梯度洗脱高效液相色谱法测定三七片中三七总皂苷的含量

梯度洗脱高效液相色谱法测定三七片中三七总皂苷的含量 梯度洗脱高效液相色谱法测定三七片中三 七总皂苷的含量 样品并测定砷,汞的含量,结果见表1. 表1回收率试验结果 Tab1Resultsofrecovery 3.9检出限 以测定11次标准空白溶液的3倍标准偏差计算,检出 限分别为0.061g/L,0.0691~g/L. 3.1O其他 因为该产品含砷,汞较微量,为准确测得结果,所用玻璃 仪器均经以硝酸(1+5)浸泡过夜,用水反复冲洗,最后用去 离子水冲洗干净.化学试剂最好都为优级纯以上.水均须 使用去离子水,把试剂及仪器可能带入测定的误差降到最 低,标准液及还原剂须现配现用. 3.1l结论 应用氢化物发生一原子吸收法测定美容胶囊中砷,汞含 量,该方法操作简便快速,线性关系好,精密度和准确度较 高,提供了该产品砷,汞含量测定的一种方法. 参考文献 [1]GB/T5009.11-2003,GB/T5009.17-2003,中华人民共和国国 家标准,食品卫生检验方法理化部分[S]. [2]李小丽,蒋瑾华.微波消化.氢化物吸收法测定奶粉中的砷 [J].中国乳品工业,2000,28(4):30-32. 收稿13期:2005-06-03 梯度洗脱高效液相色谱法测定三七片中三七总皂苷的含量 张小平,籀世杰(杭州爱的发.康恩贝中药研发中心有限公司,杭州310052) 摘要:目的建立了用HPLC法测定三七片中三七总皂苷的含量.方法色谱柱为 CI8(4.6mm×250mm,5run);流动相为A 相(乙腈)-B相(0.02%磷酸水溶液),梯度洗脱程序为 0min(88:12)-30min(60:40)-60rain(20:80);流速为lmL?rain,;检测 波长为203nm.结果本法专属性强,灵敏度高,准确性好,三种皂苷的线性范围宽,R 值均大于0.999,方法学总回收率为 100.4%,RSD为1.6%(n=3).结论建立的梯度洗脱HPLC法测定三七总皂苷专属性 强,准确性好,可用于三七片的质量 控制. 关键词:三七总皂苷;高效液相色谱法;含量测定 中图分类号:R917.792.1文献标识码:B文章编号:1007-7693(2006)03-0219-03 DeterminationoftotalnotoginsengglycosidesinnotoginsengtabletsbyHPLC ZHANGXiao-ping,XUShi-jie(HangzhouEthypharm?ConbaCMR&DCenterCo.,Ltd.Hangzhou310052,China) ABSTRACT:OBJECTIVETodeterminetotalnotoginsengglycosidesinnotoginsengtabletsbyHPLCforqualitycontro1.METH- ODSAnAgillentCls(4.6mm× 250mm,5tj.m)columnWaSusedwithamobilephaseconsistedofphaseA(0.02%H3PO4watersolu- tion).phaseB(Acetonitrile)ingradientelution0min(88:12)-30min(60:40)-60min(20:80)byflowrateof1.OmL.mininthis method.andUVdetectorWassetat203nm.1SULTsThelinearrangeofthreeglycosideswereallwide(r=0.999).Therangeof recoveryoftotalnotoginsengglycosidesinnotoginsengtabletswas100.4%(RSD=1.6%)(n=3).CONCLUSIONThemethod developedisrate,simple,rapidandreproducible,Whichcanbeappliedforthequalitycontrolofnotoginsengtablets. KEYWORDS:totalnotoginsengglycosides;HPLC;determination 三七片为以三七总皂苷为原料药制备得到的中药制剂, 其主要药成分为人参皂苷Rgl,人参皂苷Rbl和三七皂苷 中国现代应用药学杂志2006年6月第23卷第3期 R1.卫生部颁标准收载本品具有活血祛瘀,通脉活络,抑 制血小板聚集和增加脑血流等药理药效.临床用于脑络瘀 ChinJMAF:June,Vo1.23No.3'219' 阻,中风偏瘫,心脉瘀阻,胸痹心痛;脑血管后遗症,冠心病心 绞痛等疾病,被广泛地应用.但目前用于质量控制的含量测 定方法,卫生部颁标准采用分光光度法进行含量测定,存在 影响因素多,重现性差,测定误差大等缺点.故在参考了有 关文献资料的基础上,通过大量实验,摸索色谱系统和条 件,建立HPLC法进行含量测定,提高了方法的专属性和测 定结果的准确性. 1仪器与试剂 Agillent1100型高效液相色谱仪(配置:单波长紫外检测 器,带脱气四元泵,自动进样器).