不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的测定

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 7 期 2012 年 7 月 • 1347 • 不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的测定 郭增喜 1，李文庭 1，李兆奎 2 1. 浙江省食品药品检验所，浙江 杭州 310004 2. 台州市食品药品检验所，浙江 台州 318000 摘 要：目的 测定不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的量，研究不同产地枳壳的质量差异。方法 采用高效液相色谱法测 定，色谱条件为 Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（20∶80）（用磷酸调节 pH 值为 3）；体 积流量 1.0 mL/min；柱温 30 ℃；检测波长 283 nm。结果 朱栾枳壳未检出柚皮苷和新橙皮苷成分；江枳壳、川枳壳、湘枳 壳和常山胡柚均检出柚皮苷和新橙皮苷成分；陕西枳壳未检出新橙皮苷。江枳壳含 7.5%柚皮苷、5.6%新橙皮皮苷，量均为 最高。结论 朱栾枳壳与其他产地枳壳的成分有差异，不含有《中国药典》2010 年版规定的柚皮苷和新橙皮苷成分。 关键词：枳壳；朱栾枳壳；柚皮苷；新橙皮苷；HPLC 中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)07 - 1347 - 02 Determination of naringin and neohesperidin in Aurantii Fructus from different habitats GUO Zeng-xi1, LI Wen-ting1, LI Zhao-kui2 1. Zhejiang Institute for Food and Drug Control, Hangzhou 310004, China 2. Taizhou Institute for Food and Drug Control, Taizhou 318000, China Key words: Aurantii Fructus; Citrus aurantium L. var. decumana Bonar. (Zhuluan); naringin; neohesperidin; HPLC 枳壳来源于芸香科植物酸橙 Citrus aurantium L. 及其栽培变种的干燥未成熟果实，是一种常用中 药[1-3]。栽培变种包括黄皮酸橙 C. aurantium L. CV. Huangpi-Suanchen、代代花 C. aurantium L. var. amara Engl.、朱栾 C. aurantium L. var. decumana Bonar. 及 塘橙 C. aurantium L. CV. Tangcheng。枳壳主产于江 西、四川和湖南，分别称为江枳壳、川枳壳和湘枳 壳，为枳壳的主流品种。浙江是传统的枳壳产地之 一，有金华产的代代花枳壳和温州产的朱栾枳壳。 本实验收集 6 个不同产地的枳壳样品，参照《中国 药典》2010 年版方法，测定不同产地的枳壳中柚皮 苷和新橙皮苷的量，为枳壳的质量控制提供依据。 1 材料 Agilent 1100 系列高效液相色谱仪（G1322A 脱 气机、G1313A 自动进样仪、G1316A 柱温箱、 G1314B 紫外检测器）和 Agilent Chemstation 工作 站；Metiler AE240 型电子天平。 柚皮苷（批号 0722-200108）、新橙皮苷（批号 111857-201001）对照品由中国药品生物制品检定所 提供。乙腈为色谱纯，水为重蒸水，甲醇、磷酸为 分析纯。枳壳 Aurantii Fructus 样品由郭增喜副主任 中药师鉴定，见 1。 2 方法与结果 2.1 色谱条件[1] Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）， 流动相为乙腈-水（20∶80）（用磷酸调节pH值为3）； 体积流量 1.0 mL/min；柱温 30 ℃；检测波长 283 nm。色谱图见图 1。 表 1 样品信息 Table 1 Information of Aurantii Fructus 编号 样 品 拉丁名 产 地 收集时间 1 朱栾 枳壳 Citrus aurantium var. decumana 浙江省洞 头县 2011-08 2 江枳壳 C. aurantium 江西 2011-01 3 川枳壳 C. aurantium 四川 2011-01 4 湘枳壳 C. aurantium 湖南 2011-01 5 常山胡柚 C. changshan-huyou 浙江衢州 2011-01 6 陕西枳壳 C. wilsonii 陕西 2011-01 收稿日期：2012-03-21 作者简介：郭增喜，副主任中药师，从事中药材真伪鉴定及质量检验研究。