双酚A和壬基酚长期暴露对斑马鱼繁殖的影响

双酚A和壬基酚长期暴露对斑马鱼繁殖的影响 第 31 卷增刊水产 学报 V o l. 31, S upp l. 2007 年 9 月 S ep. , 2007 JOU RN AL O F F ISH ER IES O F CH IN A ( )文章编号 : 1000 - 0615 2007 增刊 - 0059 - 06 双酚 A 和壬基酚长期暴露对斑马鱼繁殖的影响 沈万赟, 周忠良, 李祥军 ()华东师范大学生命科学学院 , 上海 200062 摘要 :内分泌干扰物的研究目前正逐渐成为国际研究新的热点 , 但长期暴露条件下对生殖情况 (())的研究目前较少 。本文研究了环境类雌激素双酚 A B PA 以及和壬基酚 N P 联合的作用 , 对 ( ) ()暴露一个世代的斑马鱼 D anF io rerio的生殖情况 、子代质量的影响。 将健康的受精卵 48 1 - 1 - 1 μμh 后暴露于 200, 500, 1 000 g〃L B PA 以及三个浓度与 30 g〃L N P 的联合 , 同时设臵空 - 1 μ白对照和 30 g〃L N P对照 。 130 dp h 将成鱼臵于清水喂养 20 d, 统计每天的产卵量 、产卵次 数 、畸形率 、孵化率 、卵径 、破膜时间以及耐饥时间 。以此为终点评估暴露后斑马鱼的生殖能力 和子代质量 。与对照相比 N P, B PA 可以抑制斑马鱼的生殖 , 两种类雌激素联合作用可以极显 ( ( ) ) 著地抑制斑马鱼的生殖 P < 0. 01 ; B PA 各浓度组导致 F代畸形率上升 P < 0. 05 ; 高浓度1 - 1( ) μ( B PA 抑制产卵量 P < 0. 05 ; B PA 200, 500 g〃L 会延长 F 代的破膜时间和耐饥时间 P < 1 - 1) μ( ) 0. 01 , 而 B PA 1 000 g〃L 则产生相反的效果 P < 0. 05 。双酚 A 对斑马鱼的生殖有明显的 抑制作用 , 双酚 A 和壬基酚有协同效应 。长时间暴露于双酚 A 会影响斑马鱼的生殖能力和子 代质量 。 关键词 :斑马鱼 ; 双酚 A ; 壬基酚 ; 生殖能力 ; 子代质量 中图分类号 : Q 591. 9; S 917文献标识码 : A Effec ts of lon g term expo sure to b isphen o l A an d n on y lphen o l ()on the reproduc t ion of zebra f ish D a n io re r io SH EN W an 2yun, ZHOU Zhong 2liang, L I X iang 2jun ( )S chool of L ife S cience, East Ch ina N orm a l U n iversity, S hangha i 200062, Ch ina ( ) ( ) A b stra c t: The effec ts of b isp heno l A B PA , nony lp heno l N P , and the ir m ix tu re on the rep roduc tive ab ility and offsp ring qua lity of zeb raf ish w h ich w e re exp osed fo r a gene ra tion w e re inves tiga ted in th is - 1 μp ap e r. The 48 2hou r2o ld eggs w e re exp osed to b isp heno l A a t 200, 500, 1 000 g〃L , to nony lp heno l a t 30 - 1 μg〃L and to the ir m ix tu re un til 130 dp h. Then zeb raf ish w e re fos te red in the c lean w a te r fo r 20 days. R eco rded once fecund ity, tim es of rep roduc tion, m a lfo rm a tion ra te, ha tch ing ra te, egg s ize, su rv iva l days and eggshe ll2b reak ing tim e as endp o in ts to eva lua te the rep roduc tive ab ility and offsp ring qua lity. C om p a red ( ) w ith con tro l, the fecund ity of N P and B PA reduced P < 0. 