体内药物分析放射免疫分析法论文

放射免疫分析法在体内药物分析中的应用 药学1301 31304020 摘要:免疫分析方法很多,但没有一种免疫分析法是完美无缺的,放射免疫作为最早建立的经典免疫分析方法,具有很高的灵敏度,成本低,同时又有很多缺点同位素的半衰期使货架期短, 试剂盒不宜储存,放射性元素有害于身体等,但放射免疫法在诸多免疫分析法中任有其不可替代的作用。 关键词:放射免疫分析法发光免疫分析法荧光分析法 正文:免疫分析法克分为放射免疫分析法(RIA)、酶免疫分析法(EIA)、荧光免疫分析法(FIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)等。各类免疫分析的基本原理相同,即竞争抑制原理,人工抗原的制备和特异抗体的制备也相同。主要区别是标记抗原(标记药物)的标记物不同,以及由此产生的测定方法不同。随着时代的进步,各种免疫分析法也在不断得进行改进,但是怎么才能知道这些改进是否有效,需要一个标杆来进行对比,这里我认为放射免疫是最好的对照组,不仅因为其在免疫分析法中独特的地位,更是由于其全面的特点。 放射免疫分析法特点发射免疫法作为最经典的免疫分析法,该方法灵敏度高,特异性强、取量少、测定速度快,但是其局限性也相对明显,需专门的同位素实验室、标记物半衰期短、放射性同位数对操作人员的健康存在一定的危害、以及还有试验废物处理困难。 放射免疫法的在目前药物分析中的应用放射免疫分析法虽然一直在发展,但是同位素对人体的危害,以及半衰期短的问题始终是无法避免的,随着科技的发展,更多的免疫分析法竞相问世,都可以说是以放射免疫为基石,以此为基础,来进一步提高,或者与此对比来衬托出其他免疫分析法的优势。尤其是发光免疫分析法。所以这里我要提出的放射免疫在体内药物分析中的一大应用就是与其他体内药物分析的免疫分析方法来进行对比,从而证明其的有效性。 放射免疫的发展放射免疫在1959年被创建以来大大推动了内分泌学、药理学、生物化学、生理学、分子生物学和神经生物学等一系列学科的发展,在之后的几十年内放射免疫被不断改进,之后更是发明了放射分析药盒,使得放射免疫不断得简便,放射免疫再如何简便,精确度又是如何得高,这些都不能掩盖其本质的缺点,即标记物半衰期短,放射性同位素对操作人员存在一定的危害。所以 随着时代的进步,该方法必将淘汰,目前在发达国家已经基本淘汰不再使用,我相信放射免疫在我国也将有被淘汰的一天,但是纵使放射免疫未来如何,有一点是毋庸置疑的,他是免疫分析法的标杆。所以发射免疫在目前更多的是用来作为对照,来说明其他免疫分析法是否精确,是否灵敏,是否高效。这也正是放射免疫在目前体内药物分析中的重要应用。药物的分析如何更加高效,是人们在不断探索的,而探索出来的方法,或者说制造出来的仪器是否能高效得检测各种成分,这就需要与放射免疫法对比来说明这些,以下正是放射免疫与其他免疫方法的一些对比,从以下这些对比,可以看出科技进步,免疫分析法不断进展的同时也更加肯定了放射在免疫分析中的地位。 放射免疫法与发光免疫法的对比化学发光免疫发展迅速,各种仪器也不断得产生,对各种仪器的发光免疫法的评价常用放射免疫来进行对比。王攀[1]的研究中通过精确度,准确性,相关性分析以及健全性试验,可以看出,CLIA 技术无论在精密度、准确性及健全性等方面均略优于RIA 技术。同时全自动微粒子化学发光免疫分析系统具有强大的智能化操作程序,自动化程度高、随到随检、灵活,极大提高了工作效率,符合大型医院及标本量大的医疗检测机构使用。 从黄丽凤[2]的实验中不难发现CLIA法与RIA各有优缺点,CLIA法设备较为昂贵,但检测信效度较好,诊断价值较高,可以实现自动化,节约人力成本。 从杜忠芳[3]的实验中也是将发射免疫法与发光免疫分析法做了对比,从这个实验中可以得到ECLIA法作为新一代标记免疫分析技术,结合了电化学发光与免疫测定的优势。由于检测全过程在一个全封闭的反应体系中全自动进行,反应时间较短,具备快速、精确、重现性好及试剂安全无毒等特点,具有较好的临床前景。 李江宁[4],余小华[5]等诸多对比实验,都可以看出,发光免疫法除了设备购置成本比较高以外,其他方面均不低于放射免疫法,其操作简便,自动化程度高,使用灵活,随到随检等都非常利于大型医院的检测使用。而放射免疫法的低成本则仍然适合一些小型医院的使用。 虽然放射免疫在大型医院中已经逐渐被淘汰,但是其在免疫分析法的特殊地位,以及其作为对照的标杆地位依然没有动摇。相信只要免疫分析法在继续发展,那么放射免疫法就任然是对照的标杆。