Tel: (0571)864594258 E-mail: guozengxi@163.com 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 7 期 2012 年 7 月 • 1348 • a-柚皮苷 b-新橙皮苷 a-naringin b-neohesperidin 图1 混合对照品 (R) 和不同产地枳壳样品 (1～6) 的HPLC图 Fig. 1 HPLC chromatograms of mixed reference substances (R) and other Aurantii Fructus (1－6) from different habitats 2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取柚皮苷和新橙皮苷对照品适 量，加甲醇制成含柚皮苷 80.32 μg/mL 和新橙皮苷 86.04 μg/mL 的混合对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 精密称取各样品粗粉约 0.2 g，置具塞锥形瓶 中，精密加入甲醇 50 mL，称定质量，加热回流 1.5 h，放冷，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过。精 密量取续滤液 10 mL，置 25 mL 量瓶，加甲醇至刻 度，摇匀，即得。 2.4 线性关系考察 精密吸取混合对照品溶液 0.5、1、3、5、10、 15 µL 注入液相色谱仪，色谱峰峰面积为纵坐标（Y）， 进样量为横坐标（X）绘制标准曲线，柚皮苷与新橙 皮苷线性回归方程分别为：柚皮苷 Y=1.481 4 X－ 1.663 7（r=0.999 9），新橙皮苷 Y=1.541 X＋25.472 （r=0.999 8），结果表明柚皮苷进样量在 40.16～ 1204.8 ng，新橙皮苷在 43.02～1 290.6 ng 与峰面积 呈良好线性关系。 2.5 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液 10 μL，按“2.1”项 下色谱条件连续进样 6 次，测定其柚皮苷和新橙皮 苷峰面积的 RSD 分别为 0.28%和 0.45%。 2.6 稳定性试验 取川枳壳供试品溶液按“2.1”项下色谱条件分别 在 0、2、4、8、12、18、24 h 进样，测定柚皮苷和新 橙皮苷峰面积，峰面积 RSD 分别为 0.45%和 1.06%。 2.7 重复性试验 精密称取川枳壳样品 6 份，依“2.3”项下方法 分别制备供试品溶液，测得柚皮苷和新橙皮苷成分 的质量分数的 RSD 分别为 0.58%和 0.68%。 2.8 加样回收率试验 精密称取已测定的川枳壳样品 0.1g，共 6 份， 分别加入含柚皮苷 0.201 mg/mL、新橙皮苷 0.196 mg/mL 对照品溶液 25 mL，再加入甲醇 25 mL。按 “2.3”项下方法制备供试品溶液，依法测定柚皮苷 和新橙皮苷峰面积，并计算回收率，柚皮苷和新橙 皮苷的回收率分别为 99.83%和 99.92%，RSD 分别 为 1.61%和 1.00%。 2.9 样品测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10 μL，注入液相色谱仪，样品测定结果见表 2。 表 2 不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的量 Table 2 Determination of naringin and neohesperidin in Aurantii Fructus from different habitats 样品 柚皮苷 / % 新橙皮苷 / % 1 － － 2 7.5 5.6 3 4.9 4.8 4 4.3 2.2 5 2.6 1.5 6 5.2 － “－”-未检出 “－”- undetected 上述样品中，朱栾枳壳未检出柚皮苷和新橙皮 苷成分；江枳壳、川枳壳和湘枳壳均检出《中国药 典》2010 版规定的柚皮苷和新橙皮苷成分；陕西枳 壳未检出新橙皮苷；常山胡柚也能检出柚皮苷和新 橙皮苷成分。朱栾枳壳与其他来源枳壳成分有差异。 3 讨论 中药材所含成分受到品种、产地、采收时间和 加工方法等的影响，在多来源的药材中品种的变化 直接影响成分的不同；根据本实验结果，江枳壳含 柚皮苷 7.5%，新陈皮苷 5.6%，量均为最高。朱栾 枳壳中未能检出规定的柚皮苷成分。这说明在枳壳 等药材的检验中，必须做好品种鉴定，保证来源符 合规定。执行标准时应该注意指标成分的检验，只 有来源和指标成分均符合检测规定才是合格药材。 参考文献 [1] 中国药典 [S]. 一部. 2010. [2] 董 玄, 高文远, 李凤阁, 等. RP-HPLC 法测定枳壳药 材中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷 [J]. 中草药, 2009, 40(增刊): 283-284. [3] 中国药品生物制品检定所 . 现代实用本草 [M]. 北 京: 人民卫生出版社, 2001. R 1 2 3 4 5 6 b 0 5 10 15 20 25 a t / min