【word】 HPLC法测定清热解毒颗粒中靛玉红含量
HPLC法测定清热解毒颗粒中靛玉红含量
2007盘
第2l卷第7期
实用中医内科杂志
JOURNALOFPRACTICALTRADITIONALCHINESEINTERNALME
DICINE
JUL.2007
V01.2lNo.7
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实验研究?
HPLC法测定清热解毒颗粒中靛玉红含量
李亚秋孟宪生
(1.辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳110032;2.辽宁中医药大学药学院,辽宁沈阳110032)
关键词:清热解毒颗粒;靛玉红;
中图分类号:R283文献标识码:A
薄层扫描法
文章编号:1671—7813(2007)07—023—02
本制剂由金银花,大青叶等药味经提取加工制
成,具有清热解毒,凉血消斑之功效.为控制其质
量,本制剂采用反相液相色谱法测定大青叶中靛玉
红含量,经方法学考察,方法的专属性,精密度,稳定
性,重复性,回收率试验均符合有关规定,为该制剂
质量分析,提供了可行的控制方法.
1仪器与试剂
仪器:岛津LC一6A液相色谱仪.中北工作站.
试剂:甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯.靛玉红
对照品购自中国药品生物制品检定所.
2测定条件
色谱柱:Shim—packCLC—ODS柱(4.6ramX
150mm,5Ixm),柱温40%.为流动相甲醇一水(80:
20),流速:1ml/min,检测波长289nm,理论塔板数按
靛玉红峰计不低于4000.
3试验方法与结果
线性范围考察精密称取对照品10.02mg,置
500ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制
成每1ml含0.04rag的对照品溶液,分别吸取2.0,
4.0,6.0,8.0,10.01xl,注入液相色谱仪中测定,测
定结果回归处理.回归方程为:Y=692412.1X+
405.1r=0.9996,对照品样量在0.040,0.2g范
围内,线性关系良好.
供试品溶液制备方法考察根据靛玉红的化学
性质,本试验经参考有关文献,采用氯仿为提取溶
剂,对不同提取方法加以考察,考察结果见表l.
表l不同提取方法考察结果
测定结果提示:索氏提取4h供试品中靛玉红已
基本提取完全.
供试品制备方法为:取本品3g,研细,精密称
定,置索氏提取器中加氯仿回流提取4h,将溶液定
容至lOOml量瓶中.
精密度试验考察精密吸取供试液各l0l,注
入液相色谱仪中,以前述色谱条件测定,测定色谱
峰面积,测定结果为RSD为1.41%,符合有关规定.
稳定性试验考察精密吸取供试品溶液l0,
以前述色谱条件测定,间隔0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.
Oh测定色谱峰面积,测定结果为RSD为1.81%.
稳定性测定结果提示,供试液制备后5h内点样,测
定,靛玉红化学性质稳定.
重复性试验考察取同一批号样品各3g,精密
称定,按已确立的方法制成供试液,精密吸取供试液
l0l,对照液5p.1,进样分析,测定结果(n=5)为:平
均每g含靛玉红为0.658mg.
回收率试验考察取已知准确含量的样品1.
5g,精密称定,精密加入靛玉红对照品溶液(0.
03956mg/m1)25ml,按已拟定的方法测定,测定结果
为:平均回收率97.3%(n=5),RSD为1.7%,符合
有关规定.
表2加样回收率实验(n=6)
样品含量测定结果取不同批号的样品3g,按
已确立的方法测定,测定结果见表3.
表3样品含量测定结果
批号靛玉红含量(mg/g)
06O52l
O6O6l3
O.65
O.68
O.59
4讨论
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23?
2007年
第21卷第7期
实用中医内科杂志
JOURNALOFPRACTICALTRADITIONALCHINESEINTERNALME
DICINE
JUL.2007
Vo1.21No.7
骨愈灵胶囊对骨性关节炎
家兔模型血清及关节液中IL—l表达的影响
杨涛指导:刘元禄
(辽宁中医药大学附属第一临床医院,辽宁沈阳110032)
关键词:骨性关节炎;中医疗法;
中图分类号:R274文献标识码:A
IL—l;关节软骨;关节液
文章编号:1671—7813(2007)07—024—02
骨性关节炎作为一种常见病,多发病越来越得
到人们的关注.早期主要临床表现是:以僵硬为主,
劳累,受凉或轻微外伤而加重,肢体从一个位置换到
另一个位置时困难,稍活动疼痛僵硬很快缓解,发展
到晚期关节疼痛加重,夜间休息时能疼醒,疼痛为持
续不断,直至关节变形,肿大,功能活动受到障碍,生
活不能自理.现代医学认为,骨性关节炎(osteoar-
thritis,OA)是机械性和生物性因素相互作用,使关
节软骨细胞,细胞外基质和软骨下骨合成与降解的
正常进行失去平衡的结果.不过,OA可由多种因
素引发,包括遗传,发育,代谢和创伤因素,OA疾病
可累及可动关节的全部组织.OA疾病的最终表现
是:由于软骨细胞与基质形态学,生物化学,分子生
物学和生物力学的改变,从而导致关节软骨软化,纤
维化,溃疡,减少,软骨下骨的硬化与象牙化,骨赘形
成和软骨下骨囊肿”J.本实验通过观察骨愈灵胶囊
对骨性关节炎家兔模型血清及关节液IL—l表达的
影响,来考察中医中药治疗骨性关节炎的效果,并从
分子生物学角度探讨其作用机理.
l材料与方法
材料实验动物:5,8月龄家兔28只,体重
1.4,2.5kg,皆为雄性,由辽宁中医药大学动物实验
中心提供.
实验药品?骨愈灵胶囊(主要成份:三七,血
竭,红花,当归,川芎,赤芍,乳香(制),没药(制),大
黄,续断,骨碎补,五加皮等十六味,购于辽宁中医药
大学附属第一临床医院(由陕西宏府怡悦制药有限
公司生产),加入蒸馏水配成lmg/rrd的混悬液.?
双氯芬酸钠(购于辽宁中医药大学附属第一临床医
院)加入蒸馏水配成0.25mg/ml的混悬液.各药混
悬液封瓶后置于冰箱保存备用.
试剂及设备?IL一1试剂盒(购于沈阳博而
美公司)?相关检测设备由中国医科大学提供.
实验动物的分组将28只家兔随即分4组:骨
愈灵胶囊组(A组),双氯芬酸钠组(B组),模型组
(C组),正常对照组(D组),每组7只.
造模方法A,B,C组按照Hulth方法造模:
腹腔注射苯巴比妥钠(50nlg/kg)麻醉后,按无菌操
鹾伏
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靛玉红对照品HPLC色谱图清热解毒颗粒HPLC色谱图清热解毒颗
粒阴性液HPLC色谱图
本试验先后采用乙腈一水(65:35),甲醇一水附液相色谱图.
(85:15),甲醇一水(80:20)为流动相,试验结果提参考文献
示,在第三种流动相下,供试液中靛玉红色谱峰与相
邻组分分离度良好,方法专属性重复性均良好.见
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E1]国家药委员会.@~2oo5版一部[M].第1版.北[标签:快照]