[doc] 兔肌肉种植VX2瘤前后及发生转移后TNF、IGF、CA-50的变化
兔肌肉种植VX2瘤前后及发生转移后
TNF、IGF、CA-50的变化
蝇眯2006年11,j笫26卷笫11期ClinicalMedicine,Nov.2006.Vo1.26.No.11
程巾也大多伴有CAM或配基的变化,其中包括选择素及其所
识别的配基.细胞粘附分子CDI5是选择素所识别的比较确定
的一个配基.研究证实,CD15的
达与许多肿瘤的侵袭,转移
及预后密切相父,被视为一些肿瘤预后不良的标志物.Togaya.
chi等…研究认为CDI5的表达肺癌的发展,转移及预后有密
切关系.Ohyama等对小鼠进行肺痛细胞转染试验及CDI5
测定,研究证实CD15与肺癌的转移密切相关.Nakagoe等
的研究发现CD15的表达与结直肠癌患者的生存期相关,可作
为判断患者预后的有用指标.本组研究表明CD15与淋巴结是
-否转移有关,而与肿瘤的大小,类型,细胞分化程度等均无关.
当细胞的基因构成和表达发生异常改变时,肿瘤细胞结构糖复
.合物组成及配比会发生各种变异,表现为某些糖基成分的显露
或消失,或原有糖基成分数量与分布状态发生改变.肿瘤的转
移是一个复杂的多环节过程,肿瘤细胞在原发灶恶性生长并脱
离,是肿瘤转移的关键条件,『『l=f肿瘤细胞与内皮细胞,细胞外基
质粘附,又是癌m行转移不可缺少的环节.很可能CD15是通
过与其受体的相互识别促使肿瘤细胞易__f进入血管腔,导致转
移发生而CD15与MMPs之间的关系以前未见报道,本组研
究显永MMP一2,MMP,9与CD15的表达有关,推测是否与肿
瘤细胞与基质的粘附有关,还需要更深入的研究.
MMPs/TIMPs,CD15在肺癌侵袭转移中的重要作用已被众
多研究证实,对它们的深入研究及进一步探讨不仅有助于加深
对肿瘤侵袭转移的认识,同时也为肿瘤治疗提f{}了一个极有希
埋的发展方向.谢建武等”用反义cDNA基因转染人肺巨细
胞癌细胞系BE1后发现MMP一9表达受到抑制,癌细胞的浸润
和转移能力大大下降.牛桂莲等构建r全长TIMP一3eDNA
的真核表达载体转入肺巨细胞癌细胞系BE1后发现转染后的
细胞侵袭和转移能力显着降低.目前,第?二代MMPs抑制剂
Marimastat已在美国,欧洲,加拿大等地用于肺癌的治疗,它和
其他人工合成的TIMPs制剂如Batimastat,BAYI2—9566,
AG3340等有望成为手术,放疗,化疗等传统治疗措施的理想补
充.希望随着分子生物学的进展,人类对肿瘤侵袭转移将
有确切的认识,为开发防止肺癌转移和复发的新药提供新的思
路.
-
79?
参考文献
lNomuraH,FujimotoN,SeikiM,eta1.Enhancedproductionofmatrixmet—
ailoproteinasesandactivationofmatrixmetalloproteinase一2(gelatinase
A)inhumangastriccarcinomas.IntJCancer,1996,69(1):9—16.
2JonbsJL,WalkerRA.Controlofmat!ixmetalloproteinaseactivityincane—
er.JPathol,1997,l83:377.
3Gonz~ez—AvilaG,hurriaC,VadilloF,eta1.72一KD(MMP一2)and
92一KD(MMP-9)typeIVcollagenaseproductionandactivityindiffer-
enthistologictypesoflungcancercells.JPathobiology,1998,66:5一l6.
4杨火运,丁翠敏,孙志学,等.革质金属蛋白酶一2及其抑制剂在肺癌
侵袭转移中作用的研究.围外学呼吸系统分册,2005,25:407—9.
5YlisimioS,HoyhtyaM,TurpeenniemiHT,eta1.SerumMMP一2,9and
2inlungcancer—TIMP,1asaprognosticmarker.AnticancerRes.
