多效唑在切花百合组织培养中的作用

多效唑在切花百合组织培养中的作用 第25卷第2期 2007年4月 青海大学(自然科学版) JournalofQing~University(NatureScience) V01.25No.2 Apr.2007 多效唑在切花百合组织培养中的作用 薛寒青,高霞2 (1.青海大学农林科学院,青海西宁810016;2.青海大学,青海西宁810016) 摘要:选用Alapulco,Prota和whiteFox3个不同品种的百合,在组织培养中添加不同 浓度的多 效唑进行试验.结果表明:浓度为2.0mg/L的多效唑有利于切花百合鳞片芽增殖;多 效唑O.5 mg/L为生根的最佳浓度;鳞片的增殖和生根以WhiteFox的效果最为显着. 关键词:切花百合;多效唑;组织培养 中图分类号:$68;Q946.885文献标识码:A文章编号:1006—8996(2007)02—0028— 03 Thefunctionofpp333intissuecultureofcuttingflowerlily XUEIIa皿一qing.GAOX.吼2 (1.AcademyofAgricultureandForestry,Qmgh~University,Xining810016,China; 2.QinghaiUniversity,Xaning810016,ChiIla) Abstract:Threedifferentlilyvarieties,Alapulco,PromandWhiteFox,wereusedastoinvesti gatethe functionofdifferentconcentrationofpp333intissuecultureofcuttingflowerlay.Theresultsi ndicated 2.0mg/Lofpp333conducedtomultiplicationofsquama,Thebestconcentrationforrootgrow thWas0.5 m#L.Bothconcentrationsofpp333wereverygoodforvarietyWhiteFox. Keywords..cuttingflowerlily;pp333;tissueculture 多效唑又名PP333,属于三唑类化合物,是一种高效低毒新型的植物生长调节剂.作用机理是抑制 植物体内源赤霉素GA的生物合成及其他内源激素的合成,从而导致植物营养生长减慢,使光合产物更 多地利用于生殖生长,具有延缓植物生长,抑制茎枝伸长,促进成花芽的形成及生长.增强抗旱及抗逆 性,提高耐盐性等多种功效…. 多效唑在组织培养在增殖的应用,目前报道不是很多,只有在非洲菊,葡萄,大麦上有报道2.非洲 菊组织培养的增殖培养基中可添加多效唑.把多效唑交替添加到草莓等培养基中,可使芽体增殖系数 增高且增殖芽健壮.在生根培养基中添加多效唑,可增加生根量,促进根的增粗,提高移栽成活率[,. 在切花百合组培培养基中添加多效唑,以促进切花百合组培的生殖生长,现将试验结果报告如下. 1材料和方法 1.1供试品种Alapulco(东方百合),Prom(亚洲百合)和WhiteFox(麝香百合). 1.2试验方法取百合鳞片并用自来水将鳞茎冲洗干净,然后用7O%乙醇消毒1mln再用0.1%升汞 消毒10min,取出用无菌水冲洗4,5次,待接种.培养条件:温度25?,1500Ix,每天光照16h.以MS 为基本培养基(O.7%琼脂+3%蔗糖,pH5.8).将15%多效唑可湿性粉剂(张家港七洲农药化工有限 公司生产)配成不同的浓度加入到MS培养基内. 1.3设备美国CID公司激光叶面积仪. 收稿日期:2{)O5—09—14 作者简介:薛寒青(1965--),女,陕西西安人,副研究员,硕士. 第2期薛寒青,高霞:多效唑在切花百合组织培养中的作用29 2试验结果 2.1多效唑对组织培养萌芽的影响在MS培养 基中,添加不同浓度的多效唑,进行百合鳞片的培 养,观察不同浓度的多效唑对百合鳞片芽增殖的效 果(表1). 表1不同浓度多效唑对百合组织培养分化的影响 由表1可见,浓度为2.0mg/L的多效唑,对百合鳞片诱导芽的作用效果最佳,50d芽的增殖数达到 185,增殖倍数达到8.5倍.说明多效唑促进了百合鳞片芽的增殖. 2.2多效唑对不同类型百合鳞片芽增殖的影响由于百合的种类很多,不同种类之间的形态特征差异 很大.我们一般将百合分为3种类型:麝香百合,东方百合和亚洲百合.用多效唑2.0mg/L对3种不 同类型的百合鳞片增殖进行记载.