细菌性阴道病联合测定试剂盒方法学评价

论　著 细菌性阴道病联合测定试剂盒方法学 杨小猛１，赵　丹２，陈丽娟３ （１．广东省深圳市罗湖区妇幼保健院　５１８０１９；２．广东省深圳市罗湖区 慢性病防治院　５１８１０９；３．湖北省鄂州市鄂钢医院　４３６０００） 　　【摘要】　目的　分析细菌性阴道病联合测定试剂盒对细菌性阴道病（ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｖａｇｉｎｏｓｉｓ，ＢＶ）的诊断效能，评估 其临床应用价值。 方法　以 Ａｍｓｅｌ法为诊断 ＢＶ的参考方法，随机选取罗湖区妇幼保健院妇产科门诊患者９８例，每 位患者均一次性留取 ２份阴道分泌物标本，分别采用 Ａｍｓｅｌ法和联合测定试剂盒进行检测；分析联合测定试剂盒检 测结果阳性率、敏感性和特异性。 结果　Ａｍｓｅｌ法阳性率为 ２１．４％，联合测定试剂盒阳性率为 ２３．５％，二者差异无 统计学意义（P＞０．０５）。 联合测定试剂盒的敏感性为 ９５．２％，特异性为 ９６．１％，阳性预测值为 ８７．８％，阴性预测值 为 ９８．７％，总有效率为 ９５．９％。 结论　联合测定试剂盒检测 ＢＶ有较高的敏感性、特异性和总有效率，可作为临床 筛查 ＢＶ的常规方法。 【关键词】　细菌性阴道病；　诊断；　检验 中图分类号：Ｒ４４６．１９ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２-９４５５（２００９）２３-１９９７-０２ Evaluation of the simultaneous determination kits for bacterial vaginosis　YANG Xiao-meng１ ，ZHAO Dan２ ，CHEN Li- juan３．１．Department of Clinical Laboratory，Luohu Women and Children′s Hospital，Shenzhen，５１８０１９ Guangdong；２．Depart- ment of Clinical Laboratory，Luohu Chronic Disease Hospital，Shenzhen，５１８１０９ Guangdong；３．Department of Clinical Labora- tory，Egang Hospital，Ezhou，４３６０００，Hubei China 【Abstract】　Objective　Ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｋｉｔｓ ｆｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｖａｇｉ- ｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．Methods　Ｖａｇｉｎａｌ ｄｉｓｃｈａｒｇｅ ｏｆ ９８ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｂｙ Ａｍｓｅｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｋｉｔｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａｍｓｅｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｇｏｌｄ ｓｔａｎｄａｒｄ．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｋｉｔｓ ｗｅｒｅ ａｎ- ａｌｙｚｅｄ．