血细胞计数实验报告

血细胞计数实验报告 细胞计数实验报告 细胞计数实验报告 一、目的 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好，所以要进行细胞计数 二、原理 细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。显微镜直接计数法是将一定稀释的菌体或孢子悬液注入血球计数板的计数室中，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。因为计数板是一块特别的载玻片。其上由四条槽构成三个平台;中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为九个大方格，一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小方格，无论哪种每个大方格中的小方格都是400个。每一个大方格边长为0(1mm，所以计数室的容积为0(1mm3。计数时，通常只用4个四周大方格内的细胞数即可。然后求出每个大方格的平均值，即得出一个大方格中的平均细胞数，再换算成lml菌液中的总细胞数。若设大方格中平均细胞数为N，菌液稀释倍数为M，则计算方法为: lml菌液中的总菌数=平均每个中格中菌的个数=10000xMxN=10000MN(个) 三、实验材料 普通显微镜、血球计数板、试管、吸管，微量移液管、细胞悬浮液 四、实验步骤 1、将血球计数板及盖片用擦试干净，并将盖片盖在计数板上。 2、将细胞悬液吸出少许，注射在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。 3、镜下观察，计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算: 细胞数/ml,4大格细胞总数/ 4×10000 注意:镜下偶见由两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团占10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液 五、实验结果 六、讨论与反思 注意多计数几次，求平均值 细胞要比较均匀的分布，四个大方格上的细胞数不应相差太多，否则重新混匀细胞悬浮液，再次计数 篇二:实验报告1(红细胞计数) 实 验 报 告 篇三:白细胞计数实验报告 白细胞计数和分类 目的:掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周 血五种白细胞形态 特点、 原理:各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏(Wright’s) 染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值，以观察其数量、形态和质量变化，通过显微镜观察染色血涂片，计算血液中各类白细胞的百分率，称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率，即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。 实验器材: 香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞 氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针 1ml刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片 实验步骤 白细胞分类 1(血片制作: 取一滴血，滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜(血膜不可过厚、过 薄)。将制好的血涂片晾干，不可加热。 注:(1)良好涂片: ,) 呈头、体、尾舌形 ,) 血膜厚薄适宜 ,) 两边留有空隙 (2)涂片好坏与下列因素有关: 1)血滴大小 2)推片与玻片之间角度 3)推片速度 2、血涂片的染色步骤: (1)用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于染色架上。 (2)滴加瑞氏染液，共计七八滴数，以盖满血膜为度，静置1分钟。 (3)再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液，轻轻摇动，并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀，静置15分钟。 (4)用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗，否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥，即可镜检。 3、白细胞分类计数:先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处(一般在体尾交界处)，在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数，计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞，各种白细胞所占的百分数。 4、各类白细胞的形态特征 嗜中性白粒细胞:圆形，胞浆淡红色，胞浆内有多量紫红色细 小颗粒(染色不佳时则看不清楚)。核为蓝紫色。 嗜酸性白细胞:大小、形态与中性白细胞大体相似，唯胞浆内含有粗大的鲜红色颗粒。核多数为两叶。 嗜碱性白细胞:大小、形态与中性白细胞大体相似，但胞浆内含有粗大的深蓝色，常遮盖在核上。核分叶不明显 淋巴细胞:分大小两种，小淋巴细胞圆形，核染成深紫色，圆形或肾形，胞浆很少，(转 载 于:wWW.xIElw.COM 写论文网:血细胞计数实验报告)常呈一小片月牙状，染成蓝色。大淋巴细胞，核圆形或肾形，胞浆相对较多，染成天蓝色，在胞浆与核之间有淡染带。有时内含少数紫红色大颗粒。 单核细胞: 核染成紫色，其染色质疏松，核形不规则。胞浆较多，染成浅灰蓝色 白细胞计数 加稀释液 用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。 吸取血液 用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次 混匀 冲池 将试管中血液与稀释液混匀，待细胞悬液完全变为棕褐色 再次将小试管中的细胞悬液混匀。用滴棒蘸取细胞悬液1滴，充入改良Neubauer计数板的计数池中，室温静置2-3min，待白细胞完全下沉。 计数 在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞总数 计算白细胞总数 =4大格白细胞数(N) /4×10 ×20 ×10 = N? 20 ×10 /L 注:计数板上下各一个计数池计数区域分为9个大方格，四角的大方格各划分为16个中方格，中央大方格划分为25个中方格。四角的大方格为白细胞计数区，大方格四边压线细胞计左不数右，计上不数下 实验结果 白细胞总数 白细胞=(35+42+39+37) /20*10 =7.65*10 /L 中性粒细胞65个,占65% 单核细胞5个,占5% 淋巴细胞:27个,占27% 嗜酸性粒细胞3个,占2% 嗜碱性粒细胞1个,占1% 注意事项 1、.采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。 2、白细胞总数在参考范围内，大方格间的细胞数不得相差10个以上，两次重复计数误差不得超过10,。 3、按一定顺序移动视野。 4、染色时切勿使染液干涸，否则发生不易去掉的沉淀。 5、水冲洗时间不宜过长，否则会脱色。 6、血涂片不可过厚 思考 1(白细胞核不着色可能是因为操作中那种误差引起的,