HPLC法测定羚牛角二十五味丸中栀子苷含量

HPLC法测定羚牛角二十五味丸中栀子苷含量 HPLC法测定羚牛角二十五味丸中栀子苷 含量 中国药事2008年第22卷第6期491 HPLC法测定羚牛角二十五昧丸中栀子苷含量 潘强,陈野,邹淼.(辽宁省食品药品检验所,沈阳110023;抚顺市药品检验所; 本溪市药品检验所) 摘要:建立高效液相色谱法测定羚牛角二十五味丸中栀子苷含量的方法.采用 HypersolCs色谱柱,流 动相为乙腈,水(12:88),检测波长为238nm,流速1.OmL?min,柱温为30.C.栀子苷 在0.1067, 0.6403~g范围内线性关系良好,r=O.9996;平均回收率为99.69~/oo,RSD为 0.18%o(一9).本方法简 便,准确,重现性好,适用于该药品成分的含量测定. 关键词:HPIC;羚牛角二十五味丸;栀子苷 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1002—7777(2008)06—0491—02 DeterminationofGeniposideofErshiwuweiPillsbyHPLC PanQiang.ChenYieandZouMiao(InstituteforFoodandDrugControlofIiaoningProvince. Shenyang,110023;InstituteforDrugControlofFushun;InstituteforDrugControlofBenxi) ABSTRACTAHPImethodforthedeterminationofGeniposideofErshiwuweiPillswasestablishe&The HPLCsystemconsistedofHypersolCl8column,HCN-H2O(12:88)mixtureasamobilephase,detecting wavelengthat238nm.Theflowratewas1.OmI?minandcolumntemperaturewas30.C.Thelinerrangwas 0.1067,0.6403~g,r=O.9999,theaveragerecoveryrate(X?SD)was99.69? 0.18respectively.Themethod wassimple,accurateandrepeatable.ItcanbeusedinthequalitycontrolofErshiwuweiPills. KEYWORDSHPIC:ErshiwuweiPills:Geniposide 羚牛角二十五昧丸由水牛角浓缩粉,牛黄,栀 子等二十五味药组成的复方制剂l1.为了控制产 品质量,保证疗效,我们参考有关文献一],建立 制剂中的栀子苷的含量测定方法. 1仪器与试药 高效液相色谱仪(岛津IC一10AD型高效液 相色谱仪,威玛色谱工作站);栀子苷对照品(中 国药品生物制品检定所,批号:110749—200512); 羚牛角二十五味丸(辽宁阜新蒙药有限责任公司, 批号:070701,070702,070703);乙腈为色谱纯; 水为纯化水;其他试剂为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:HypersolC18(4.6mm ×250mm,5ffm);流动相:乙腈一水(12:88); 流速:1.OmI?min;柱温:30C;检测波长: 238nm;进样量:20#I;理论板数按栀子苷峰计 算不低于2500.分离度不低于1.5. 2.2对照品溶液的制备取栀子苷对照品适量, 精密称定,加甲醇制成每lmL含50/~g的溶液,作 为对照品溶液. 2.3供试品溶液的制备取重量差异项下本品, 研成细粉,取本品粉末约0.1g,精密称定,置具 塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mi,密塞,称定重 量,超声处理20分钟(超声功率:400W;频率:40kHz), 放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇 匀,滤过,精密量取续滤液10mL,置25mL量瓶 中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液. 2.4阴性对照溶液的制备取除栀子以外的全部 成分,按处方工艺制成溶液,再按供试品溶液的制 备方法制成阴性对照溶液.