草业科学专业优秀论文 农杆菌介导的bar基因在二穗短柄草中的遗传转化研究

草业科学专业优秀论文 农杆菌介导的bar基因在二穗短柄草中的遗传转化研究 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献 草业科学专业优秀论文 农杆菌介导的BAR基因在二穗短柄草中的 遗传转化研究 关键词:农杆菌介导 BAR基因 二穗短柄草 遗传转化 摘要:模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体， ，BD21-3，BDR018三研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21 个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的 ，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，菌株AGL1 在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化 (1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三效率较高，平均转化效率为21 个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 正文内容 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的最低。 菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后， 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种 1(二BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三 (3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进个品种的未成熟胚，将其分为小于0 行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的最低。 菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 -PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，提取转化植株的RNA进行RT 所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos ,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化作为选择剂，每2 效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷 :Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合31孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种 1(二BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导 、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率率均较高，分别为85% 最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化 (1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三效率较高，平均转化效率为21 个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到 1代抗性株系喷了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 模式植物的研究是分析植物遗传特性的一种重要方法，近几年，二穗短柄草(Brachypodium distachyon)做为一种新型的禾草模式植物被广泛应用，其最大特点是:生长周期短，基因片段小。随着试验室研究的不断深入，人们更加清楚的认识到它做为禾草模式植物的可能性。本试验以二穗短柄草二倍体品种BDR018为材料，建立了一个高效农杆菌转化体系。主要研究结果如下: 1(二穗短柄草离体再生体系的优化试验。试验主要以二穗短柄草未成熟胚为外植体，研究了胚的大小对愈伤组织的诱导和再生的影响。取DB21，BD21-3，BDR018三个品种的未成熟胚，将其分为小于0(3mm、0(3mm,1mm和大于1mm三个等级进行诱导培养，结果发现，三个品种中大小介于0(3mm,1mm之间的未成熟胚诱导率均较高，分别为85%、85%、74%，其中BDR018愈伤的再生能力最强，白化率最低。 2(BDR018遗传转化体系的建立。本试验用携带T-DNA质粒PDM805的菌株AGL1，对来自未成熟胚的胚性愈伤进行浸染，bar基因被用作选择标记基因，在转化后的抗性愈伤筛选培养基和再生培养基中，均添加5mg/L的bialaphos作为选择剂，每2,3周继代一次。结果显示，年龄在5,8周范围内的愈伤转化效率较高，平均转化效率为21(1%。 另外，还比较了Yep、MG/L、MS2(5三个液体培养基对bar基因转化效率的影响，其中MG/L最佳，加入乙酰丁香酮后，最高效率可达42(9%，这是所报道的相同愈伤年龄下最高转化效率。 3(抗性植株的检测。取携带质粒PDM805的转化植株的新鲜叶片进行叶片测试和GUS染色测试，结果显示，叶片测试全部表现为阳性转基因植株;GUS检测中有91(4%的植株叶片呈现不同程度的蓝色，有蓝色出现的叶片说明了bar基因稳定表达。 提取转化植株的RNA进行RT-PCR扩增，结果显示，除了非转基因对照植株以外，所有的转基因植株均扩增出了400bp的bar基因cDNA片断。说明bar基因得到了稳定表达并表现出对除草剂的抗性。本试验还选取了8个T1代抗性株系喷Basta，1周后观察结果并记录，经卡平方检验后，结果显示8个株系全部符合3:1孟德尔遗传分离规律。这表明，目的基因整合到了二穗短柄草BDR018基因组中，并能稳定表达。 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 《《《特别提醒》》》:正文内容由PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 。如还不能显示，可以联系我q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。 " 换烫梯葺铑? 垐垯櫃 endstream endobj 2 x滌甸??*U躆? 跦??ǜ?l, 墀VGi?o嫅#^4K錶c&伣嘰呐q 虻U節鉡c姥 ? ?BL偤7.X 哖?]驳疗" g讍` l/<5蔍`7sQ\I vs疖 ?S [J%J v I雓1傀 7鑥 伍妰遠Y 魥 靤 /W鐼E 霯q聊湝 ECu?knb?.:?澍羈 7?坋:;俐hEan[2 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 P6?!八帊/=櫕貵`Wp?U脞姦%?qj ?颬 儼噃I V 壂 G邊??Vг忣鏕裚?靈模? ?慞 擭昄X?;萕屄P,' 枍U霩R嚵蝆RC`珵墂锬襵")焟滫?ob#噡滴覇羘幥d Peブt?Pf臕?m稅盠?恁 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 v_關lm ,OMK?^'vOp牯V睟艶頛4. ?鮠4l 【精品】毕业论文 优秀毕业论文 本科论文 专业学术论文 参考文献资料 O??鼎? #濔%滷?腵鳐 #C?另 v|j'珬 i|葙K 羇胞Tt?"1鱳忞1? ?#1? ?# 谺? 豣? 豅? 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