Results　Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｂｅｔｗｅｅｎ Ａｍｓｅｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅ- ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｋｉｔｓ （２１．４％ ｖｓ ２３．５％）．Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ，ｎｅｇａｔｉｖｅ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｖａｌｕｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｋｉｔｓ ｗｅｒｅ ９５．２％，９６．１％，８７．８％，９８．７％ ａｎｄ ９５．９％ ｉｎ ｓｅ- ｑｕｅｎｃｅ．Conclusion　Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｋｉｔｓ ｗｅｒｅ ａｌｌ ｈｉｇｈ； ｔｈｅ ｋｉｔｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｒｏｕｔｉｎｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｖａｇｉｎｏｓｉｓ． 【Key words】　ｖａｇｉｎｏｓｉｓ，ｂａｃｔｅｒｉａｌ；　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；　ｄｅｔｅｃｔ 　　ＢＶ是一类在细菌学上表现为生殖道正常菌群减少、厌氧 菌群增加、阴道分泌物生物化学性质发生明显改变，并由此引 起阴道微生态环境变化而导致的临床症候群［１-２］ 。 ＢＶ是已婚 妇女最常见的生殖道感染之一，我国 ＢＶ 感染率为 １５％ ～ ５０％；ＢＶ孕妇易发生流产、早产、宫内感染、胎膜早破，同时 ＢＶ 患者还可发生不育不孕、子宫内膜炎、输卵管炎、盆腔炎等多种 疾病，对育龄期妇女及胎儿造成了极大危害［３-４］ 。 因此有必要 快速而准确诊断 ＢＶ，为临床诊治 ＢＶ提供科学依据。 目前市 场上有多种 ＢＶ诊断试剂盒，其原理和操作方法不尽相同，敏 感性和特异性也各有差异。 本研究采用细菌性阴道病联合测 定试剂盒检测 Ｈ２Ｏ２ 、唾液酸酐酶、白细胞酯酶等 ３项指标诊断 ＢＶ，具有较高的敏感性和特异性，现将结果报道如下。 1　资料与方法 1．1　一般资料　随机选取本院妇产科门诊 ９８ 例疑为细菌性 阴道病的初诊患者，年龄 ２３ ～５０ 岁，中位年龄 ３５ 岁。 所有就 诊患者 ７２ ｈ内无性生活，未采取灌洗法或使用阴道乳剂。 用 无菌女性棉拭子采集患者阴道后穹窿分泌物样本，每位患者同 时采取 ２份标本，立即送检。 1．2　试剂与仪器　北京中生金域诊断技术有限公司的细菌性 阴道病联合测定试剂盒，Ｏｌｙｍｐｕｓ显微镜。 1．3　实验方法 1．3．1　细菌性阴道病联合测定试剂盒　（１）撕掉铝箔包装， 取出反应装置并轻轻揭掉铝箔条，反应装置避光放置。 （２）阴 道后穹窿取分泌物，加入 ４００ μＬ稀释液，反复挤压棉签，使样 本溢出。 （３）反应装置的 ３个孔中每孔滴加 １ 滴阴道液，每滴 约 ３５ μＬ，再在“唾液酸酐酶反应孔”中再加 １ 滴“显色液”。 （４）将反应装置放于室温静置 ３０ ｍｉｎ，或 ３７ ℃水浴箱中显色 １５ ｍｉｎ。 判读结果：①Ｈ２Ｏ２ （反应装置上部的反应孔）正常时 浓度大于或等于 ２ μｍｏｌ／Ｌ显红色或紫色，不正常时 Ｈ２Ｏ２ 浓度 小于 ２ μｍｏｌ／Ｌ显蓝色。 ②唾液酸酐酶（反应装置中部的反应 孔）不显色为正常，显红色或紫色为阳性。 ③白细胞酯酶（反 应装置下部的反应孔）不显色为正常，显蓝色或绿色为阳性。 1．3．2　Ａｍｓｅｌ临床诊断　具备以下 ４ 项指标中至少 ３ 项 者诊断为 ＢＶ，其中线索细胞阳性为必备条件。 （１）用精密试 纸测定阴道分泌物 ｐＨ值，阴道分泌物 ｐＨ值大于 ４．５。 （２）胺 试验阳性，用棉拭子取阴道分泌物，滴加 １滴 １％ ＫＯＨ，立即闻 有无鱼腥样气味，若有为阳性。 （３）显微镜检查线索细胞，线 索细胞为阴道脱落上皮细胞表面黏附许多小杆菌，边缘不清。 ·７９９１·检验医学与临床 ２００９ 年 １２ 月第 ６ 卷第 ２３ 期　Ｌａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２００９，Ｖｏｌ．６，Ｎｏ．２３ （４）革兰染色后镜检找到大量阴道加特纳菌，而乳酸杆菌少甚 至缺乏。 1．4　统计学方法　以 Ａｍｓｅｌ 法为 ＢＶ诊断金标准，细菌性阴 道病联合测定试剂盒与之比较采用配对四格表卡方检验，检验 水准取α＝０．０５。 2　结　　果 2．1　在 ９８例疑为细菌性阴道病的初诊患者中，两种方法均为 阳性的有２０例，都是阴性的有７４例，Ａｍｓｅｌ法阳性而联合测定 试剂盒阴性的有 １例，Ａｍｓｅｌ法阴性而联合测定试剂盒阳性的 有 ３例。 Ａｍｓｅｌ法阳性有 ２１例，阳性率为 ２１．４％，联合测定试 剂盒法阳性有 ２３ 例，阳性率为 ２３．５％，两种方法阳性检出率 比较，差异无统计学意义（P＞０．０５）（见表 １）。 表 １　两种方法检测结果比较 Ａｍｓｅｌ法 联合测定试剂盒法 阳性 阴性 合计 阳性 ２０ 帋１ ２１ \ 阴性 ３ 帋７４ ７７ \ 合计 ２３ 帋７５ ９８ \ 　　注：两种方法比较，χ２ ＝０．２５，P ＝０．６１７ ＞０．０５。 2．2　Ａｍｓｅｌ法检测的 ２１例阳性患者中，细菌性阴道病联合测 定试剂盒法检测阳性的有 ２０ 例，检测阴性的有 １ 例；Ａｍｓｅｌ 法 检测的 ７７例阴性患者中，细菌性阴道病联合测定试剂盒法检 测阳性的有 ３例，检测阴性的有 ７４ 例。 因此细菌性阴道病联 合测定试剂盒法诊断 ＢＶ 的敏感性为 ９５．２％，特异性为 ９６．１％，阳性预测值为 ８７．８％，阴性预测值为 ９８．７％，总有效 率为 ９５．９％。 3　讨　　论 ＢＶ是育龄期妇女最常见的，由多种致病性厌氧菌感染引 起的无明显黏膜炎症的一种阴道感染性疾病，感染率约 １５％ ～３０％，并且易复发。 ＢＶ是妇女组织性绒毛膜炎、羊水感染、 剖宫产术后子宫内膜炎及其他妊娠不良和妊娠并发症的危险 因素，与输卵管、盆腔炎、宫外孕、不孕症、宫颈糜烂、泌尿系统 感染、术后感染等妇科疾病有关［５-６］ 。 对 ＢＶ进行系统性筛查和针对性治疗可有效降低上述妇 科疾病的发生，因而快速准确地诊断 ＢＶ尤为重要。 目前实验 室常用 Ａｓｍｅｌ 法作为诊断 ＢＶ 的金标准［７-８］ ，但 Ａｍｓｅｌ 标准中 能客观地对阴道分泌物鉴定和形态学表现进行定量检测的只 有革兰染色法找线索细胞，是惟一特异且敏感的指标；然而线 索细胞受多方面因素的影响，如标本采集、其他细胞碎片的黏 附、显微设备的质量、操作者的经验等，近期性交、阴道灌洗、经 期等因素亦可影响检测结果。 这种方法对操作人员技术要求 高，并且费时费力，不适合临床常规筛查工作。 因此有必要寻 找一种快速、简便、高特异性和高敏感性的 ＢＶ诊断方法。 目前，有多种诊断试剂盒已投入实验室临床应用，但多数 是针对 ＢＶ某一特异性或非特异性特征进行检测，其敏感性和 特异性尚有欠缺。 细菌性阴道病联合测定试剂盒检测项目包 括了反映正常阴道菌群生态状态的过氧化物酶、反映致病菌进 居状态的唾液酸酐酶和反映阴道炎症的白细胞酯酶。 其中 Ｈ２Ｏ２ 浓度与乳酸杆菌的数量有关，通过检测 Ｈ２Ｏ２ 的浓度可 反映乳酸杆菌的状况，是分析阴道微生态是否正常的良好指 标。 健康人阴道分泌物中的 Ｈ２Ｏ２ 浓度一般在 ２ μｍｏｌ／Ｌ以上， 如检测Ｈ２Ｏ２ 浓度小于 ２ μｍｏｌ／Ｌ时，则意味着阴道生态菌群遭 到了破坏，已经引起了厌氧菌的生长，导致了阴道正常菌群失 调。 