2000(2):1311—1316,
6ThomasP,KhokhaR,ShepherdFA,etal,1)ifferentialexpressionofma-
trixmetallopmteinasesandtheirinhibitorsinnon——smMlcelllungcane.
er.JPathol,2000,190(2):150—156.
7TogayachiA,KutoT,IkeharaM,eta1.Up—regulationofLewisenzyme
(Fuc—T?)andplasma—typealpha,3fucosyhransferase(Fuc—TVI)
expressiondeterminestheaugntentedexpressionofsialylLewisXantigen
innon—smallcelllungClJYlccr.IntJCancer,1999,83(1):7O一79.
8OhyamaC,TsuboiS,FukadaM.DualrolesofsialylLewisXoligosaccha-
tidesmetastasisand州ectionbynaturalkillercellsEMBOJ,1999,l8
(6):l5l6一l525.
9NakagoeT,FukushimaK,NanashlmaA,eta1.ExpressionofLewisa,sia—
lylLewisa,LewisX,andsiMylLewisXantigensaspmgnosticfactorsin
760. patientswithcolorectalcancer.CanJGastr~nteml,2000,14:753—
t0谢建武,方伟岗,李红梅,等.金属蛋门酶MMP,9反义蛙冈对转
移性肺细胞癌系的转染效应.【I1牛病理学杂志,1999,28(4):
2lO一2I1.
11牛桂莲,方伟岗,郑杰,等.TIMP一3基因转染抑制人肺煽细胞系侵
袭与转移的研究.叶1华病理学杂志,1998,27(6):421—424.
12WojtowiczPragaS,Clinicalpotentialofmatrixmetallopmteaseinhibi-
tots.DmgsRD,1999,l(2):117—129.
(收稿n期:2006,04—11)
(本文编辑:靳云凤)
?
‘
兔肌肉种植VX2瘤前后及发生转移后TNF,IGF,CA一5O的变化
高庆合刘建国袁来顺粱国琴
(山西省大同市第七人民医院普外科,大同037005)
【摘要】目的观察兔肌肉种植VX瘤前后及在肝,肺发生转移后肿瘤坏死因子(TNF),胰岛素生长因子(IGF),
CA一50的改变情况.方法将健康雄性3年的新西兰大白兔8O只,分成两组,外照射,体外高频热疗组(治疗组),对照
组各40只.观察肿瘤直径,生存期,同时检测TNF,IGF,CA一50.在
VX2瘤种植前后和发生转移后的变化情况.结
果治疗组肿瘤直径小于对照组(P<0.01);治疗组兔生存期长千对照组(P<0.01);VX瘤移植成功后细胞因子的
变化为TNF,IGF,CA一50增高(P<0.01);肺,肝转移在治疗组中明显少于对照组(P<0.01);在发生肺,肝转移兔中
相比IGF,CA一50增高,TNF降低,与未发生肺,肝转移的兔相比,差异有统计学意义(P<0.O1).结论VX种植成功
后埘实验兔的TNF,IGF,CA一50产生影响,发生肺,肝转移后IGF,CA一50增高,TNF降低.
【关键词】VX瘤;种植;转移;细胞阗子
-
80-临床医学20o6年l】月第26卷第11期Clinica1Medicine.Nov.2006.Vo1.26,No.11
ChangesofTNF,IGFandCA-50infore—andaftVX2carcinomareplantedin
rabbitsmuscleandafterhadbeenme-
tastasizedGAOQ,
咖,HUJianguo,YUANLaishun,LIANGGuoqin.DepartmentofGeneralSttrg
ery,theSeventhPeople~Hos-
pitafofDatong,Datong037005,Shanxi
【Abstract】ObjectiveToobservethechangesofTNF,IGFandCA一50infore—and—aftVXcarcinomareplantedinrab-
bitsmuscleandafterVX2carcinomahadbeenmetastasizedinliverorlung.MethodsEightymalewhitehealthyrabbitswerese-
lected,anddividedthemintotwogroups.Therewere40rabbitsintreatmentgroup,treatedwithteletherapyandlocalhyperther-
mia.Sowerethecontrolgroup.Tumorsdiameter,timeofsurvivalwereobservedand,changesofTNF,IGFandCA一50infore—
and—aftVX2carcinomareplantedandafterVX2carcinomahadbeenmetastasizedinfiverorlungwereexamined.ResultsIn
thediametersoftumorsortheirtimeofsurvivalintreatmentgroupwassmallerorlongerthancontrolgroup(P<0.O1);Therate
ofliverorlungmetastasisintreatmentgroupwaslowerthancontrolgroup(P<0.O1);TNF,IGFandCA一50werehigherin.
