成沉淀 4. UV和IR 三、含量测定三、含量测定（一）非水溶液滴定法 原料 （二）银量法 茶苯海明中8-氯茶碱的测定null（三）酸性染料比色法 盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度测定 （四）阴离子面活性剂滴定法（双相滴定法） 盐酸苯海拉明注射液null1. 原理 滴定反应 RX+M—Na→R—M+NaX K1 （可溶于有机溶剂） 终点指示 M—Na+碱性染料→有色物 K2 （可溶于有机溶剂）null2. 测定对象 有机碱性药物 3. 测定条件 （1）酸性溶液 null（2）本法应用前提：药物与滴定剂的反应优于滴定剂与指示剂的反应。若滴定剂不能先与药物作用而先与指示剂作用，则滴定无法进行。即使药物与滴定剂先反应，若滴定剂不在反应完成的等当点稍后与指示剂反应，则纵使可以滴定，也会造成误差。K1＞K2，但也不能相差太大，相差2个数量级以下，即K＜100。 null（3）滴定剂 阴离子表面活性剂 （4）指示剂 碱性染料 二甲基黄或二甲基黄+亚甲兰（混合指示剂可提高灵敏度） null（5）本法用对照法定量 null 因此虽用标准溶液，但标准溶液浓度不用标定。既解决了滴定液的标定问题，又可消除产生的滴定误差。 null4. 测定方法 精密量取本品适量（约相当于盐酸苯海拉明20mg），置具塞锥形瓶中，加水20m1，加氯仿50ml与稀硫酸5m1。再加二甲基黄一溶剂蓝19混合指示液1m1，用磺基丁二酸钠二辛酯试液滴定，至近终点时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海拉明对照品约20mg，照上述方法自“置具塞锥形瓶”起，依法测定，根据二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的容积（m1）比值计算，即得。null（五）HPLC法 茶苯海明片 离子抑制色谱法 内标法定量null例1. 氨基醚衍生物类药物的鉴别反应是（ ） A. 硫酸呈色反应 B. 水解反应 C. 与硝酸银反应 D. 吸收光谱法 E. 三氯化铁反应