磷酸(纯杭州高晶精 细化工有限公司),乙腈(色谱纯天津四友生物医学技术有 限公司),甲醇(色谱纯天津四友生物医学技术有限公司), 纯化水(自制).三七皂苷R(R1),人参皂苷Rb(Rb1),人 参皂苷Rg.(Rs1)对照品(中国药品生物制品检定所),三七 片(自制样品,每片含50rag三七总皂苷,批号040316). 2色谱条件 色谱柱条件:AgillentCl8(4.6mm×250ram,51xm);流动 相:A相(乙腈)一B相(0.02%磷酸水溶液),梯度洗脱程序为 0min(88:12)一30rain(60:40)一60min(20:80);流速:lmL? rain,;检测波长:203nm,进样量:50,外标法定量. 系统适用性试验:在上述色谱条件下,三个主要成分均 得到较好分离,并与溶剂峰完全分离.其中理论塔板数按三 七皂苷R计不低于5000,三七皂苷R.与人参皂苷Rg.的分 离度大于1.5. 3溶液的配制 3.1对照品溶液 分别精密称取对照品人参皂苷Rb,人参皂苷Rg.及三 七皂苷R各约10rag,加甲醇配制成浓度各为20t~g?mL的 溶液,作为对照品溶液. 3.2供试品溶液 取本品l0片,研细,混匀,精密称取适量(约相当于三七 总皂苷50rag),置100mL量瓶中,加甲醇适量,振摇使完全溶 解,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液 2mL至10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得供试品溶液. 4方法学研究 4,1空白辅料的影响试验 按处方配制所用的等比例空白辅料,按供试品溶液的制 备方法制得空白对照溶液,进样分析,记录色谱图,结果表明 在与对照品色谱相应的保留时间处,空白对照品无色谱峰, 表明制剂所用辅料将对含量测定的组分不产生任何影响. 4,2供试品前处理的影响 本品主要成分为皂苷类成分,在甲醇中易溶,故供试品 前处理用溶媒选用甲醇,经试验表明,前处理方法可完全溶 解样品中的被测物,对含量测定方法的准确性无影响. 4.3线性试验 精密称取对照品,人参皂苷Rb.,人参皂苷Rg和三七皂 苷R.各约10rag分别置于100mL量瓶中,加甲醇溶解,定容 至刻度,摇匀.分别精密移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0, ' 220'ChinJMAP, 2006June,Vol.23No.3 7.0mL置于10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,作为供试品溶 液.分别精密吸取50,注入液相色谱仪,测定,记录峰面 积,并以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归,结 果见表l. 表1线性关系 Tab1Theoflineafity 4.4精密度试验 中间精密度取供试样品,在连续6d时间里,分别每天取 样进行含量测定,计算三七总皂苷含量,进行精密度分析,结 果标示平均含量为101.1%,RSD为1.52%.表明该方法测 定含量精密度良好.13内差取供试样品,在同一天时间里, 取样6份,分别进行含量测定,计算三七总皂苷含量,进行精 密度分析,结果标示平均含量为103.69%,RSD为1.85%. 表明该方法测定含量13内精密度良好. 4.5回收率试验 精密称取样品适量,置100mL量瓶中.每份样品中分别 加入对照品:人参皂苷Rbl,Rsl和三七皂苷砌各约10rag, 照含量测定方法供试品溶液的制备方法进行处理得供试品 溶液,测定每份样品的含量,分别计算回收率,结果见表2. 表2回收率试验结果 Tab2Resultsofrecovery 由上表结果表明,本法用于测定三七片中的人参皂苷 Rbl,Rsl和三七皂苷砌三种组分,每种组分的回收率均较 好,总回收率也良好. 4.6样品测定 按上述色谱条件和测定方法,对自制的样品进行含量测 定,测定三次,标示含量分别为100.95%,99.45%,98.70%, RSD为1.15%. 5讨论 三七为我国传统中药,其应用已有上千年历史,经现代 工艺制得的三七总皂苷,其药理药效较原植物药材更佳,但 中国现代应用药学杂志2006年6月第23卷第3期 是原含量测定方法不能有效地控制产品质量,尤其是只能测 定出总皂苷的量,而不能测定每个组份的含量,故专属性较 差,不能较好地反应出真正的含量.采用HPLC不仅解决了 上述两个问题,同时该方法操作简单易行,精密度和准确度 均较好. 本实验所述的HPLC不仅可以用于三七片中三七总皂 苷的含量测定,同时也可用于含三七药材的其它复方中药制 婴儿健脾散的质量研究 剂的质量控制,以及稳定性监测,具有较好的实用性. 参考文献 [1]WS3?B-3207-98血塞通片质量标准[S]. [2]沈国芳,吴永江,程翼宇,等.RP—HPLC测定血栓通注射液中4 种皂苷的含量.中国药学杂志,2003,38(9):698~99. 收稿13期:2005-05-08 骆军,黎呖(1.