原代培养记录

原代培养的数据记录 原代培养的数据记录 日期 开始时间 : 操作者： 项目 记录参数 记录 组织来源 种系 SD大鼠 Wistar大鼠 昆明小鼠 其他 年龄 性别 雄性 雌性 动物来源 组织/部位 储存组织/DNA定位 病理 使用物品记录 手术器械 清洗记录 消毒记录 培养板 6孔 12孔 24孔48孔 96孔 品牌 首次使用：批号 复用：清洗记录消毒记录 培养皿 玻璃培养皿 Φ60 Φ100 用途 清洗记录 消毒记录 塑料培养皿 Φ60 Φ100 用途 首次使用：批号 复用：清洗记录消毒记录 培养瓶 玻璃培养瓶 Φ60 Φ100 用途 清洗记录 消毒记录 塑料培养瓶 100cm2 其他 用途 首次使用：批号 复用：清洗记录消毒记录 小瓶 清洗记录 消毒记录 瓶塞 清洗记录 消毒记录 移液管 清洗记录 消毒记录 离心管 清洗记录 消毒记录 其他 其他 其他 清洗记录 消毒记录 清洗记录 消毒记录 清洗记录 消毒记录 分离试剂 胰酶 浓度 0.1% 0.25% 其他 配制记录 使用记录 未使用 使用 胶原酶 Ⅰ型胶原酶 Ⅱ型胶原酶 Ⅳ型胶原酶 浓度 1mg/ml 1.5mg/ml 其他 配制记录 使用记录 未使用 使用 EDTA 浓度 0.02% 0.04% 其他 配制记录 使用记录 未使用 使用 DNA酶 浓度 5ug/ml 10ug/ml 其他 配制记录 使用记录 未使用 使用 血清 杭州四季清 Gibco Hyclone 胎牛 新生牛 小牛 马 5% 10% 15% 其他 缓冲液 PBS 其他 配制记录 使用记录 未使用 使用 其他添加物 培养基 基本培养基 类型 DMEM/F12 DMEM F12 RPMI1640 批号 配制记录 使用记录 未使用 使用 血清 血清类型 品牌 杭州四季清 Gibco Hyclone 类型 胎牛 新生牛 小牛 马 浓度 5% 10% 15% 20% 批号 使用记录 未使用 使用 其他添加物 青霉素、链霉素 浓度青霉素 链霉素 配制记录 使用记录 未使用 使用 谷氨酰胺 浓度 配制记录 使用记录 未使用 使用 HEPES缓冲液 浓度 配制记录 使用记录 未使用 使用 生长因子 FGF IGF VEGF 其他 浓度 包被基质 琼脂 浓度 品牌 批号 配制记录 胶原／明胶 浓度 配制记录 纤粘连蛋白 浓度 配制记录 多聚赖氨酸 浓度 配制记录 其他 浓度 配制记录 其他液体使用 PBS 配制记录 其他 其他 配制记录 配制记录 消化条件 温度 4℃ 37℃ 其他 时间 20分钟 30分钟 1小时 其他 震荡 无 弱 中 强 离心 转速 800rpm 1000rpm 1200rpm 其他 时间 10分钟 15分钟 20分钟 其他 重悬 DMEM/F12培养基 浓度 配制记录 使用记录 未使用 使用 细胞计数 重悬后细胞浓度（C1） 计数一个大方格内细胞数N， C1=N*104= 体积（V1） V1= 产量（Y=C1*V1） Y=C1*V1= 苔盼蓝染色计数细胞存活率 总细胞N= 死细胞Nd= R=(N-Nd)/N%= 接种 容器类型 培养瓶cm2 个 培养皿Фmm个 孔培养板，孔 终浓度（CF） CF=个/ml 培养条件 CO2浓度 5% 10% 其他 温度 37ºC 其他 其他 其他参数 培养共耗时 分钟 培养完成时间 参考文献 《动物细胞培养—基本技术指南》， R．I．弗雷谢尼著，张静波等译。科学出版社，2004年9月第一版，P206