05 . B PA resu lted in the e leva tion of - 1 μ( )m a lfo rm a tion ra te P < 0. 05 . 200, 500 g〃L of B PA cou ld p ro long the su rv iva l days and eggshe ll2 - 1 μ) ( ) ( b reak ing tim e of Foffsp ring P < 0. 01 w h ile 1 000 g〃L of B PA had the reve rse resu lt P < 0. 05 . 1 B isp heno l A w ou ld s ign if ican tly res tra in rep roduc tive ab ility of zeb raf ish. B isp heno l A and nony lp heno l 收稿日期 : 2007 203 209 ( ) 作者简介 : 沈万赟 1982 - , 男 , 上海市人 , 硕士 , 从事鱼类毒理学研究 , E 2m a il: tgss_snow @ ho tm a il. com 通讯作者 : 周忠良 , Te l: 021 - 62233578, E 2m a il: zhouz l@m a il. ecnu. edu. cn have syne rg is tic effec t. L ong 2tim e exp osu re to b isp heno l A w ou ld s ign if ican tly affec t the rep roduc tive ab ility and offsp ring qua lity of zeb raf ish. Key word s:D an io rerio; b isp heno l A ; nony lp heno l; rep roduc tive ab ility; offsp ring qua lity ( ) 26 ?1 ?, 自 然 光照 , 每 天喂 以 冰冻 红虫水温 随着工业的飞速发展 , 越来越多具有内分泌 [ 1 - 2 ] () 干扰作 用 的 物 质 , 由 于 其 可 能 对 人 类 及 动 共鳞实业有限公司 两次 。 2 周后按照雌雄 1 ?[ 3 - 4 ] 2 比例配对 , 日夜比 14 h ?10 h 下产卵 。物 的健康和繁殖产生极为不利的影响 , 近年 1. 3 暴露设计来受到普遍关注 , 成为人们研究的热点 。其中 , 壬 ()() 收集亲鱼的受精卵放入清水中孵化 , 两天后 基酚 N P 和双酚 A B PA 都是公认的内分泌干 将发育良好的受精卵按照每升 150 粒放入玻璃缸 扰物 , 有类似雌激素类的作用 , 在水体中会对多种 - 1 - 1 [ 5 - 6 ] ( μμ 中 , 分别暴露于 B PA 200 g〃L , 500 g〃L ,鱼类产生雌激素效应 , 干扰正常的内分泌调 - 1 - 1 μ) ( μ) 1 000 g〃L , N P 30 g〃L , 及两种物质的 节 。 - 1 - 1 (μμ 混合物 B PA 200 g〃L + N P 30 g〃L , B PA 鱼类的整个繁殖过程是在雌激素调节下进行 - 1 - 1 - 1μμμ 的 , 因此 , 环境中的类雌激素化合物对鱼类正常生 500 g〃L + N P 30 g〃L , B PA 1 000 g〃L - 1 μ) ( 殖活动的影响是鱼类生理生态学研究的重要内容 + N P 30 g 〃L 中 , 丙 酮 浓 度 最 高 < ) 之一 。目前 , 对这方面的研究工作大多数是建立0. 