从而也说明了发光免疫分析法的有效性需要 放射免疫分析法来对比证明。 放射免疫法与荧光分析法的对比荧光分析法也常与发射免疫进行对比来衬托出其优势部分,汤俊明[6]的对比实验可以看出IRMA 法用放射性核素标记, 受时间和温度影响, 反应时间较长, 每批需做曲线; 而TRFIA 法则技术是一种非放射性标记检测技术, 具有自动化程度较高, 试剂稳定性好, 有效期长, 无放射性污染等特点, 在检测灵敏度, 特异性, 测量范围以及标记物的稳定性方面显示其优越性, 更有利于临床大批量检测的需要, 值得进一步研究和推广。 袁汉尧[7]的实验中可以看出RIA 法虽然为传统的检测方法, 可作定量测定,准确性和灵敏度也较高, 但其存在最大的无法克服的缺点是:其标记的同位素污染环境、标记物易衰变、操作繁锁、出时间长、试剂稳定性差、不易保存等, 此在一些发达国家已逐渐被淘汰。TR-FIA 法是针对一般的荧光素作标记的荧光免疫测定往往受血清、试管、仪器组件的本底荧光干扰及激光光源的杂射光等产生高背景影响测定灵敏度和准确性的缺点加以改进。 杨凤爱[8]的实验中可以得到TRFIA 法检测AFP 的线性范围较RIA 法的宽, 是由于TRFIA 法利用了镧系元素独特的荧光特点和检测中采用的波长分辨和时间延迟技术。另外, TRFIA 采用的固相技术、高纯度的抗体包被技术以及DELFIA 系统采用的增强液等因素, 也是TRFIA 法灵敏度高的有力保证。TRFIA 法分析内和分析间CV %较RIA 的小, 可能是由于TRFIA 法采用镧系元素Eu3 +作标记物, 其标记物制备简便、示踪物稳定、试剂储存时间长、操作流程短易于自动化;而RIA 采用125 I 作标记物, 整个实验操作流程长, 不能自动化, 易受人为因素影响。再者其标记物存在自身衰变作用, 决定了RIA 试剂的有效期较短和RIA 有限的可检测性, 致使试剂重现性差。TRFIA 与RIA检测AFP 具有良好的相关性, 说明两种方法测定AFP 在检测效能上意义相当, 都能满足临床要求。但是TRFIA 法具有灵敏度高、操作简便、标记物稳定易贮存、标准曲线范围宽、可重复测量、不受样品自然荧光干扰及无放射性污染等优点, 用于检测AFP 在灵敏度、线性范围和精密度等方面优于RIA 法, 是一种具有很好发展前景的超微量非放射性核素标记免疫分析方法。 从以上的3则对比实验中可以看出荧光免疫法有灵敏度高,操作简便,标记 物稳定易贮存,对人体危害程度低等特点,在一定程度上可以替代放射免疫法。从而也说明了荧光免疫分析法的有效性需要放射免疫分析法来对比证明。 小结:放射免疫作为免疫分析法的鼻祖,虽然随着时代的进步在淘汰,但是其标杆的地位是无法动摇的,各种先进的免疫分析法需要说明其高效性都必须与放射免疫进行对比才能证明其有效性,纵然放射免疫相对其他免疫方法有许多无法避免的缺点,如对人体的危害性,放射物半衰期短等,但是其灵敏度高,精确度高,特异性强,取量少,测定迅速这些特点都是毋庸置疑的,所以我相信放射免疫不会泯灭在时代的长河中,而是在免疫分析法中一直占据最主要的地位,其他新兴的免疫分析法与其对比后才能证明其有效且高效,从而被大众所接受。 参考文献: [1]王攀,李雪,喻荣华.全自动化发光免疫分析与放射免疫法测定血清促甲状腺激素的对比分析.实用医技杂志,2013,20(10);1097-1098 [2]黄丽凤[1],鞠鹏[1],韩志勇[1]等.两种方法测定血清5项对比研究.检验医学与临床,2015,12(9);1298-1299 [3]杜忠芳[1],陈燕[1],娄良文[2].放射免疫法同电化学发光法检测血清AFP效果分析.吉林医学,2010,31(33);5993-5993 [4]李江宁.全自动化发光免疫分析与放射免疫法测定血清促甲状腺激素的对比观察.中国医药指南,2014,12(36);148-149 [5]余小华,骆磊,朱郧鹤等.化学发光免疫分析法和放射免疫分析法检测血浆甲状腺球蛋白的结果对比分析.标记免疫分析与临床,2012,19(1);54-56 [6]汤俊明[1],王学才[1],肖华龙[2]等.CA50时间分辨荧光免疫分析法与免疫放射分析法的对比研究.中国医药导报,2007,4(04X);105-106 [7]袁汉尧[1],吕世静[2],黄日安[1]等.乙肝病毒标志物时间分辨荧光免疫测定与放射免疫测定的分析比较.数理医药学杂志,2003,16(5);456-458 [8]杨凤爱[1],林荣军[1],茹辽金[1]等.时间分辨荧光免疫分析法与放射免疫分析法检测甲胎蛋白的效能比较.广东医学院学报,2009,27(4);391-392