克隆技术--李皓

null克隆技术制作人:李皓克隆技术细胞工程细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合技术科学。null一、植物的组织培养 1、概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、原理：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。植物细胞工程植物细胞工程右图是科学家用菊花的花瓣培育出的菊花，为什么用花瓣就能培育出一棵完整的植株呢？植物细胞具有全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。植物组织培养技术植物组织培养技术nullnull植物组织培养技术的简图：植物消毒接种到诱导培养基诱导出愈伤组织愈伤组织转接到继代培养基上可以不继代培养直接诱导分化得到大量的愈伤组织愈伤组织接种到分化培养基上分化出幼苗幼苗接种到生根培养基上若诱导出幼苗的同时也实现生根，可以省略生根培养基完整植株移栽到大田体细胞杂交技术体细胞杂交技术１、要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起，遇到的第一个障碍什么，如何处理？2、如果两个来源不同的原生质体发生融合形成了杂种细胞，下一步该做如何处理？关键之一：用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁关键之二：原生质体的融合诱导细胞融合的方法诱导细胞融合的方法物理法化学法离心法振动法电激法——聚乙二醇（PEG）植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术 将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。为什么“番茄-马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄，地下结马铃薯？生物基因的表达不是孤立的，基因之间是互相调控，互相影响的，虽然此杂种中包含两个物种的全部遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能像原来那样有序表达。null去壁去壁纤维素酶果胶酶原生质体植物细胞原生质体融合离心、振动、电刺激、聚乙二醇再生细胞壁杂种细胞去分化愈伤组织杂种植株激素筛选等量激素再分化植物体细胞杂交过程示意图2009年考试说明中没有杂交植物细胞工程的应用植物细胞工程的应用一、植物繁殖的新途径１、微型繁殖利用植物组织培育技术来达到快速繁殖优良品种的目的该项技术有哪些优点？繁殖速度快、高效保持种的遗传特性不受生长季节的限制null２、作物脱毒植物分生区附近（如茎尖）病毒极少，甚至无病毒null３.人工种子：以植物组织培养获得的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。人工种子有哪些优点？保持遗传特性不受季节限制易于储藏和运输null二、作物新品种的培育单倍体育种：突变体的利用：植物体细胞杂交育种优点：明显缩短育种年限 育种原理：染色体变异优点：克服远缘杂交不亲和障碍 育种原理：染色体变异优点：能够产生新性状 育种原理：基因突变null三、细胞产物的工厂化生产紫杉醇的生产二、动物的细胞培养与体细胞克隆二、动物的细胞培养与体细胞克隆1、动物的细胞培养 动物细胞培养概念： 动物细胞培养：就是从动物机体中取出相关的组 织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养 基中，让这些细胞生长和增殖。 null动物细胞培养过程取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞转入培养液中进行原代培养贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液转入培养液中进行传代培养放入二氧化碳培养箱中培养动物细胞培养的条件 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清等） 3、温度和PH值（温度为36~37, PH为7.2－7.4） 4、气体环境（氧气和二氧化碳，氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的PH） 动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用大规模的生产有重要价值的生物制品 为基因工程提供受体细胞 检测有毒物质，判断毒性 用于生理、病理、药理等方面的研究 2、体细胞克隆2、体细胞克隆高度分化的植物组织仍保持着全能性，但动物细胞与植物细胞不同，动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程序的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。因此，目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过核移植来实现的。 null动物核移植的概念　　动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。哺乳动物的核移植胚胎细胞核移植体细胞核移植null体细胞核移植的过程null体细胞核移植的应用前景1、畜牧业：利用体细胞克隆技术可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 2、保护濒危物种方面：利用体细胞核移植技术增加这些动物的存活数量 3、医药卫生方面：转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白;转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为异种移植的供体;人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化，形成相应的组织、器官后，可以用于组织器官的此外，研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程;用克隆动物做疾病模型，能使人们更好的追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。三、细胞融合与单克隆抗体三、细胞融合与单克隆抗体1、细胞融合技术 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法也类似，常用的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。 动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 2、单克隆抗体2、单克隆抗体原始获得抗体的方法：向动物体内反复注射 某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物 血清中分离所需抗体。 （缺点：产量低、纯度低、特异性差）null单克隆抗体的制备融合null单克隆抗体的应用　　单克隆抗体的主要优点在于它的特异性强，灵敏度高，并可能大量制备。单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点1、作为诊断试剂2、用于治疗疾病和运载药物疗效高、毒副作用小的新型药物－－“生物导弹”null谢谢观赏！！！！谢谢观赏！！！！再见！！