001 % , 每个浓度组设 3 个平行 。 24 h 更换一 在鱼类某一生理阶段上进行的亚急性研究 , 而在 半的试液 。 整个世代暴露的慢性影响研究资料较少 。自然水 孵化后 2 ,14 dp h 喂 以 草 履 虫 , 每 天 3 次 。 域中 , 多数情况下污染物对鱼类的影响是长期 , 可 14 dp h 将幼鱼转入到 2 L 容器中继续暴露 ; 14 , 能作用于整个性腺发育和繁殖过程 , 慢性毒性研 () 40 dp h 喂以幼鱼饲料 山东海洋水产研究所 , 每 究的结果将更接近于实际环境 , 有助于人们对环 日定时投喂 4 次 。 40 dp h 将幼鱼移 入 4 L 容器 境雌激素类物质 对鱼 类 生理 生态 影 响机 理的 了 中 。 40 ,130 dp h 每 日 投 喂 4 次 鱼 虫 干 粉 。 60 解 。dp h 将鱼转移到 8 L 容器中 。所有实验用受试鱼 () ( ) 斑马鱼 D an io rerio是一种目前广泛应用于 卵卵生的 F水温控制在 26 ?1 ?。1 毒理学研究的模式动物 , 世代周期相对较短 , 孵化 1. 4 生殖力和子代质量 120 d 后能进行繁殖 , 便于进行世代周期实验 , 迄130 dp h 将 F代 斑 马 鱼 按 雌 雄 比 为 1 ?2 1 今为止利用斑马鱼在亚急性水平上进行内分泌干 ( )n ?4 的配比放入到盛有清水的自制玻璃产卵 [ 6 - 7 ] 扰物对繁殖的影响研究已进行的比较深入 。 ( ( )) 箱 20 cm ×15 cm ×20 cm 中 , 水温 26 ?1 ?。 () 本文报道了整个世代长时间暴露于壬基酚 、双酚 每天早晚喂以冰冻红虫 共鳞实业有限公司 , 光 A 两种环境雌激素类化合物 , 对其繁殖成功率以 照时间为日 ?夜 = 14 h ?10 h 。每天早上记录产 及胚胎发育的影响 , 初步探讨了壬基酚和双酚 A 卵情况 , 如有产卵情况则更换全水 。从第五次产 联合作用效应 , 为生态毒理学研究提供一些有意 卵开始统计产卵量 、卵径等数据 , 产卵统计时间为 义的参数 。20 d。 受精卵孵化在 24 孔板中进行 , 每孔 1 粒 , 臵 1 材料和方法 ( ) 于光照培养箱中 , 温度为 26 ?1 ?, 光照时间为 1. 1 试剂 日 ?夜 = 14 h ?10 h。统计受精卵的孵化率 、孵化 ( )( ) F luka 公 司 双酚 A S igm a 公司 、壬 基酚 速度以及胚胎的畸形率和初孵仔鱼在饥饿条件下 () 分别以丙酮 国药集团化学试剂有限公司 助溶的存活时间 。 - 1 - 1μμ配臵成 100 g〃L , 30 g〃L 的母液 , 4 ?避光 1. 5 计算方法 保存 。 畸形率 =每组畸形个数 /每组孵化数; 孵化率 =每组孵化个数 /每组产卵数1. 2 亲鱼的喂养和产卵 亲鱼采购自曹安花鸟市场 。 30 尾雄鱼和1. 6 统计分析 20 ( 尾雌鱼分 别 放入 20 L 玻 璃 水槽 中 驯 养 半 个 月 。实验数据通过 sp ss 13. 0 统计软件 S ta tS of t, )Inc. 进行显著性检验和作图 , 图中的数据点用平 () 均值 ?差 M ean ?S E 表示 。利用方差分析 ()O ne 2W ay A N O VA 来检验产卵次数 , 卵径 , 孵化 率 、孵化速度 、畸形率 、饥饿条件下的存活时间的 ( ) 显著性 , 用最小极差法 L SD 进行多重比较 , P < ( ) 0. 05 为差异显著 。利用 C h i2squa re tes ts 检验产 卵次数的显著性 , P < 0. 05 为差异显著 。 2 结果 2. 1 F代斑马鱼的繁殖成功率 1 图 1 B PA 对斑马鱼产卵数的影响 ( )3 P < 0. 05, 3 3 P < 0. 01 图 1 显示了暴露 130 d 后各试验组的实验鱼 F ig. 1 Effec ts of B PA on the once fe rtility of D an io rerio μ平均每次产卵数 , 从图中可以看到 , B PA 200 g〃 - 1 - 1 ) μ(表 1 列出 了 暴露 于不 同浓 度 B PA 和 N P 中L 每尾 112. 56 ?9. 