fore—and—aftVX2carcinomareplanted(P<O.O1);IGFandCA一
50weregottenhigher,TNFwasgottenlower(P<O.O1),
andtherewasstatisticallysignificantdifferencebetweenthedivertedrabb:itsandotherrabbits+ConclusionVX2carcinomare-
plantedobviouslyinterferedtheirchangesofTNF,IGFandCA一
50;AfterVX2carcinomahadbeendivertedinliverorlung,IGF
andCA一50weregottenhigher,butTNFwasgottenlower.
【Keywords]VX2carcinoma;Planting;Diversion;Cytokine
VX:瘤是Shope病毒诱发的乳头状瘤恶变后经兔传代而
取得的实验性肿瘤,近似于人的实质器官原发恶性肿瘤,将其
接种于兔的肝脏进行动物实验研究模型的制作,迄今有报
道.但将其种植于肌肉以及肺,肝的转移情况在国内尚少
见报道.现将我们的实验情况报道如下.
】资料与方法
1.1一般资料:动物模型制作:选用动物为健康,雄性,3年的
新西兰大白兔8O只,实验动物由山西医科大学大同医学院动
物饲养中心提供,体重5kg[(5?0.35)kg],随机分为外照射,
热疔组(治疗组),对照组各40只.中国医学科学院细胞中心
提供VX瘤大白兔,断颈处死带瘤兔,在无菌条件F取出肿瘤,
机械匀浆制备成单细胞悬液(每毫升含1O个细胞),选择大白
兔的右后肢肌肉内注射已制备好的单细胞液lml.接种后1O一
12d,实验动物均可触及2.5—3cm的肿瘤为种植成功.
1.2方法:
1.2.1外照射采用SIEMENSPR1MUS—M直线加速器产生的
6MV—X射线,将野中心对准兔右腿处肿瘤采用SSD照射,
野边界在肿瘤边缘外方3,5cm,照射剂量200cGy/f,
DT2000cGy/10f/20d.常规分割治疗,将动物固定于木板之上.
1.2.2热疗采用珠海产的HG一2000型体外高频热疗机,输入
电压220V,温度控制在42.5—43.0?,机控输入功率在90%一
95%,}f算机控制与其温度相关,大于此值温度达45?,小于此
值温度低于42?.每次热疗lOmin,1次/d,共15d.
1.2.3放射免疫监测:分别于移植前24h,种植成功后(移植
后),治疗后第4周空腹状态_F抽耳缘静脉血分离血清,检测项
目为:TNF,IGF,CA一50.
1.2.4放射免疫测定药盒及设备:细胞因子放免测定试剂由
九鼎医学生物有限公司提供;使用上海原子能研究所日环仪器
‘
厂SN~695B型智能放免一测量仪,测定均严格按照试剂
说明书进行操作.
1.2.5对照组未行任何治疗.
1.3统计学处理:计箭资料以均数-1-标准差(?s)表示,结
果采用t检验,计数资料采用卡方检验.
2结果
2.1肿瘤大小及转移,死亡情况:
2.1.1肿瘤大小:治疗前各组肿瘤直径大小比较差异无统计
学意义(P>0.05),有可比性.治疗结束后比较各组肿瘤直
径,治疗组肿瘤直径为(4.94?1.67)em,对照组肿瘤直径为
(11.23.4-2.79)cm,肿瘤张比较高.有的已破溃(两组肿瘤直
径比较.t=4.98.P<0.O1,差异有统计学意义).
2.1.2生存及转移情况:治疗组生存天数为(63.55?5.35)d;
对照组生存天数为(41.76.4-3.43)d.两组生存天数比较差异
有统计学息义(t=8.92,P<0.01).肺,肝转移情况:治疗组
肺,肝转移比例为6/40;对照组肺,肝转移比例为32/40.两组
肺,肝转移比较差异有统计学意义(×=33.88,P<0.O1).发
生转移者和未发生转移者TNF,IGF,CA一50的变化情况见表1.
