高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量

高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量 高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量 作者:张淑萍，田嘉铭，白雪梅，李旺【摘要】 目的利用高效液相 色谱(HPLC)法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量。 方法 色 谱柱为YWG-C18(250 mm×4.6 mm，10 μm)，以乙腈-5%醋酸水(65?35) 为流动相，检测波长为250 nm，流速为1.0 ml?min-1。结果甘草次 酸对照品浓度在9.375,300 mg?ml-1范围内线性关系良好，回归方 程:A=31.545C-82.030(n=6, r=0.999 1)，炙甘草加样回收率为 99.81%;炙甘草汤为100.28%。结论HPLC法准确可靠，可为控制炙 甘草和炙甘草汤质量提供检测依据。 【关键词】 炙甘草;炙甘草汤; 甘草次酸;高效液相色谱法 Abstract:ObjectiveTo determine the glycyrrhetinic contents in Zhi Gancao root and Zhi Gancao Decoction by HPLC. MethodsYWG-C18 column (250 mm×4.6 mm，10 μm) was used with Acetonitrile and 5% Acetic acid-water as mobile phase. The detection wavelength was 250 nm, and the flow rate was 1.0 ml?min-1. Results The linear relationship was good in the range of 9.375,300 mg?ml-1. The regression equation was:A=31.545C-82.030(n=6,r=0.999 1), the average recovery rate of Zhi Gancai and Zhi Gancao decoction were 99.81% and 100.28% respectively. Conclusion HPLC method is accurate and valuable for the quality control of Zhi Gancao and Zhi Gancao decoction. Key s:Zhi Gancao; Zhi Gancao decoction; Glycyrrhetinic acid; HPLC 炙甘草汤出自汉代张仲景 的《伤寒论》，为 治疗 “心动悸、脉结代”的古代名方，由炙甘草、 生姜、桂枝、人参、生地黄、阿胶、麦门冬、麻子仁、大枣组成。近 年来，大量的实验 研究 证明，炙甘草汤确有抗心律失常的作用，对 各种心脏疾病所致的心律失常均有较好的疗效，且药理作用广泛而持 久，极具开发价值,1,。炙甘草为炙甘草汤的君药，甘草次酸为甘草 提取物的有效成分之一。 目前 文献 报道多为测定甘草酸的含量， 而测定甘草次酸的含量的方法少见报道,2,。为了探讨中药主要单体 在中药配伍中的变化 规律 ，实验采用HPLC法对炙甘草和炙甘草汤 中甘草次酸的含量进行了测定，为炙甘草汤的复方制剂研究提供一定的实验依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器 高效液相色谱仪(HP1100，美国Agilent。包括在线脱气机，四元泵，柱温箱，紫外检测器，3D化学站)，A/D 电子 天平(1/10万，日本)，756紫外分光光度仪(上海分析仪器总厂)，超声波清洗器(KQ-500B，江苏省昆山市超声波仪器有限公司)。 1.2 试药 甘草次酸对照品( 中国 药品生物制品检定所)，甲醇(色谱纯，美国)，乙腈(色谱纯，天津科密欧)，蒸馏水为本室自制，其他试剂均为分析纯。方剂中九味中药均购自河北北方学院中医门诊部，并按照《中国药典》(2000年版)各单味药进行检定。 2 方法与结果 2.1 色谱条件色谱柱YWG-C18(250 mm×4.6 mm，10 μm)，流动相为乙腈?5%的醋酸水=65?35;流速:1ml?min-1;检测波长:250 nm;柱温:25?;进样量:20 μl。 2.2 对照品溶液的制备精密秤取一定量的甘草次酸对照品，置5 ml容量瓶中，加流动相溶液稀释至刻度摇匀，配成1 mg/ml甘草次酸对照品溶液备用。