66 粒 、B PA 500 g〃L - 1 () μ(( ) 的斑马鱼在试验期间 每尾 7 6. 00 ?6. 09 粒 以及 N P 30 g〃L 每 20 d 成功产卵的数量 , 从 ) 尾 125. 50 ?24. 50 粒 等低浓度试验组斑马鱼每 表中可见 , 暴露于低浓度 B PA 及 N P 试验组的鱼 () μ( 次产卵数与对照组 每尾 93. 00 ?7. 96 粒 有所 都能成功 产 卵 , 暴露 于高 浓 度 B PA 1 000 g〃 - 1)L 以及 B PA 和 N P 联合实验的各试验组 , 每组 不同 , 但 是 差 异 不 显 著 ; 而 高 浓 度 组 B PA 1 000 - 1 μ( ) g〃L 50. 75 ?7. 66 粒 以及联合浓度组 B PA都有部分鱼不能繁殖 。在试验过程中可以看到 , - 1 - 1 μμ( ) μ 200 g〃L + N P30 g〃L 0 粒 、B PA 500 g〃高浓度组合联合试验组中雄鱼的追逐能力下降 , - 1 - 1 - 1 μ) μ( 兴奋性差 。随着试验药物浓度的增加 , 第一次产 L + N P 30 g〃L 0 粒 、B PA 1 000 g〃L + - 1 μ( ) 卵时间也明显滞后 。直到最后整个浓度组的所有 N P 30 g〃L 0 粒 的平均产卵数都显著低于 ( ) 对照组 P < 0. 01 。 配对斑马鱼都不能成功进行生殖活动 。 表 1 BPA 和 NP对斑马鱼产卵成功的影响 The reproduc t ion of D a n io re r io expro sed to BPA & NP Ta b. 1 ()()化合物浓度 观察鱼数 产卵鱼数 对 不产卵鱼数 对 首次产卵时间 产卵次数 - 1 ( )(μ)()rep roduc tion no rep roduc tion d g〃L 对 sp aw n ing tim es ( )( )( )concen tra tion N p a irs p a irs p a irs f irs t lay ing day a aaa8 8 0 对照 con tro l 1. 25 ?0. 25 12. 00 ?1. 58 aabb12 12 0 B PA 200 4. 17 ?1. 56 6. 50 ?1. 41 aabab10 10 0 B PA 500 6. 4 ?3. 17 9. 00 ?2. 256 bbbc6 6 2 B PA 1000 4. 67 ?2. 03 9. 67 ?4. 67 c 4 0 4 0 B PA 200 + N P30 B bc 7 1 6 18. 00 PA 500 + N P30 B c PA 1000 + N P30 7 1 6 16. 00 N 1. 00 aabb P30 6 6 0 4. 67 ?0. 33 4. 67 ?0. 33 ( ) ( )注 : 同一列上方参数有一个字母相同则无显著差异 P > 0. 05 , 反之 , 则有显著差异 P < 0. 05 ( ) N o te: V a lues in the sam e row w ith the sam e sup e rsc rip ts a re no t s ign if ican tly d iffe ren t P > 0. 05 , o the rw ise, w ith the d iffe ren t ( )sup e rsc rip ts a re s ign if ican tly d iffe ren t P < 0. 05 2. 2 卵径和孵化率2. 3 出膜时间 对照组的孵化率与卵径大小与 B PA 各浓度 统计每个 受精 卵 从产 卵到 破 膜 孵 化 所 需 时 组的没有 显著 差 异 。各 浓度 组之 间 也没 有差 异 间 , 可以看到不同实验组卵孵化所需时间不完全 - 1- 1() () μμ表 2 。即子代的卵径和 孵化 率与 暴 露的 B PA 相同 图 2 , B PA 200 g〃L 和 500 g〃L 组所 ( ) ( ) 浓度没有相关性 。需时间分别为 5. 11 ?0. 06 d和 5. 35 ?0. 08 d, - 1 - 1( ) μ明显缓于对照组 [ 4. 64 ?0. 06 d ]。