Lyso-Tracker Red (溶酶体红色荧光探针)使用说明

Lyso-TrackerRed(溶酶体红色荧光探针)使用说明货号：L8010规格：50μL（1mM）保存：-20℃避光保存，半年有效。产品说明：Lyso-TrackerRed是一种溶酶体(lysosome)红色荧光探针，可以用于活细胞溶酶体特异性荧光染色。Lyso-TrackerRed为采用DND99进行了荧光标记的带有弱碱性的荧光探针，可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中，从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。中性红(NeutralRed)和吖啶橙(AcridineOrange)也都可以对溶酶体进行荧光染色，但中性红和吖啶橙的染色缺乏特异性。Lyso-TrackerRed呈红色荧光，检测时的最大激发波长为577nm，最大发射波长为590nm。按照1:20000的比例稀释，可以配制1000mlLyso-TrackerRed工作液。使用说明：1.Lyso-TrackerRed工作液的配制：a.取少量Lyso-TrackerRed按照1:13333-1:20000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中，使最终浓度为50-75nM。例如取1μlLyso-TrackerRed加入到20ml或13.33ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中。混匀后即为Lyso-TrackerRed工作液。b.Lyso-TrackerRed工作液使用前需37℃预温育。注：工作液中Lyso-TrackerRed的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的Lyso-TrackerRed。2.溶酶体的荧光标记：a.去除细胞培养液，加入步骤1配制好的并37℃预温育的Lyso-TrackerRed染色工作液，与细胞37℃共孵育30-120分钟。b.去除Lyso-TrackerRed染色工作液，加入新鲜的细胞培养液。c.随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到溶酶体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳，可以提高Lyso-TrackerRed染色工作液中Lyso-TrackerRed的浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。注意事项：1.Lyso-TrackerRed(1mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。2.荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。3.需自备盖玻片和载玻片。4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。