不同类型的百合分别设有对照.从表2可见,相同浓度的多效唑对 百合鳞片的影响,以对麝香百合的分化块数多,增殖倍数最高. 表2不同类型切花百合鳞片增殖数目 2.3不同浓度的多效唑对百合组培苗生根的影响 以增殖倍数最高的麝香百合作为试验材料进 行不同浓度的多效唑对百合组织培养苗的生根试 验,把生长势一致的组培苗转人加了不同浓度多效 唑的MS为基本培养基上.转人l3周后统计根数. 表3不同浓度多效唑对百合组培苗生根的影响 由表3可见,多效唑浓度越高,对根伸长生长的抑制作用越明显.浓度0.5mg/L,比5.0mg/L的多效唑 易生根,浓度5.0mg/L的多效唑培养基主根形成短而少,而在较低浓度下O.5mg/L 的多效唑,对根的抑 制作用较弱,主根伸长,并形成大量须根. 2.4多效唑对百合试管苗生长的影响使用增殖效果最好的麝香百合作为试验材料,用不同浓度的多 效唑添加到培养基中,结果见表4.处理为2.0m茜/L浓度的多效唑各项观测指标优于其他浓度.试管 苗叶色变深绿,茎粗增大,苗子矮壮,发根快,根数多. 表4多效唑对麝香百合组培苗的长势影响 2.5多效唑在百合组织培养苗移栽后的作用不同浓度多效唑在组培苗移栽后,对其进行了植物学性 状观察.由表5可见,组培苗移栽以后在生根过程中,随着多效唑浓度的增加,鳞茎的周径随之增大,叶 片数也随之增加,但是叶面积却随之减小.移栽到大田后,叶片数,株高随浓度的增加成倒钟行的形态, 以多效唑2.0mg/L最好.但叶面积却成钟形图,以多效唑5.0mg/L最大. 30青海大学第25卷 表5多效唑对麝香百合组培苗移栽长势的影响 3讨论与结论 在切花百合鳞片增殖培养基中加入一定浓度的多效唑后,鳞片的芽增殖数增多,分化块数增加.在 切花百合鳞片诱导的培养基中使用多效唑,可以有效的提高鳞片的诱导率,增加繁殖系数. 一 定质量浓度的多效唑能抑制植物内源生长素和赤霉素的合成,加速乙烯和脱落酸的合成,从而有 效控制茎叶生长,促进植物生根.多效唑对百合组织培养中的生理作用及作用机理,有待进一步探索. 有报道表明【4j,百合组织培养苗,在22?较低温度下,若用3.0t,L浓度的多效唑将 对植株进行 处理,结果百合的叶和茎部有明显的抑制作用,而对根系的形成有显着的促进作用.这结论与本试验结 果不太一致,进一步的结论有待探讨. 2.0t,L的多效唑添加到百合的鳞片增殖培养基中,将会促进百合鳞片的增殖.多效唑在百合组 织培养中降低试管苗的生长强度,抑制试管苗的生长,该抑制效应在一定浓度范围内随浓度的升高而加 强.经过多效唑处理的试管苗矮壮,根系发达,叶面积增大.用多效唑处理的试管苗移栽成活率显着提 高,移栽后植株生长旺盛. 参考文献: [1]龙旭.多效唑的作用机理及其在农业生产上的应用[J].植物医生,2O02,15(1):34 —35. [2]杜永芹,陈如梅.麦芽汁,多效唑等因素对大麦组织培养的效应[J].上海农业.1998,14(2):85—88 [3]张希太,宋久英.多效唑在草莓试管种质常温保存中的应用[J].北方园艺,1997.(5):56—60. [4]黄晓梅.多效唑在农业上的应用进展[J].北方园艺,2O02.(6):4o. (责任编辑扬君丽) (上接第23页) DNA的纯度要求却更高.由于蚕豆所含的多酚类物质易于氧化生成一些褐色非溶解物质与DNA结合, 严重影响了Tap-DNA酶的活性,从而导致扩增反应失败.因此,在提取DNA时,必须将这些物质去除. 多数报道是在提取液中加p一巯基已醇和PVP,但是本实验仅仅使用B一巯基已醇,效果更好.关于PVP的 使用,需要进一步的研究. (2)DNA提取方法注意事项:在蚕豆DNA提取过程中应注意水浴时间不应超过 20min,水浴时间过 长易导致DNA降解.在三氯甲烷/异戊醇抽提时,三氯甲烷/异戊醇混合液与提取到的上清液不适宜立 即离心,应混匀15min. 参考文献: [1]PieterVos.A~AD:aHewtechniqueforDNAn聊血 g[J].NucleicAcidsRe~_areh.1995,23(21):44O7,4414. [2]熊光明,梁国鲁,阎勇,等.适于AFLP用的柑橘DNA提取方法[J].果树,2O02,19(4):267—268. [3]陈庆山.刘春燕.吕东,等.大豆DNA提取基本原理的探讨[J].东北农业大学,2004,35(2):129—134. [4]代翠红,李杰,朱延明,等.不同DNA提取方法对4种重要作物DNA提取效率的比较[J].东北农业大学,2005,36(3):329— 332. (责任编辑扬君丽)