B PA 1 000L 和 500 g〃L 组仔鱼的耐饥饿能力 [分别为 - 1μ( ) ( ) ( ) g〃L 组为 3. 96 ?0. 03 d, 速于对照组 。15. 19 ?0. 08 d 和 15. 03 ?0. 09 d ]略大于对 - 1 ( ) μ照组 [ 13. 83 ?0. 06 d ] , B PA 1000 g〃L 组 表 2 BPA 对斑马鱼孵化率及卵径大小的影响 (( ) ) [ 13. 33 ?0. 10 d ]则低于对照组 见图 4 Ta b. 2 Effec ts of BPA on the ha tch in g ra t io an d egg s ize of D a n io re r io ( )()孵化率 % 产卵数 m m ha tch ing ra tio egg s ize CON TROL 55. 71 ?6. 63 ?0. 004 0. 9599 B PA 200 56. 68 ?4. 890. 9654 ?0. 004 B PA 500 61. 43 ?5. 300. 9635 ?0. 003 B PA 1000 59. 37 ?8. 05 0. 9535 ?0. 012 图 4 B PA 对斑马鱼 F代耐饥时间的影响 1 ( )3 P < 0. 05, 3 3 P < 0. 01 F ig. 4 Effec ts of B PA on the su rv iva l days of Foffsp ring unde r s ta rva tion 1 2. 6 精巢的组织学观察 取对照及各试验组雄鱼之精巢进行常规的组 图 2 B PA 对斑马鱼 F代破膜时间的影响 1 织学切片 , 观察发现 , 随着 B PA 浓度的增加 , 雄鱼 ( )3 P < 0. 05, 3 3 P < 0. 01 - 1 μ精巢中精细胞的数量减少 , 在 B PA 1 000 g〃L F ig. 2 Effec ts of B PA on eggshe ll b reak ing tim e (组和各 B PA 与 N P 联合浓度组中尤为明显 图 5 2 of Foffsp ring 1 ) A 和 B 。 2. 4 子代的畸形率 讨论3 暴露于不同浓度 B PA 中斑马鱼子代都有出 3. 1 BPA 对斑马鱼生殖的影响 μ现畸形 , 如腹部肿胀 、尾部弯曲等 。B PA 200 g〃 - 1 - 1 - 1 μμL 、500 g〃L 和 1 000 g〃L 各组斑马鱼子代 亲鱼性腺良好发育是繁殖成功的基础 , 鱼类 的畸 形 率 分 别 为 19. 31 % ?4. 42 % 、17. 05 % ?性腺发育始终是在 内分 泌 系统 调节 控 制下 进行 3. 76 %和 15. 36 % ?2. 23 % , 明 显 高 于 对 照 组 的 , 因此 , 环境内分泌干扰物的存在会对鱼类繁殖 ( ) ) ( 2. 26 % ?1. 11 % 图 3 。产生较大的影响 。大量实验证明 , 水体中 B PA 的 存在 , 可对鱼体产生弱的类似雌激素的效应 , 可干 扰正常的内分泌激素的效应 。本实验结果显示 , - 1 μ在 200 g〃L B PA 存在时 , 雌鱼的产卵量与对 照相比有所增加 , 但不显著 。当 B PA 浓度继续加 μ大时 , 雌鱼的产卵量逐渐减少 , B PA 为 1 000 g〃 - 1 ( L 时 , 实验组雌鱼产卵量明显少于对照组 P < [ 8 ] ( 0. 05。 K ang 等 研 究 B PA 对 日 本 青 鳉 O ryzias - 1 μμ)la tipes生殖影响时发现, 在 837 g〃L 、1 720 g〃 图 3 B PA 对斑马鱼子代畸形的影响 - 1 - 1( )3 P < 0. 05, 3 3 P < 0. 01 μL 、3 120 g〃L 3 个浓度下进行为期 3 周的暴 - 1F ig. 3 Effec ts of B PA on m a lfo rm a tion ra tios μ露 , 除了 1 720 g〃L 浓度下雌鱼产卵量略低于 of Foffsp ring 1 () 对照组外 差异不明显 , 其他各浓度组与对照之 [ 9 ] - 1 μ间没有差异 。钟雪萍等 分别以 10 g〃L 、100 2. 