羚牛角二十五味丸的其 他组分对栀子苷的测定无干扰,见图1. 2.5线性关系考察分别精密吸取对照品溶液2, 作者简介:潘强,大学夺科,主任药师,研究方向:药物分析;Tel:(024)88872922;E— mail:ZNS2197@yahoo.COIII.cn 492中国药事2008年第22卷第6期 24881012141818mIRO24681O121416181n a.阴性对照;b.样品;G对照品(栀子苷). 图1羚牛角二十五昧丸HPLC色谱图 4,6,8,10,12txL测定,以对照品进样量(fig) 为横坐标,峰面积为纵坐标,线性回归方程: y一1.984×10—X+2.113×10r:0.9996 结果明,栀子苷在0.1067,0.6403txg范围内线 性关系良好. 2.6方法学考察 2.6.1精密度试验精密吸取对照品溶液5ffI,重 复进样6次,栀子苷峰面积的相对偏差为0.17. 2.6.2稳定性试验取同一供试品溶液(批号 070701),分别于配置后0,2,4,8,12,24小 时,依法测定,结果表明,供试品溶液在24小时内 栀子苷峰面积积分值基本稳定不变,RSD为1.1. 2.6.3重复性试验精密称取羚牛角二十五味丸 同一批号(批号070701)样品6份,按上述方法 进行测定,考察方法的重复性,平均含量为 98.7,RSD一0.17,表明该法重复性良好. 2.6.4回收率试验采用加样回收率法,精密称 取样品5粒的重量(批号070701,含栀子苷 2.37mg/10粒),分别精密加入栀子苷对照品溶液 28.08,22.42,18.72Ixg?mL.的栀子苷对照品溶 液各50mI,共计9份,每3份平行测定,按上述 供试品溶液的制备方法及色谱条件,进行测定,结 果见表1. 表1回收率测定结果 2.7样品测定结果按照2.2,2.3的处理方法, 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5txI,注 入液相色谱仪.测定3批样品,测定结果见表2. 表2样品测定结果mg?10粒.. 3讨论 取栀子苷对照品及供试品溶液,按上述色谱条 件,在SPD-M20A二极管阵列检测器上(200, 400nm)对栀子苷峰进行紫外扫描,结果两者均在 238nm波长处有最大吸收. 称取本品3份,精密称定,分别置具塞锥形瓶 中,依照2.3样品溶液的制备方法分别超声处理 20,30,4O分钟.结果表明,超声处理20分钟以 上,提取液中栀子苷含量无明显变化,因此采用与 药典一相同的条件制备供试品溶液. 按处方药味的比例,自配不含栀子的群药,按 其工艺制成空白制剂,在上述色谱条件下测定,见 图,结果空白溶液在与栀子苷对照品相同保留时间 处未出现色谱峰,故认为无干扰,证明本法准确可 靠,方法可行. 参考文献: 江苏新医学院.中药大辞典EM].上海:上海科技技术出 版社.1977:1184. 《中华本草》编辑委员会.中华本草[M].L海:上海科学 技术出版社,1999:737. 中国药典[s].一部,2005:173. 卫生部颁药品标准Es].蒙药分册.1997:184. 赫玉霞,王中彦,曹侃,等.HLPC法测定栀子柏皮软胶囊 中栀子和小檗碱的含量EJ].药物分析杂志,2007,27 (12):1913. 毛明远.现代实用中药质量控制技术[M].北京:人民卫 生出版社,2000:972. 姜卫东.最瓶药检实验室标准技术操作规范实用手册[M]. 北京:中国科技出版社,1997:167. 王传辉.中药现代化研究的化学法导论EM].北京:中国 科技出版社,1997:479. 曾苏.生物样品中药物的提取分离方法及理论[JJ.药物分 析杂志,1989,9(4):249. 国家药品监督管理局.中药新药研究的技术要求EM].北 京:中国科技出版社.2000:177. 王野.中成药质量标准与标准物质研究[M].北京:中国 医药科技出版社,1994:339. 国家食品药品监督管理局.药物研究技术指导原则EM]. 北京:中国医药科技出版社,2006. 00 O 3 27O4O27O4 7O562855O 999999989 999999999 18O966254 9O4OOO228 565344111 互互互互互 444111666们?%吣% 1l1111OOO 173247O37M勰