【doc】紫外可见分光光度法测定蔬菜中亚硝酸盐含量
紫外可见分光光度法测定蔬菜中亚硝酸盐
含量
第31卷第3期
Vo1.31,No.3
济宁医学院
JOURNALOFJIN1NGMEDICALCOULEGE 2008年9月
Sep,2008
紫外可见分光光度法测定蔬菜中亚硝酸盐含量
赵艳霞
(济宁医学院公共卫生学院
王艳
济宁医学院2006级研究生)
提要目的以市场上购买的4种蔬菜为
,采用紫外分光光度法测定亚硝酸盐含量.方法在弱酸条件下,亚硝
酸盐与对氨基苯磺酸重氮化,再与盐酸乙二胺偶合形成紫红色染料.结果亚硝酸盐在生菜,小白菜,油菜,菠菜中的平均含
量分别为0.326mg/kg,0.380mg/kg,0.241mg/kg,0.310mg/kg.相对
偏差在3.11%,4.38%之间.结论本方法加标回
收率高,方法简便,适用于蔬菜中亚硝酸盐的检测.
关键词紫外分光光度法;蔬菜;亚硝酸盐
蔬菜是一种易于富集硝酸盐的作物,尤其是叶类蔬菜, 人体摄入的硝酸盐有81.2%来源于蔬菜…,硝酸盐,亚硝酸 盐含量超标已成为影响蔬菜品质的一个重要因素.蔬菜中 的硝酸盐在适宜的条件下可被微生物或天然植物酶转变为 亚硝酸盐,使亚硝酸盐含量增加.亚硝酸盐能与胺类化合 物作用生成致癌性很强的N一亚硝基化合物,影响人体健
康,作为防范硝酸盐危害,向消费者提供安全食品的最后屏 障,就是测定疏菜中的亚硝酸盐含量.目前,亚硝酸盐检 测方法的研究已经受到很多研究者和政府机构的关注,应用 于蔬菜样品亚硝酸盐测定方法主要有紫外可见分光光度法, 荧光法',HPLC法,毛细管电泳法及离子选择电极法等. 本文采用紫外可见分光光度法测定了济宁市市售蔬菜 亚硝酸盐的含量,取得了较为满意的结果.
1实验部分
试验材料:所用蔬菜均购自济宁市区各农贸市场,共4 种,分别为生菜,小白菜,油菜,菠菜.
仪器与试剂:高速组织捣碎机;754型紫外分光光度计; 电子天平;恒温水浴锅.
亚硝酸盐标准液:准确称取在硅胶干燥器中干燥24h的 亚硝酸钠0.4926g溶于水中,定容至1000mL容量瓶中,配制 成浓度为100mg/LNO2-标准储备液,避光保存;0.4%对氨基 苯磺酸溶液:0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL20%盐酸中, 置于棕色瓶中避光保存;0.2%盐酸萘乙二胺溶液:0.2g盐酸 萘乙二胺,溶于100mL水中,混匀后置于棕色瓶中避光保存. 所用试剂均为分析纯,所用水为超纯水.所有实验用玻 璃仪器均彻底洗净,并用超纯水冲洗,以确保无硝酸根离子 和亚硝酸根离子存在.
操作方法:将样品洗净,匀浆,称取5.0g匀浆液于烧杯 中,加50mL水,用氢氧化钠溶液调节至偏碱性,再用水将样 品全部转移至250mL容量瓶中,置于6O?水浴加热10min, 取出后冷却至室温,加水至刻度,混匀.静置30min,上清液 经乙酸锌和活性炭混合物过滤,弃去初滤液30ml,收集滤 液备用.
亚硝酸盐标准曲线:准确吸取标准储备液0.0,0.5,1.0, 2.0,4.0mL,置于25mL容量瓶中,然后分别加入2mL0.4%
对氨基苯磺酸,混匀,静置3—5min,再加入1mL0.2%盐酸 萘乙二胺,于波长530nm下测定吸光度并计算出回归方程. 样品测定:吸取10.OmL上述滤液,按上述方法操作,同 时做试剂空白.
准确度和精密度:对上述试样分别进行7次测定,得到 相对标准偏差分别为3.25%,4.38%,3.11%,3.92%;同时 于样品中进行加标回收试验,其平均加标回收率分别为95. 2%,98.5%,93.7%,98.6%. 2实验结果
工作曲线及相关系数:按照实验方法,改变NO/的用量 进行实验.结果
明NO/含量在0.1—1.0g范围内与吸 光度呈线性关系,工作曲线回归方程为Y=0.19x+0.0015,
相关系数为r=0,9995.
样品检测结果:按照实验方法测定蔬菜中亚硝酸盐含 量,结果见表1.
表1蔬菜中亚硝酸盐含量
最大吸收波长的选择:配制不同体系的溶液,在520, 56Onto波长范围测定吸光度,在优化实验条件下进行波长扫 描,测得在530nm处有最大吸收,故本实验选530nm为工作 波长.
对氨基苯磺酸的配置方法对实验结果的影响:据国家卫 检标准GB/T5009.33,96,将其溶于700ml水和300ml冰乙 酸中,需加热才能溶解,且室温保存时,有晶体析出;而GB/ T5009,2003将其溶于20%盐酸中,无需加热即可溶解,且 室温保存时,无晶体析出.经过对比,择取后者效果较好. 色素和抗坏血酸对实验结果的影响:实验表明,色素和 抗坏血酸影响比色效果,为消除干扰,实验采用在样品提取 时加入醋酸锌和活性炭,提高了测定的灵敏度和准确性. 参考文献
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(收稿日期2008—07一l1)
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