I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生【可编辑版】I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生【可编辑版】
I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生 I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生
作者:
钱济先 ,张柏根 ,李桂云 ,张岚,邓廉夫,朱雅萍 【关键词】
内皮素 关键词: 内皮素;反义寡核苷酸;血管平滑肌细胞 摘 要:目的 观察?型内皮素受体(ETA)反义寡核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和内膜增生的抑制作用. 方法
?细胞培养:取家兔主动脉中膜消化后培养传代,经抗α-atin鉴定后使用第4,6代传代细胞...
I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生【可编辑版】
I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生 I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生
作者:
钱济先 ,张柏根 ,李桂云 ,张岚,邓廉夫,朱雅萍 【关键词】
内皮素 关键词: 内皮素;反义寡核苷酸;血管平滑肌细胞 摘 要:目的 观察?型内皮素受体(ETA)反义寡核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和内膜增生的抑制作用.
?细胞培养:取家兔主动脉中膜消化后培养传代,经抗α-atin鉴定后使用第4,6代传代细胞;
?人工合成ODN:经Genbank检索筛选,合成含18bp ETA-ODN片段,再对5'端硫代修饰以增加稳定性,同时行地高辛标记以检测反义片段的细胞膜穿透性;
?MTT分光光度法检测ETA-ODN对VSMC增殖的抑制作用;
?运用放射受体结合分析法(125 I-ET-
1) 了解ODN对ETA蛋白
达的抑制作用,以探讨其反义作用;
?兔颈动脉空气干燥模型在体研究ODN对血管内膜增生的抑制作用:应用F-127凝胶载体携带ETA-ODN(
3.0μmol L-1 )导入血管周围,术后不同时间观察增生内膜相对厚度. 结果 ODN于培养后12h进入细胞内,并逐渐增加;15μmol L-1 ETA-ODN对VSMC增殖具有抑制作用,24h后即有显著作用;ETA-ODN对ETA表达亦有明显的抑制作用,表现为CPM于24h逐渐减少;ETA-ODN导入后,血管增生内膜相对厚度减少. 结论 ETA-ODN以浓度和时间依赖方式抑制ETA蛋白表达以及VSMC的增殖;反义寡核苷酸是通过反义
实现对ETA蛋白和VSMC增殖的抑制作用. Antisense endothelin?1reeptor oligonuleotide in?hibit vasular smooth musle ell proliferation and intimal hperplasia Abstrat:AIM To evaluate the inhibitive effet of antisense endothelin-1reeptor oligonuleotide(ODN)on VSMC groth and intimal
hperplasia.METHODS
?Cell ul-ture.The medium of rabbit aorta ere harvested,digested and the dispersions ere ultured.The ells of passage4,6ere routinel used to stud after identifiation ithα-atin antibod.
?ODN snthesis.The antisense sequenes ere designed and sreened through Genebank sanning.After these proedures,eighteen phosphorothioate antisense -plementar to ETA DNA ere snthesized,and eventuall labeled ith digoxin b hih the sequenes stabilit be aug-mented and membranous permeabilit tested.
?MTT method as used to evaluate DNA snthesis in ODN treated VSMC.
?125 I-ET-1radiobinding assa to ETA and immuno-histohemistr ere utilized to examine protein expression of the reeptor,and to disuss roles of the ODN.
?ODN dis-solved in200mL L-1 F-127gel solution at onentration of
3.0μmol L-1 ere applied to surround the exposed region of arotid arter on the basis of Air Dr Model.Thus the inti-mal thikness and luminal narroness ould be investigated.RESULTS
?ETA-ODN ould be found in ultured VSMC in12h and graduall inreased.
?ETA-ODN at onentra-tion of15μmol L-1 suppressed VSMC proliferation,hih shoed a signifiant ation in24h.
?ETA protein expres-sion as redued,indiated b the phenomenas that CPM progressivel dereased in24h.
?Intimal thikness and lu-minal narroness ere lightened after ETA-ODN indution.CONCLUSION ETA-ODN suppresses ETA expression and SMC proliferation in a time
and onentration dependent manner.ETA plas an important role in mediating ultured VSMC proliferation ourse.ETA-ODN exerts inhibitor funtion through antisense mehanism.
本文档为【I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生【可编辑版】】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑,
图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。