广州医学院第二附属医院,广州510260,2.广东省药品检验所,广州510180) 摘要:目的建立婴儿健脾散中木香烃内酯,去氢木香内酯和碳酸氢钠含量的测定方法.方法高效液相色谱法测定木香烃 内酯和去氢木香内酯的条件为:C.8柱,流动相为甲醇一水(65:35),UV检测波长为225nm;酸碱滴定法测定碳酸氢钠的含量. 结果此方法可靠,稳定,平均回收率分别为98.75%,98.66%和.98,94%,RSD分别为1.28%,1.5l%和0,81%(,l=6).结 论该方法测定灵敏,结果准确,可用于本品的质量控制. 关键词:婴儿健脾散;木香烃内酯;去氢木香内酯;碳酸氢钠;高效液相色谱法;酸碱滴定法 中图分类号:R985文献标识码:B文章编号:100%7693(2006)03-O221-O3 QualitystudyofYingerJianpiSan LUOJun,LIYang(1.TheSecondAj~liatedHospitalofGuangzhouMedicalCollege,Guang zhou510260,China;2.TheGuang- dong,,InstitateforDControl,Cuangzhou51080,China) ABSTRACT:OBJEC嗍 T0establishthemethodfordeterminationofcostunolide.dehydro.Or..curcumeneandsodiu mbicarbonate inYingerJianpiSan.THoDSTheHPLCmethodforeostunolideanddehydro心 curcumenewasused.Colunm:ODSC,mobile phase:methano1.water(65:35),UVwavelength:225nm;Theacid.basetitrationforsodiumb icarbonateWasused.REsULTsS methodWasreliableandstable,rhemeanrecoveryWas98,75%.98.66%and98,94%.RSDWas1.28%.1,5l%and0.81%(,l= 6).CONCLUSIONThemethoddevelopediSsensitiveandaccurate.andCanbeusedfortheq ualitycontrolofYingerJianpiSan. KEYWoRDS:YingerJianpiSan;costunolide;dehydro.Or..curcumene;sodiumbicarbonat e;HPLC;acid.basetitration 婴儿健脾散由白扁豆,木香,山药,鸡内金和碳酸氢钠等 八味药组成,具有健脾,消食,止泻的功效.临床上常用于消 化不良,乳食不进,腹痛腹泻.由于该药为中西复方制剂,为 有效地对组方中的中药和化学制剂进行质量控制,本研究采 用高效液相色谱法测定该制剂中有效成分木香烃内酯和去 氢木香内酯,同时采用酸碱滴定法对另一有效成分碳 酸氢钠进行含量测定,作为控制本制剂内在质量的指标. 1木香的含量测定 1.1仪器和试药 1.1.1实验仪器Agilent1100系列(紫外G1311A);美国 奥泰SAGE色谱工作站. 1.1.2试药与样品甲醇(色谱纯,Merck公司出品);双蒸 馏水(自制).木香烃内酯对照品购于中国药品生物制品检 定所(供含量测定用,批号为110781-200215),去氢木香内酯 对照品购于中国药品生物制品检定所(供含量测定用,批号 中国现代应用药学杂志2006年6月第23卷第3期 为110781-200219).婴儿健脾散(湖北诺得胜制药有限公司 批号040601,040602和040603). 1.2方法与结果 1.2.1溶液制备?对照品溶液的制备:精密称取木香烃 内酯对照品10.98mg,去氢木香内酯对照品10.08mg,置 10mL量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀;再精密吸 取lmL,置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得(每 lmL中含木香烃内酯0.1098mg,去氢木香内酯0.1008mg). ?供试品溶液的制备:取本品粉末约2.5g,精密称定,置具塞 锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,摇匀,称定重量,放置 过夜,超声处理(功率250W,频率50kHz)30min,取出,放冷, 再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液, 即得.?阴性对照品溶液的制备:取缺味木香样品,同供试 品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液. 1.2.2色谱条件Inertsil色谱柱(CI8'5,250×4.6mm); ChinJMAP,2006June,Vo1.23No.3.221