ampc 酶是ampcβ内酰胺酶的简称[要略]

ampc 酶是ampcβ内酰胺酶的简称[要略] AmpC 酶是AmpCβ内酰胺酶的简称。 是由肠杆菌科细菌或和绿脓假单胞菌的染色体或质粒介导产生的一类β内酰胺酶,属β内酰胺酶Ambler 分子结构分类法中的C 类和Bush Jacoby Medeiros 功能分类法中第一群,即作用于头孢菌素、且不被克拉维酸所抑制的β内酰胺酶。故AmpC 酶又称作为头孢菌素酶。 ESBLs 超广谱β-内酰胺酶, 在临床上检验细菌药敏和耐药时会出现 ESBLs阳性或阴性， ESBLs+阳性菌为产超广谱β- 内酰胺酶的细菌，对大多数抗生素耐药，此时抗菌素的使用一般采用碳氢霉烯类+β- 内酰胺酶抑制剂的联合用药 1(什么是ESBLs, ESBLs是英文Extended—Spectyumβ—Lactamase缩写，中文意思是超广谱β—内酰胺酶，属质粒介导，它是当前抗生素出现的新的耐药趋势之一。 2(产ESBLs菌株的耐药特点, 如果临床出现产ESBLs菌株，则对第三代头孢菌素(它们是头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢曲松等)耐药，及对单环酰胺类抗生素(氨曲南)耐药。ESBLs在实验室有一专门的检测方法，如果病人的药敏单已注明为产ESBLs菌株，则明已经实验室确证。如果病人药敏报告单未注明为产ESBLs菌株，三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素中有一种MIC?2ug/ml，或符合CAZ?22mm、ATM?27mm、CTX?27mm、CRO?25mm其中一个，则提示菌株可能产超广谱β—内酰胺酶，这种情况下，即使实验室报告为敏感的第三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素，在临床也不推荐使用。 3(哪些细菌容易产生ESBLs, 大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、肺炎克雷伯氏菌是最常见ESBLs菌株的细菌，其次， 目前 阴沟肠杆菌、粘质沙雷氏菌、弗劳地枸橼酸菌、铜绿假单胞菌也可出现产ESBLs菌株的细菌。 4(细菌为什么会产生β—内酰胺酶, 由于菌株产生β—内酰胺酶水解青霉素G和氨苄青霉素。细菌所产生的重要抗生素灭活酶主要有β—内酰胺酶和氨基糖类抗生素钝化酶。β—内酰胺酶能裂解青霉素族和头孢菌素族抗生素的基本结构β—内酰胺环，从而使其丧失抗菌活性。大部分金黄色葡萄球菌，部分流感嗜血杆菌、淋病奈瑟氏菌、革兰氏阴性厌氧菌和少数肺炎链球菌能产生β—内酰胺酶从而对青霉素G和氨苄青霉素等耐药。 5(促使ESBLs出现和传播的因素及临床预防, 应用第三代头孢菌素治疗是导致产ESBLs菌株出现及传播的主要因素，此外，尚有其它因素。 若临床出现产ESBLs菌株，会在病人和医院之间及不同菌株之间相互传播，导致临床高死亡率及高比率持续性定殖，应充分引起注意。 6(产ESBLs菌株如何选择抗生素进行治疗, 一旦确定为产ESBLs菌株，应立即停止使用第三代头孢菌素(头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢曲松等)及单环酰胺类抗生素(氨曲南)进行治疗。 对付产ESBLs菌株，最有效的抗生素为碳青霉烯类(泰能)，其次，头孢西丁及含酶抑制剂的复合剂、氨基糖类等。 ESBLs菌株的检测方法: 目前检测ESBLs的常用方法有双纸片协同试验(即阿莫西林双纸片协同试验与替卡西林双纸片协同试验，以NCCLS纸片表型确证试验测定结果为标准，筛选出产ESBLs)、纸片表型确证试验、琼脂稀释法确证实验、三维试验等。 