5 F代仔鱼耐饥时间 1 - 1 μ( g〃L 浓度的乙烯雌酚对稀有鮈鲫 Gobiocypris (于 B PA 中也影响到仔鱼的耐饥饿能力 丛受 )ra rus进行暴露研究 , 发 现 这两 个浓 度 对于 鮈鲫 ) μ精开始计算 。与孵化时间相似 , B PA 200 g〃 图 5 B PA 对斑马鱼精巢的影响 F ig. 5 The effec ts of B PA on the sp e rm a togenes is of D an io rerio - 1μA : C on tro l; B : B PA 1 000 g〃L SC : 精细胞 Sp e rm ce lls; S PC : 精原细胞 Sp e rm a tocy tes ce lls 的产卵量并没有影响 。这些研究工作的共同特点, 体内的激素分泌混发育受到持久的抑制或伤害 是毒物暴露时间都相对较短 , 且都是用性成熟的 乱 , 其行为表现为雄鱼的兴奋性差 , 追逐能力下 鱼进行暴露 , 而本文的研究工作是建立在受精卵 降 , 而导致繁殖产卵的失败 。在低浓度暴露组 , 雄 鱼进入清水一段时间后能够很快恢复 , 性腺得以 暴露于 B PA 直到成熟期长期暴露基础上 , 说明高 浓度 、长时间的暴露于 B PA , 也会对 雌性 个体 性 补偿发育 , 因此 , 在 20 d 观察期的后期开始产卵 , 高浓度以及两种化合物联合作用时 , 20 d 不足以 腺发育产生影响 。这种影响主要表现在成熟卵的 使雄鱼得到恢复 。B PA 对雄激素的干扰机制 , 目 数量上 , 对于卵的大小没有明显作用 。 [ 10 ] 100 ng〃前尚不清楚 , 有待进一步研究证实 。 B rion 等 , 在 仔鱼 阶 段曾 暴露 于 - 1 ( ) L 的雌二醇 E2 中的斑马鱼 , 其首次的产卵时3. 2 BPA 对 F代的影响 2 间相比于空白大约会有 2 星期的延迟 。在斑马鱼 孵化率 、孵化时间 、畸形率以及仔鱼耐饥饿时 性腺发育的关键时期 , 如果受到外源雌激素或雌 间等指标可以反映受精卵及仔鱼的质量 。其中 , 激 素 类 似 物 的 影 响 很 有 可 能 影 响 精 巢 的 发 育 。 孵化时间 、仔鱼耐饥饿时间与卵母细胞的营养储 - 1- 1μ( ) 100 g〃L 的 N P, 10 ng〃L 的乙炔雌醇 EE 就 备以及胚胎的代谢有关 , 孵化率 、畸形率与受精卵 [ 11 - 13 ] 会改变斑马鱼的性别比例 , 通过组织切片观察 30 的遗传物质有关 。本实验的结果显示 , 虽然 - 1 [ 6 ] μ g〃L 的 N P 中 雄 鱼 体 内 就 发 现 有 精 卵 巢 。B PA 对斑马鱼的孵化率没有明显影 响 , 但是 , 暴- 1 μ在本次的实验中 , 我们发现暴露于高浓度 B PA 的 露于浓度为 1 000 g〃L B PA 中的斑马鱼 , 其孵 化时间短于对照 。类似的情况也发生在 试验组中的斑马鱼 , 其首次产卵时间 、和产卵次数 N P 暴露 [ 7 ] - 1 μ中 。 Y ang 等 报道 , 50 g〃L 的 N P 可以导致 频率都迟于和低于空白对照组 。而 在 浓度 B PA - 1μ 斑马鱼卵壳变薄 , 导致孵化时间缩短 。B PA 作为 1 000 g〃L 组中有两对鱼在观察的 20 d 内没 有成功产卵繁殖 , 组织学观察现实通过石蜡切片 和 N P 类似的内分泌干扰物 , 很有可能在高浓度 观察其精巢 , 发现其雄鱼精巢内缺乏成熟的精细 时发生类似的效应 , 结合其自愈耐饥饿时间短于 胞远少于 对照 组 。雄 鱼 性腺 发育 是 在雄 激素 调 对照等结果 , 可以推测 , 高浓度的 B PA 对鱼类卵 控 , 为此 , 可以推断 , B PA 、N P的存在 , 会影响雄性 母细胞的发育有影响 。 激素的正常效应 。N P 和 B PA 可诱导雄鱼肝脏合 本研究结果显示 , 暴露于 B PA 中生长的斑马 鱼 , 其子代的畸形率都呈现极其显著的上升 , 子代 成并分泌卵黄蛋白原已在多种鱼类中得到证实 , 中出现大量的尾部弯曲 , 腹部肿胀的个体 。本实 由此看来 , 这两种物质不仅有雌激素效应 , 而且对 - 1μ验室的另一项研究显示 , 短期暴露于 200 g〃L 雄性激素有干扰作用 。