唾液酸酐酶是由阴道菌群中加德纳菌和其他一些厌氧菌 分泌产生的，当正常的微生态平衡遭到破坏后，这些产唾液酸 酐酶的致病菌会过度繁殖并最终导致 ＢＶ。 白细胞酯酶是由炎 症性多形核白细胞释放的特异性酶，是炎症的敏感指标。 本研 究以细菌性阴道病联合测定试剂盒检测了 ９８ 例临床标本，以 Ａｍｓｅｌ为金标准，结果发现细菌性阴道病联合测定试剂盒的敏 感性为 ９５．２％，特异性为 ９６．１％，阳性预测值为 ８７．８％，阴性 预测值为 ９８．７％，总有效率为 ９５．９％。 综上所述，本研究发现，北京中生金域诊断技术有限公司 的细菌性阴道病联合测定试剂盒操作简便、可用于 ＢＶ的诊断 和 ＢＶ疗效评价和预后判断；具有较高的敏感性，特异性以及 检测总有效率，符合临床筛查 ＢＶ的要求，是一种良好的 ＢＶ临 床诊断试剂。 参考文献 ［１］ 曹泽毅．中华妇产科学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社， １９９９：１２０５-１２３０． ［２］ Ｎｙｉｒｊｅｓｙ Ｐ．Ｖｕｌｖｏｖａｇｉｎａｌ ｃａｎｄｉｄｉａｓｉｓ ａｎｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｖａｇｉｎｏｓｉｓ ［Ｊ］．Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ Ｃｌｉｎ Ｎｏｒｔｈ Ａｍ，２００８，２２（４）：６３７-６５２． ［３］ 杨晓平，姜丽华，杨蕙．细菌性阴道病的加德纳菌检测及 其临床意义［Ｊ］．实用医药杂志，２００８，２５（４）：４４２-４４３． ［４］ Ｙｕｄｉｎ ＭＨ，Ｍｏｎｅｙ ＤＭ．Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｂａｃｔｅ- ｒｉａｌ ｖａｇｉｎｏｓｉｓ ｉｎ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ ［ Ｊ］．Ｊ Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎａｅｃｏｌ Ｃａｎ， ２００８，３０（８）：７０２-７１６． ［５］ 解亚斌，宋迎春，田雪梅，等．围生期下生殖道感染与妊娠 结局的研究［Ｊ］．中国妇幼保健，２００７，２２（４）：５０９-５１１． ［６］ 蒋丽芳，乔玉慧，胡晶莹．５２例细菌性阴道病的检测结果 分析［Ｊ］．中原医刊，２００４，３１（７）：２３-２４． ［７］ Ｇｕｔｍａｎ ＲＥ， Ｐｅｉｐｅｒｔ ＪＦ，Ｗｅｉｔｚｅｎ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｌｉｎ- ｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｖａｇｉｎｏｓｉｓ ［ Ｊ］．Ｏｂｓｔｅｔ Ｇｙｎｅｃｏｌ，２００５，１０５（３）：５５１-５５６． ［８］ Ｓｉｍｏｅｓ ＪＡ，Ｄｉｓｃａｃｃｉａｔｉ ＭＧ，Ｂｒｏｌａｚｏ ＥＭ，ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉａｇ- ｎｏｓｉｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｖａｇｉｎｏｓｉｓ ［ Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ｇｙｎａｅｃｏｌ Ｏｂｓｔｅｔ， ２００６，９４（１）：２８-３２． （收稿日期：２００９-０６-２２） ·８９９１· 检验医学与临床 ２００９ 年 １２ 月第 ６ 卷第 ２３ 期　Ｌａｂ Ｍｅｄ Ｃｌｉｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２００９，Ｖｏｌ．６，Ｎｏ．２３