一、纸片扩散法检测ESBLs 1.筛选试验:选用头孢泊肟、头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟或头孢曲松(每片含量均为30μg)药敏纸片中的至少2种,用苗勒-欣顿(MHA)琼脂,标准纸片扩散法测试抑菌环直径,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1997年标准进行判断。凡头孢泊肟或头孢他啶的抑菌环直径?22mm,头孢曲松?25mm,氨曲南或头孢噻肟?27mm,均应高度怀疑为ESBLs菌株,应进一步作确认试验来加以确诊。 2.确认试验:用头孢他啶(每片30μg)和头孢他啶加克拉维酸(30μg和10μg);头孢噻肟(每片30μg)和头孢噻肟加克拉维酸(30μg和10μg);分别测量2种纸片单独及加克拉维酸的抑菌环直径。加克拉维酸和不加克拉维酸的抑菌环直径?5mm可确认为ESBLs菌株。 质控菌株:大肠埃希菌ATCC25922(头孢他啶:头孢他晓+克拉维酸?2mm; 肺炎克雷伯菌ATCC700603(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸?5mm)。 二、检测ESBLs最低抑菌浓度(MIC) 1.筛选试验:选用头孢泊肟、头孢他啶、氨曲南、头孢噻肟或头孢曲松至少2种以上,用阳离子增强的MH肉汤(标准肉汤稀释法)稀释至1mg/L,凡被测菌在上述各管中能够生长(MIC?2μg/ml),均应高度怀疑为ESBLs,应进一步作确认试验来加以确诊。 2.确认试验:用标准肉汤稀释法测定MIC的方法,按NCCLS(1997)推荐的筛选和确认ESBLs的标准进行判断。选用头孢噻肟单独稀释(范围0.25~64mg/L)及头孢噻肟(稀释范围相同)加克拉维酸(每管4mg/L);头孢他啶单独稀释(范围0.25~128mg/L)及头孢他啶加克拉维酸(每管4mg/L),上述2种药物必须同时进行试验,结果加克拉维酸和不加克拉维酸的MIC差值如?8倍(3个稀释度),可确认为ESBLs菌株。质控菌株:大肠埃希菌ATTC25922(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸<8倍);肺炎克雷伯菌ATCC700603(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸?8倍)。 三、用于ESBLs筛选的特殊试验 1.在MicroScan的一些药敏试剂条中包括了头孢泊肟、头孢他啶或氨曲南,且每种试剂条均有2种指示药物,当被试菌对这些指示药物的MIC?2mg/L时,即可筛选出可疑的ESBLs菌株,符合NCCLS(1999)推荐的筛选药物组合及浓度范围,可用于ESBLs的筛选。 2.用浓度梯度法(Etest法)的常规试条中的三代头孢菌素或氨曲南(2种以上),凡MIC?2mg/L时,即高度怀疑为ESBLs,应进一步作确认试验来加以确诊。现有2种Etest法的ESBLs确认试条,分别是头孢噻肟及头孢噻肟加克拉维酸、头孢他啶及头孢他啶加克拉维酸。检测结果加克拉维酸和不加克拉维酸的MIC差值?8倍(3个稀释度),可确认为ESBLs菌株。 Etest检测ESBLs的具体操作步骤是 (1)在常规试验中选出对三代头孢MIC?1mg/L的菌株(比NCCLS的标准低一个稀释度); (2)按NCCLS(1999)推荐的方法,用2种底物筛选和确认ESBLs(筛选试验:在头孢噻肟或头孢曲松中选1种,头孢他啶或氨曲南中选1种。 确认试验:用头孢噻肟和头孢他啶); (3)确认该菌对头孢西丁的MIC?8mg/L,以排除质粒AmpC酶; (4)再测定该菌对其他非β内酰胺抗生素的药敏模式,以指导抗菌治疗或收集流行病学资料。