鱼类的生殖行为一般都是 的 B PA 不足以诱导雄性斑马鱼成体分泌卵黄蛋 随着雄性追逐等求偶行为的发生而启动的 , 由于 白原 , 由此可见 , 斑马鱼不同生命阶段对污染物的 长期受到水体中的 B PA 的影响 , 雄性个体的精巢 [ 7 ]- 1395. 敏感性不同 , 早期发育阶段更加敏感 。 Y ang 等 Facem ire C F, G ross T S , G u ille tte J r L J. R ep ro2 [ 3 ] 认为 , 最低效应浓度的 N P 也能导致斑马鱼后代 duc tive im p a irm en t in the f lo rida p an the r: na tu re o r 的畸形率上升 , 其中 N P对雌体的影响大于雄性。 nu rtu re ? [ J ]. Env iron H ea lth Pe rsp ec t, 1995, 103 结合本研究结果可以看到 , 外源雌激素类物质也 ( ) S upp l. : 79 - 86. 存在一定的遗传毒性 , 其作用机理未见报道 , 有待 [ 4 ] J ob ling S, S heanan D , O sbo rne J A , et a l. Inh ib ition 进一步研究 。 of tes ticu la r g row th in ra inbow trou t 3. 3 BPA 和 NP联合作用对于斑马鱼生殖成功( ) O ncorhynchusm yk iss exp osed to a lky lp heno lic 的影响由图 1 和表 1 可知 , 虽然在 B PA 200 chem ica ls [ J ]. Env iron Tox ico l C hem , 1996, 15: 194 - 1 - 1 - 1 μμμg〃L 、500 g〃L 和 N P 30 g〃L 单一暴露 - 202. [ 5 ] D ras tichováD , S vobodováZ, et a l. Effec t of exp o2 su 的情况下 , 斑马鱼的产卵成功 、产卵数 、产卵次数 βre to B isp heno l A and 172es trad io l on the S ex D 与空白对照相比略有不同 , 但是差异并不明显 。 ( ) iffe ren tia tion in Zeb raf ish D an io rerio[ J ]. A c ta 而一旦在两种类雌激素联合暴露下 , 会极其显著 - 1 V e t B ron, 2005, 74: 287 - 291. μ地抑制斑马鱼生殖在 B PA 200 g〃L + N P 30 [ 6 ] R obe rt L , H ill J r, D av id M J. D eve lopm en ta l - 1 - 1 - 1 μμμ g〃L 、B PA 500 g〃L + N P 30 g〃L 、B PA( ) es trogen ic exp osu re in zeb raf ish D an io rerio : I. - 1 - 1 μμ 1 000 g〃L + N P 30 g〃L 3 个联合暴露组中Effec ts on sex ra tio and b reed ing success [ J ]. 20 d 清水恢复后所有斑马鱼基本都没有 成功 繁 A qua tic Tox ico logy, 2003, 63: 417 - 429. 殖 。在本实验室对成年雄性斑马鱼 进 行的 B PA [ 7 ] Y ang F X , X u Y, Y ang H. R ep roduc tive effec ts of 和 N P 联合暴露实验时 , 发现两种无效浓度叠加 p rena ta l exp osu re to nony lp heno l on zeb raf ish () 时会产生极其显著的协同效应 , 诱导 v tg 大量合 D an io rerio [ J ]. C om p a ra tive B iochem is try and Phys io logy, Pa rt C , 142, 2006, 77 - 84. () 成 文献待发 , 这与本实验结果是类似的 。 [ 8 ] Ik J oon Kang, H irofum i Y, et a l. Effec ts of B is2 4 结论 p heno l A on the rep roduc tion of J ap anese M edaka ( ) O ryzias la tipes [ J ]. Env ironm en ta l Tox ico logy 综上所述 , 作者认为双酚 A 和壬基酚作为类 ( ) and C hem is try, 2002, 21 11 : 2394 - 2400. 雌激素对斑马鱼的生殖行为有抑制作用 , 当两种 钟雪萍 , 徐 盈 , 梁 永 , 等 . 稀有鮈鲫生命早期的[ 9 ] 类雌激素混合后 , 会产生协同效应甚至导致中止 己烯雌酚暴露对生长发 育与繁殖 的 影 响 [ J ]. 水 生殖行为 。这种影响主要是通过抑制雄鱼的精细 ( ) 胞发育实现的 , 当这种抑制超过个体的承受程度 生生物学学报 , 2005, 29 6 : 667 - 672. 时 , 即使在清水中也不能被个体修复 。同时高浓 β B rion F, Ty le r C. R , Pa lazz i X , et a l. Im p ac ts of 172[ 10 ] 度的双酚 A 也会使雌鱼生殖力降低 , 具体表现在 es trad io l, inc lud ing env ironm en ta lly re levan t 产卵量下降 。 concen tra tions, on rep roduc tion af te r exp osu re 双酚 A 对斑马鱼子代有强烈的致畸性 , 亲鱼 du ring em b ryo la rva l2, juven ile2 and adu lt2life s tages ( ) in zeb raf ish D an io rerio [ J ]. A ox ico l, 2004, 68, 的配子受 到 双 酚 A 的 影 响 , 导 致 子 代 畸 形 率 上 193 - 217. 升 , 而且这种致畸性跟浓度无关 。虽然双酚 A 不 M cG in ley M , A qua t T. The inf luence of a p os itive [ 11 ] 影响仔鱼的存活时间 , 但是高浓度时会使卵壳变 co rre la tion be tw een c lu tch s ize and offsp ring f itness 薄缩短仔鱼的破膜时间 , 从而影响子代质量 。on the op tim a l offsp ring s ize [ J ]. Evo l Eco l, 1989, 3, 150 - 156. V ance, R. R. O n rep roduc tive s tra teg ies in m a rine [ 12 ] 参考文献 : ben th ic inve rteb ra tes [ J ]. Am N a t, 1973, 107, 339 - [ 1 ] C a rlsen E, G iw e rcam A , Ke id ing N , et a l. Ev idence 352. fo r dec reas ing qua lity of sem en du ring the p as t 50 [ 13 ] V ance, R. R. M o re on rep roduc tive s tra teg ies in m a2 yea rs [ J ]. B r M ed, 1992, 305: 609 - 613. rine ben th ic inve rteb ra tes [ J ]. Am N a t, 1973, 107, [ 2 ] S ha rp e R M , S kakkebaeck N E. A re es trogens invo l2 353 - 361. ved in fa lling sp e rm coun ts and d iso rde rs of the m a le rep roduc tive trac t [ J ]. L ance t, 1993, 341: 1392