表1发生肺,肝转移和未发生转移者TNF,IGF,
CA一50的变化比较(?)
2.1.3肌肉移植前后TNF,1GF,CA一50的变化情况,见表2.
表2移植前后TNF,IGF,CA一50的变化情况(4-s)
3讨论
兔VX瘤模型足一个成熟,稳定且应用广泛的肿瘤实验模
型,种在兔大腿f的VX瘤,一般用作传种之瘤株,兔大腿肌肉
血运丰富,VX瘤易于成活和观察,因此选择在兔大腿处接种.
在移植前和种植成功后,所观察的细胞因子(CK)变化表现在
TNF,IGF,CA一50均增高.TNF是迄今发现的抗肿瘤活性最强
的细胞因子,可以引起肿瘤组织出血坏死,TNF的抗肿瘤作用
已在动物转移瘤和人体肿瘤得到证实.恶性肿瘤病人PBMC产
生_rNI能力增强,血浆TNF水平升高,与本实验结果一致.
本次实验还观察到发生肺,肝转移的TNF明显低于未发生肺,肝
转移者,这也可能与TNF的抗肿瘤作用有关.
IGF及其受体(IGF一1R)与肿瘤的关系是近年研究的热点,
研究表明,IGF是促肿瘤生长因子,而IGF的活性主要是通过
IGF一?R介导的,且IGF—lR在许多恶性肿瘤中表达上调.
术,:2006q-:11JJ第26卷第l1崩CIiniealMedicine,Nov.2006.Vo1.26,No.11
IGF一1R通过促进细胞增殖,抑制细胞凋亡与其他牛长因子如
VEGF—C的信号传通路相瓦作用实现促瘤作用,与诱导和保
持肿瘤细胞的表型及浸润,转移密切相关J.这也可能与发生
肺,肝转移兔IGF明显增高有关.
CA一50是以唾液酸脂和唾液糖蛋白为主体成分的糖类抗
原,是一种普遍存在的肿瘤标志相火抗原,而不足特指某个器官
的肿瘤标志物.所以住兔移植成功后CA一50明显升高,发生
肺,肝转移者的CA一50也明显高F未发,I肺,肝转移者
参考文献
1柳峨,乍欣,赵俊功,掌,免VX肝癌模制n及综l八膨像评价,实川
-
8l?
放射学杂志,2002,馆:132—134.
2邵罔良,周康荣,F缱华,等.介入治疗研究【fJ免VX卅q带模刑制作的
改进和cT评价.临床放射学杂志,2002,19:653—654.
3陆琰档,曹纬,喻德洪.肿州坏死fq了在肿瘤研究和治疗领域中的新进
展.1lI肿瘸生物治疗杂忠,2002,9(4):297—299.
4陈琳,张绍仪,贤战生,等.帅瘾患辑mslL,一2R和TNF—oL的检测
及LL,{OiJ术意义.实川刖熘杂志,1995,1o(4):207—209.
5肖君,孙维佳.IGF一1RJN’N父系的研究进腱.通外科杂志,
2004,13(3):220—223.(收稿I}IJ:2006—03—30)
(本文编辑:朱耐婷)
t’53和P63在胰腺肿瘤中的表达及其意义
钱海龙贺夫林
(浙江省宁波市解放军一一三医院普外科,宁波315040)
【摘要】目的研究P53,P63基因在胰腺肿瘤巾的表达及其意义;P63基因表达与P53,增殖细胞核抗原(PCNA),PI6表
达的关系及意义.方法通过免疫组化方法对63例胰腺肿瘤和6例慢性胰腺炎手术标本进行了P53,P63,PCNA,PI6蛋
白的表达研究,探讨它们之『H】的联系和它们与胰腺癌临床分期,病理分型,预后及转移等生物学特性的关系.结果P63在
胰腺导管腺痛巾表达,在腺鳞痛中高表达,6例腺鳞癌有5例P63染色阳性,阳性率为83.3%.P63在腺鳞癌中的高表达
伴有胰腺抑癌垡凼P16的缺失,同时伴有PCNA的高表达,即伴有细胞增殖度的升高,但P63在腺鳞癌中的高表达与P53基
因突变_兀显着相炎性.住胰腺组织巾叮见r泛的胰岛细胞P63染色阳性,染色部化主要位于细胞胞浆.突变型P53蛋白
在胰腺痛中的表达-j胰腺痛病理分型,临床分期,转移及坝后无明相关性.结论P63基表达是胰腺腺鳞癌的重要组
织:特征,P63的表达在腺鳞癌发病过程巾起了罩要的作用.P53基凶突变是胰腺癌发生发展巾的一个晕要事件.
【关键词】P53;P63;增殖细胞核抗原;P16;基因突变;免疫组化
ExpressionofP63andP53inpancreaticneoplasmsQIANHailong,HEF~lin.DepartmentofGeneralSurgery.thePIl3
Hospital,Ningbo315040,Zhejiang
【Abstract】
ObjectiveTostudytheexpressionof1~63andP53,therelationbetweentheexpressionofP63,1953andPCNA,P16
inpancreaticneoplasms.MethodsTheexpressionofP63,P53,PCNAandP16aredetectedbyimmunohistochemistryin63pa—
tientswithpancreaticneoplasm,including42casesofductaladenoeareinoma,6casesofadenosquamouscarcinoma,8casesofmalig—
nantchangesincystadenomaand7casesofcystademoma,comparedwith6casesofchronicpancreatitis.ResultsI)63gene(1idnot
expressinthepancreaticductadenocarcinoma,butexpressedhighlyintheadenosquamouscarcinolna.TheexpressionofP63genein
theadenosquamouseareinomaaccompaniedwiththedepletionofP16geneandthehighexpressionofPCNAwhichmeanedthestep
—
upofcellproliferation.Buttheexpressionof1)63hadnorelationwithP53P63expressedintheisletsofpancreas.Themutant
1”53hadnocorrelationwiththepathologytype,clinicalstage,metastasisandprognosisofpancreaticneoplasm.CondusionItis
showedthattimexpressionofP63geneistheimportanthistologicalcharacter
ofpancreaticadenosquamouscarcinoma.Theexpres—
sionofP63maybeplayanimportantroleintheoccurrenceofpancreaticadeno
squamouscarcinoma.Buttheexpressionof1)63has
norelationwithP53.Thenmtationofp53genefacilitatetheproliferationofpa
ncreaticneoplasm.
【Keywords】P53;P63;PCNA;P16;Genemutation;lmmunohlstochemistry
?P53作为一种人类肿瘤中广泛发生突变的抑癌基,一直是
肿瘤研究领域的热点.1998年,Osda等发现J,P53家族一成
?员P63,P53,P63,P73共同组成J,P53家族.研究发现,P53家族
成员都能激活P53卡H关靶基【大1,引起细胞周期停滞及细胞凋
亡,fllI进一步研究发现,它们的结构和功能并不完全相同,P63
及P73fJl起细胞凋r的途径也不完仝i-jt-’53相,P63不象
1-’53那样是一个标准的抑痛基因.研究表明,P63与上皮源性肿
瘤的发生发展关系较为密切.因此,本文采用免疫组化S—P法
和Envision法测定J,P53,P63,增殖细胞核抗原(PCNA)及P16
在胰腺肿瘤中的表达,并对其与胰腺癌病理学分型,临床分期,
转移及预后等肿瘤牛物学指标问的关系作,分析,以进一步探
讨P53家族在胰腺肿瘤发病机制中的意义及其临床价值.
I材料与方法
I.I标本:69例胰腺标奉均取自第?军医大学长海医院1996一一
2001年手术切除后标本,Itt废院病理科取材,固定,石蜡包埋.
1.2临床资料:1996,2001年间长海院胰腺肿瘤患者63例,
其中男性43例,女性20例,年龄3l,86岁,,均67岁,【fJ位值
为64岁.另外,我们采用同期手术的6例慢性胰腺炎标本作对
照.其中男性4例,女性2例,年龄41—52岁平均46岁.63例
胰腺肿瘤中包括了42例胰腺导管腺癌(5例胰腺粘液腺癌,l3
例高分化胰腺腺癌,13例中分化胰腺腺癌,11例低分化腺癌),7
例胰腺囊腺瘤,8例囊腺瘤癌变,6例腺鳞癌(包括1例胰头导管